[實用新型]聯合檢測多種腫瘤標志物的化學發光免疫分析試劑盒

有效

• 申請號: 200820079989.X
• 申請日: 2008-04-16
• 公開（公告）號: CN201237593Y
• 公開（公告）日: 2009-05-13
• 發明（設計）人: 唐寶軍;應希堂;宋勝利;胡國茂;鄭金來;張坤
• 申請（專利權）人: 北京科美東雅生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N21/76;G01N33/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本實用新型提供了一種聯合檢測多種腫瘤標志物的化學發光免疫分析試劑盒。

背景技術

腫瘤是一類嚴重威脅人類生命和健康的惡性疾病，2002年世界衛生組織(WHO)公布全世界每年新增1000萬癌癥病例，目前世界上死亡人數中有12％死于癌癥。因此，WHO指出及早診斷和治療是對抗癌癥的有效手段之一，腫瘤的早期診斷是決定其預后的一個重要因素。腫瘤標志物(Tumor?marker，TM)作為一項重要指標，在腫瘤早期診斷當中發揮著越來越重要的作用。TM是由腫瘤組織產生，存在于腫瘤組織本身、或分泌至血液或其他體液、或因腫瘤組織刺激由宿主細胞產生的而含量明顯高于正常參考值的一類物質。TM在腫瘤的治療監測和預后方面具有一定的應用價值。目前發現的腫瘤標志物已經有一百多種，由于大多數情況下體內腫瘤標志物的含量都非常低，一般的檢測方法很難對其進行精確的定量。過去對腫瘤標志物的檢測主要用放射免疫分析法，這種方法存在諸多缺點，如操作復雜、測定結果不穩定、試劑保存時間短、放射性污染、儀器昂貴等。因此，亟待發展一種新的檢測方法對血液中TM進行精確的定量分析。

化學發光免疫分析技術的出現使檢測特異性不斷提高，腫瘤診斷研究不斷向深入發展。過去主要是對單個腫瘤標志物檢測，由于交叉反應與標志物特異性存在一定的差異，因此在實際應用中受到了限制。近年來，人們通過多種TM同時檢測，聯合應用以期達到準確診斷腫瘤的目的。

與傳統檢測方法相比，本實用新型可以同時對一份樣本進行多個指標的檢測；具有極高的靈敏度和可靠性；檢測成本低，利于大規模推廣應用。本實用新型的反應與傳統化學發光法幾乎一模一樣，應用表面特殊處理的標準不透明96孔微孔板作為基質，保證了反應的方便性與快捷性，兼容市場上通用的所有型號洗板機或全/半自動板式化學發光免疫分析系統；解決了其它基于玻片或膜等的生物芯片反應步驟的手工操作過多且操作復雜、可重復性差、均一性差等問題。

發明內容

本實用新型的目的是提供了簡便、快捷、準確的聯合檢測多種腫瘤標志物的化學發光免疫分析試劑盒。

本實用新型是由96孔位的支撐架及放置其上的可拆卸的不透明微孔板條組成，其中，每12孔為一個反應條，每個反應條負載相同的抗體，檢測同一個腫瘤標志物，可以聯合檢測3-8種腫瘤標志物。

本實用新型精心設計的96孔板化學發光免疫分析試劑盒，高度靈敏和特異，操作簡便快速，可在短時間內同時檢測3-8種腫瘤標志物的含量，費用低廉，適用于腫瘤高危人群或腫瘤高發地區體檢時多種腫瘤的輔助性初篩。它具有特異性高、準確性高、靈敏、簡便快速等優點。本實用新型特別適合腫瘤醫院推廣使用，為臨床診斷和科研工作提供一種非常有價值的檢測手段。

本實用新型的試劑盒應用的是酶催化發光底物，通過檢測發光底物產生的光信號代替酶聯免疫分析中的顯色底物，因而具有與酶聯免疫分析同等的特異性，而靈敏度大大提高，比現今的酶聯免疫吸附分析靈敏度提高約10倍，并且多種腫瘤聯合檢測，提高了腫瘤診斷的特異性和準確性，可為腫瘤疾病的診斷提供更為特異、快速、可靠的依據。

附圖說明

圖1本實用新型實施例1、2的結構示意圖。

圖2本實用新型實施例3-8的結構示意圖。

圖3本實用新型實施例9、10的結構示意圖。

具體實施方式

實施例1?制備聯合檢測前列腺癌的化學發光免疫分析試劑盒

一、酶標記物制備

用改良的過碘酸鈉氧化法標記前列腺特異性抗原(PSA)、復合前列腺特異性抗原(cPSA)、游離前列腺特異性抗原(fPSA)三種單克隆抗體。

酶標記物稀釋液配制稱量12.12g的Tris，5g?BSA和1mL?Proclin?300，將上述試劑稱量好放入潔凈容器中，加雙蒸水至1L，溶解混勻。

分別采用棋盤實驗選擇三種酶標記物的工作濃度。每個產品分裝一瓶，共分裝三瓶。

二、腫瘤標志物復合校準品的制備

用前列腺特異性抗原(PSA)、細胞角蛋白19(Cyfra21-1)、甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、神經元特異性烯醇化酶(NSE)、腫瘤相關抗原19-9(CA19-9)、腫瘤相關抗原153(CA15-3)、腫瘤相關抗原72-4(CA72-4)、腫瘤相關抗原125(CA125)、腫瘤相關抗原50(CA50)、胃泌素釋放肽前體(ProGRP)、鐵蛋白(Fer)、組織多肽特異性抗原(TPS)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)純品配制成腫瘤標志物復合校準品，分裝低、高兩個濃度，2mL/瓶。