[實(shí)用新型]圓窗膜離體通透性試驗(yàn)裝置

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200820119940.2
• 申請(qǐng)日: 2008-06-06
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN201373874Y
• 公開(kāi)（公告）日: 2009-12-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫建軍;劉婭
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 孫建軍;劉婭
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/48
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/48;G01N15/08
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

所屬技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型涉及一種圓窗膜的試驗(yàn)裝置，利用該裝置能在離體狀態(tài)下檢測(cè)圓窗膜對(duì)藥物的通透性，從而為研究?jī)?nèi)耳藥物新劑型提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

背景技術(shù)

內(nèi)耳包括耳蝸與前庭，結(jié)構(gòu)精細(xì)，含有聽(tīng)覺(jué)與平衡覺(jué)的感覺(jué)神經(jīng)末梢。內(nèi)耳系統(tǒng)疾病的臨床發(fā)病率約占耳科疾病的1/3，藥物治療為首要的治療方法，例如使用激素(甲基強(qiáng)的松龍、地塞米松)或神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)劑治療突發(fā)性感音神經(jīng)性耳聾，用氨基糖甙類(lèi)抗生素進(jìn)行化學(xué)性迷路切除治療頑固性外周性眩暈，用激素、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)劑等治療耳鳴。在某些內(nèi)耳手術(shù)過(guò)程中或術(shù)后也需要使用激素或神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)劑保護(hù)內(nèi)耳功能，例如鐙骨切除術(shù)、電子耳蝸植入術(shù)。由于血-迷路屏障的存在，通過(guò)口服或靜脈(全身給藥)給入體內(nèi)的藥物到達(dá)內(nèi)耳組織會(huì)受到障礙。為了在內(nèi)耳達(dá)到有效的治療濃度而提高全身給藥劑量將會(huì)增加肝腎的代謝負(fù)擔(dān)以及加大對(duì)其他器官產(chǎn)生毒副作用的可能性。

近年來(lái)，經(jīng)圓窗膜局部給藥治療內(nèi)耳疾病的方法以其直接性及對(duì)身體低毒性的優(yōu)點(diǎn)而成為耳科學(xué)研究的熱點(diǎn)[1-5]。圓窗膜具有生物半透膜性質(zhì)，被引入中耳鼓室的藥物可以經(jīng)圓窗膜直接滲透到內(nèi)耳。這種給藥方法跨越了血-迷路屏障，藥物的使用劑量小，而到達(dá)內(nèi)耳的濃度較高，從而在全身血藥濃度幾乎為零的情況下實(shí)現(xiàn)內(nèi)耳有效的藥物濃度，對(duì)身體其他器官不會(huì)產(chǎn)生毒副作用[6]。

目前共有四種方法將藥物引入圓窗附近，以維持藥物在內(nèi)耳的穩(wěn)定作用濃度與作用時(shí)間：半植入式微管(Mirco?Cath)、微型虹吸管(Micro?Wick)、固態(tài)載藥材料(如明膠)以及經(jīng)鼓膜注射緩釋制劑[7-9]。其中經(jīng)鼓膜注射緩釋劑最具微創(chuàng)性，該技術(shù)以現(xiàn)代藥劑學(xué)的發(fā)展為基礎(chǔ)，研制用以治療內(nèi)耳疾病的緩釋制劑，如脂質(zhì)體、微囊等，具有良好的應(yīng)用前景。

在內(nèi)耳給藥的臨床前期研究中，圓窗膜對(duì)藥物的通透性為首要的觀察指標(biāo)。由于圓窗膜結(jié)構(gòu)精細(xì)，取材困難，因此絕大多數(shù)圓窗膜通透試驗(yàn)為在體的動(dòng)物試驗(yàn)[10-12]。該方法的缺點(diǎn)是代價(jià)較高并且干擾因素較多：在體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)需要通過(guò)外科手術(shù)將藥物給入中耳腔，動(dòng)物的個(gè)體差異以及給藥的操作方式是造成結(jié)果變異性的較大原因；約有半數(shù)的動(dòng)物有假性圓窗膜，直接阻礙藥物與圓窗膜的接觸；另外，為了檢測(cè)外淋巴內(nèi)的藥物濃度，抽取外淋巴液的方法也需要通過(guò)外科手術(shù)，如耳蝸底回外淋巴抽取術(shù)，約有一半的外淋巴在取材過(guò)程中被腦脊液稀釋?zhuān)槐M管目前Dr.Salt和Dr.Plontke提出從蝸尖所取得的外淋巴液中腦脊液的含量大大減少，然而該方法的手術(shù)路徑相對(duì)復(fù)雜；此外，在體動(dòng)物的外淋巴含量極少(豚鼠鼓階外淋巴約為4微升)，對(duì)檢測(cè)技術(shù)也有相當(dāng)高的要求[13，14]。

因此，為了降低圓窗膜通透性試驗(yàn)的成本以及減小復(fù)雜的在體實(shí)驗(yàn)操作所帶來(lái)的結(jié)果變異性，離體圓窗膜藥物通透性試驗(yàn)是值得探討與摸索的方法。目前，常規(guī)應(yīng)用于透膜藥學(xué)試驗(yàn)的裝置有Franz擴(kuò)散池，該裝置由供給室與接受室兩部分組成(圖1)，取自活體動(dòng)物的生物膜組織(如皮膚或角膜)可直接夾于Franz擴(kuò)散池的兩室之間。實(shí)驗(yàn)時(shí)接受室注滿相應(yīng)的體液成份(如生理鹽水或房水)，受試藥物給入供給室；透過(guò)生物膜的藥物進(jìn)入接受室后，可以抽取液體檢測(cè)藥物濃度，得到透膜的時(shí)-藥曲線。

由于動(dòng)物的圓窗膜面積極小(豚鼠圓窗膜平均1-2mm²)且菲薄，離體試驗(yàn)裝置的設(shè)計(jì)難度大于透皮或透角膜試驗(yàn)的Franz擴(kuò)散池。搜索近15年的文獻(xiàn)中，僅有Witte和Kasperbauer(2000)設(shè)計(jì)了離體圓窗試驗(yàn)裝置以研究圓窗膜對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子Alpha的通透性(圖2)[15]。該裝置用環(huán)氧樹(shù)脂連接兩側(cè)塑料試管(分別用作中耳腔與鼓階外淋巴腔)與中間帶孔的塑料板，完整的圓窗膜連同圓窗龕取材于豚鼠，并被粘于培養(yǎng)皿的中心孔處，構(gòu)成藥物通透兩室的膜性屏障；實(shí)驗(yàn)時(shí)兩室分別給予4ml液體。該裝置的不足之處在于：塑料試管與培養(yǎng)皿壁存在吸附藥物分子的可能性；連接材料環(huán)氧樹(shù)脂對(duì)生物活性組織如圓窗膜可能有毒性作用；接受室與供給室給予同體積的液體，不符合生理情況下圓窗膜給藥的體積與內(nèi)耳容積的比例。

參考文獻(xiàn)：

1.Kanzaki?J，Ouchi?T，Tsuchihashi?N.Steroid-responsive?sensorineural?hearing?loss：combination?therapy?with?prednisolone?and?Sairei-to.ORL?J?OtorhinolaryngolRelat?Spec?1993；55：24-29.PMID：8441520