[實用新型]卵巢癌遺傳檢測試劑盒

有效

• 申請號: 200820156973.4
• 申請日: 2008-12-12
• 公開（公告）號: CN201390749Y
• 公開（公告）日: 2010-01-27
• 發明（設計）人: 賀憲民
• 申請（專利權）人: 上海榮健生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本實用新型屬生物技術領域，具體涉及一種卵巢癌遺傳風險基因位點檢測試劑盒，是通過利用熒光定量PCR，檢測被檢者基因組DNA樣本中的四個卵巢癌遺傳風險基因SNP位點基因型的試劑盒。

背景技術

卵巢癌是女性生殖系統常見的腫瘤之一，發病率僅次于子宮頸癌和子宮體癌而列居第三位，占所有婦科生殖系統惡性腫瘤的22.9％左右。卵巢癌的發病率不是最高，但其病死率卻居于各類婦科腫瘤的首位，對婦女生命造成嚴重威脅。其根本原因在于：卵巢的細胞發育、組織結構及內分泌功能較復雜，且卵巢癌臨床早期無癥狀，鑒別其組織類型及良、惡性相當困難，無論在診斷和治療上都是難題。到目前為止，就國內外臨床資料統計，卵巢癌患者的五年生存率僅25％～30％。

雖然卵巢癌的發病是一個復雜的過程，但遺傳因素在其中的作用不可忽視。研究發現，I相代謝、葉酸代謝、腫瘤轉移等相關基因是卵巢癌發病的重要因素，這些基因的變異將會影響卵巢癌的發病風險。通過基因檢測可以確定遺傳高風險人群，并可相應制定有針對性的預防和治療策略，對降低卵巢癌的發病和死亡都具有重要作用。

國內外大量的關聯研究表明，卵巢癌的發病與I相代謝、葉酸代謝、腫瘤轉移等相關基因上的SNP位點基因型有很密切的關系，其中最具臨床意義的是細胞色素P450?1B1基因(CYP1B1)上的Leu432Val位點、5，10-亞甲基四氫葉酸還原酶基因(MTHFR)上的C677T位點、鈣粘蛋白E基因(CDHl)上的C54T位點、基質金屬蛋白酶7基因(MMP7)上的A-181G位點這四個SNP位點。

細胞色素P450?1B1基因(CYP1B1)是細胞色素P450超基因家族成員，其表達的蛋白為肝外酶，主要在受內分泌調節的組織表達，如乳腺、卵巢、前列腺和子宮。CYP1B1被認為是多種癌癥的候選易感基因，其功能是激活環境中的前致癌物，同時催化雌激素轉變成為具有基因毒性的兒茶酚雌激素。研究表明，Leu432Val位點多態性導致CYP1B1基因編碼的血紅蛋白結合區(這一區域對CYP1B1的催化功能至關重要)的第3號外顯子氨基酸的改變，進而影響CYP1BI對多種前致癌物(如類固醇激素)的催化活性。野生型和具有多態性變異的CYP1B1對雌激素羥化作用存在明顯差異。與Leu432相比，Val432的4-羥化活性明顯升高4-羥化雌二醇與2-羥化雌二醇的比值升高，增加了基因毒性效應，導致卵巢癌的發病風險上升。

5，10-亞甲基四氫葉酸還原酶基因(MTHFR)的活性高低與卵巢癌的發病相關。當MTHFR活性降低時，葉酸代謝通路受阻，并進一步阻礙DNA甲基化，容易引發包括卵巢癌在內的各種腫瘤。在這種情況下，通過增加時酸的攝入量可以在一定程度上維持代謝途徑中各種物質的濃度，供生命活動各種所需，可以降低由于MTHFR活性降低而引發的腫瘤易感風險的上升。MTHFR基因第5號外顯子上的C677T位點突變，導致蛋白第222個氨基酸由Ala(A)變為Val(V)。該多態位點的基因型有CC、CT、TT，其中CT和TT被確定為卵巢癌的風險基因型。當攜帶風險基因型時，MTHFR耐熱性下降，酶活性減弱，生成5-甲基四氫葉酸減少，甲基傳遞通路受阻，引起DNA甲基水平降低，而低甲基化水平的DNA易引起DNA損傷和染色體畸變，最終導致卵巢癌等多種腫瘤的發病風險。

鈣粘蛋白E基因與癌癥惡性程度有關。當癌組織中鈣粘蛋白E表達完全缺失或僅表達無粘附作用時，則癌細胞獲得侵襲和轉移能力。相比惡性程度高的癌細胞，惡性程度低的癌細胞中鈣粘蛋白E表達較高。因此，基因功能的喪失被認為會通過增加增殖、侵入和/或轉移引起癌癥病情的惡化。多種惡性腫瘤中都發現鈣粘蛋白E的表達量減少，如卵巢癌、結腸癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌、皮膚癌、腎癌和肺癌等。CDH1基因上C54T位點是3’UTR端上的一個C/T多態位點。該位點有三種基因型，分別為CC、CT、TT，其中CC被確定為卵巢癌的風險基因型。當個體攜帶風險基因型時，CDH1基因的轉錄水平下調，表達量降低，細胞粘附作用被削弱，細胞信號轉導也減弱，使得癌細胞的分化降低、侵襲性升高、轉移性增強，癌癥的惡性程度也升高。