[實用新型]一步檢測豬細小病毒、豬乙型腦炎病毒抗體的試紙條

無效

• 申請號: 200820148806.5
• 申請日: 2008-08-28
• 公開（公告）號: CN201298042Y
• 公開（公告）日: 2009-08-26
• 發明（設計）人: 張改平;肖治軍;鄧瑞廣;李學伍;楊艷艷;楊繼飛;趙東;王愛萍;邢廣旭;柴書軍;劉慶堂
• 申請（專利權）人: 河南省農業科學院
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/545;G01N33/544
• 代理公司: 鄭州大通專利商標代理有限公司
• 代理人: 陳大通

一、技術領域：

本實用新型涉及一種檢測豬繁殖障礙性病毒傳染病抗體的器具，特別是涉及一種一步檢測豬細小病毒、豬乙型腦炎病毒抗體的試紙條。

二、技術背景：

我國是生豬的生產和消費大國。隨著大中小型規模化養豬場、種豬場數量的逐年增加，豬繁殖障礙性疾病已成為我國規模化豬場最重要的疾病之一，發病率平均達30％以上，造成巨大的經濟損失，并嚴重制約著養豬業的發展。豬繁殖與呼吸綜合癥病毒(PRRSV)、豬細小病毒(PPV)、豬乙型腦炎病毒(JEV)、豬瘟病毒和偽狂犬病毒等是造成豬繁殖障礙的重要病毒。PRRSV引起豬繁殖與呼吸綜合癥(PRRS)，表現為感染母豬發熱、厭食，懷孕后期發生流產、死胎、木乃伊胎和弱仔等，感染仔豬發生呼吸困難(肺炎)、免疫機能障礙和高死亡率；因部分病豬的耳朵發紫，又稱藍耳病。藍耳病近年來在我國廣為傳播，如2006年我國南北10多個省(市、區)的豬群發生的“高熱病”現認為是高致病性PRRSV毒株引起的，發病豬群達200萬頭，死亡40萬頭。PPV(代號P)引起豬細小病毒病，主要表現為受感染的母豬，特別是初產母豬及血清學陰性經產母豬發生流產、死胎、畸形胎、木乃伊胎和弱仔以及屢配不孕，而其他年齡的豬感染后不表現明顯的臨床癥狀。目前豬細小病毒病在我國豬群中廣為傳播，在大多數感染豬場呈地方性流行并且很難凈化，從而造成了持續的經濟損失，嚴重阻礙了養豬業的健康發展。JEV(代號J)引起人畜共患病—流行性乙型腦炎。豬乙型腦炎主要表現為感染豬發熱、厭食，母豬懷孕后期突然發生流產、死胎、木乃伊胎和弱仔等，新生仔豬良莠不齊、死亡率高，感染公豬出現睪丸炎。豬乙型腦炎主要由帶病毒的蚊蟲叮咬而傳播，主要分布在亞洲各國，我國大部分地區均有本病發生。

生產中，PPV、JEV與PRRSV等病毒引起的繁殖障礙性疾病，其臨床癥狀相似，而且經常混合感染，單憑臨床病理變化往往不能及時正確診斷，最后確診有賴于實驗室檢查，如要檢測病豬樣品中病原或其特異抗體的存在、甚至用分離到的病原復制出臨床病例。目前實驗室檢測PPV和JEV抗體的方法有：(1)病毒培養與抗體檢測：取標準病毒接種豬原代或傳代腎細胞等培養，用酶或熒光素標記二抗檢測待檢血清中的特異抗體，或直接檢測待檢血清中的中和抗體；(2)多數情況下用血凝抑制試驗(HI)檢測PPV或JEV感染豬血清中的特異抗體，也有人用間接酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測感染豬血清中的特異抗體。病毒培養與抗體檢測技術操作復雜、需要儀器和較長的時間，不適合生產或現場的快速診斷需要。ELISA和HI比較簡便、快速，常用來檢測JEV和PPV的抗體，但仍不便于我國基層或現場普遍推廣應用。因為ELISA仍需要酶標儀和試劑，較多的操作步驟和經驗，HI也需要新鮮的豚鼠或鵝紅血球；這些儀器、試劑在基層較為缺乏，或者缺乏操作人員和保存條件。為此，有人研究報道了用斑點免疫金滲濾法來檢測PPV、JEV及其抗體。這種方法利用微孔濾膜的滲濾濃縮和毛細管作用，將抗原—抗體反應由ELISA或HI的傳統液相環境轉到固相濾膜上快速進行，并采用膠體金標記代替酶標記和紅血球標記，憑肉眼直接觀察膠體金的顯色狀況而判斷結果。因此，比HI或ELISA更簡便、快速和實用。但目前報道的斑點免疫金滲濾法一次只能檢測一種豬病抗體，而且至少需添加兩次試劑和洗滌兩次才能獲得結果；其操作仍不夠簡便，仍不便于非專業的基層人員使用。因此，研究一種簡便而快速、一步可以檢測一種或多種豬病病毒抗體的實時在線檢測器具，非常重要而迫切。

三、實用新型內容：

本實用新型的目的是克服現有技術中檢測豬細小病毒和豬乙型腦炎豬病抗體存在的缺陷，提供一種特異性強、敏感性高、簡便、快速檢測豬細小病毒、豬乙型腦炎病毒抗體的免疫金標試紙條。

本實用新型采用的技術方案是：