[實用新型]一種男性多腫瘤標志物檢測蛋白芯片及其試劑盒

有效

• 申請號: 200820059666.4
• 申請日: 2008-06-13
• 公開（公告）號: CN201247246Y
• 公開（公告）日: 2009-05-27
• 發明（設計）人: 穆海東;汪寧梅;張璐;顧蓉
• 申請（專利權）人: 上海裕隆生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/574;G01N33/543;G01N33/577;G01N21/76
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• 代理人: 暫無信息

技術領域

本實用新型涉及蛋白芯片疾病檢測產品，具體地說，涉及一種男性多腫瘤標志物檢測蛋白芯片及其試劑盒。

背景技術

惡性腫瘤的早期診斷可以提高患者的預后和生存率，男性惡性腫瘤(包括原發性肝癌、前列腺癌、胰腺癌、肺癌、食管癌、胃癌、結腸直腸癌)的臨床診斷方法一般包括影像學檢查(如B超、X線鋇餐、X線、CT、MRI)、血清腫瘤標志物檢測(如tPSA、AFP、CA19-9等)、直腸指診、內鏡檢查(食管內鏡、纖維胃鏡、可折式乙狀結腸鏡、全結腸鏡)和活組織病理檢查。盡管影像學檢查和內鏡檢查可以早期發現惡性腫瘤，但由于價格昂貴或具有入侵性，不能應用于一般人群的體檢篩查。然而，多數惡性腫瘤早期鮮有臨床癥狀，當出現癥狀去醫院就診時，已發展為惡性腫瘤中晚期，病人的預后和生存率較低。

越來越多的研究顯示：血清腫瘤標志物檢測有助于惡性腫瘤的早期發現、提示預后或監測病程，而且血清腫瘤標志物聯合檢測可以提高惡性腫瘤檢測的敏感性和特異性。目前用于血清標志物檢測的方法可分為三大類：單指標單人份(如免疫膠體金、自動化免疫分析儀)、單指標多人份(ELISA)和多指標多人份(蛋白芯片)。與單指標檢測方法相比，蛋白芯片檢測有樣本用量少、所需時間短、價廉等優點，更適于多腫瘤標志物的聯合檢測。

男性，尤其是中年男性是社會的主要勞動力，同時也是最忙碌的群體，往往對身體過于自信，忽視檢查。需要一種簡便，適應快節奏生活的檢查方法用于男性的體檢。目前市場上尚沒有專門針對男性腫瘤進行檢測的多指標蛋白檢測產品。另外腫瘤檢測指標經報道已經不少，但指標選擇不當會產生假陽性或假陰性偏高的問題，從而使臨床檢測失去意義。所以我們需要一種指標選擇合適，專門針對男性作腫瘤檢測的多指標蛋白檢測產品。

發明內容

本實用新型要提供一種專門用于男性腫瘤檢測，并且指標選擇恰當的多腫瘤蛋白標志物檢測芯片，以及包含該芯片的試劑盒。本發明涉及的檢測指標恰當，應用反應條件一致，避免了交叉反應和酶反應底物的潛在危害和污染，大大提高了檢測的效率，降低了假陽性率。本發明可以適用于男性無癥狀人群和高危人群的惡性腫瘤普查。可同時篩查腫瘤包括：原發性肝癌、前列腺癌、胰腺癌、肺癌、食管癌、胃癌和結腸直腸癌。輔助診斷原發性肝癌、前列腺癌和胰腺癌。指標與檢測項目對應關系見下表。

本實用新型目的是這樣實現的，發明人根據已報道的腫瘤標志物的臨床應用情況以及中國男性腫瘤的流行病學特點，選取AFP、CEA、NSE、CYFRA21-1、CA19-9、tPSA和SCC-ag七個腫瘤標志物，與陽性指標，陰性指標構成陣列式點樣涂層，同時點陣于一張基片上，每個陣列可有多次重復。

本實用新型涉及的用于男性多腫瘤標志物檢測蛋白芯片，由基片和陣列式分布于基片上的蛋白檢測指標以及對照檢測指標涂層組成，所述的蛋白檢測指標包括AFP、CEA、NSE、CYFRA21-1、CA19-9、tPSA和SCC-ag共7個腫瘤標志物，以共價鍵盤或非共價鍵固定在基片上面。所述的基片可以是玻璃片基，硝酸纖維素膜或尼龍膜。

上述基片的一個優選例是醛基化玻片。

上述的對照檢測指標涂層包括陽性對照和陰性對照；陽性對照為兔IgG抗體，陰性對照為抗體點樣所用的稀釋液。

上述涂層上的每個陣列中蛋白檢測指標每個有2-10個重復，對照指標有1-5個重復。陣列的多少和大小與待檢樣品的數目，基片大小，以及點樣直徑有關。

上述蛋白檢測指標與檢測陣列的優選例是：當蛋白檢測指標點樣直徑為0.1mm時，點間距0.6mm，陣列大小為6mm×5mm，可在硝酸纖維素膜蛋白芯片上設置24個陣列。

本發明還提供了包含上述男性多腫瘤標志物檢測蛋白芯片的試劑盒，還包括標準品和質控品；標準品與質控品為瓶裝，用紙質模板固定于包裝盒內。

上述的試劑盒，還包括樣本稀釋液，酶標工作液，濃縮洗滌液，檢測液；各液體為瓶裝，與標準品和質控品一起用紙質模板固定于包裝盒內。各部分由紙質模具固定于一包裝盒內，不限放置方式，檢測時配套使用。

上述的標準品由5-10個不同濃度梯度的蛋白混合液組成，每個蛋白混合液裝入一個容器，蛋白混合液由7個多腫瘤標志物蛋白檢測指標按不同濃度混合而成。標準品用于在每次標本檢測結束后做標準曲線，可以定量測定樣品中的檢測指標的蛋白濃度。

上述的質控品由3-6個不同濃度的蛋白混合液組成，每個蛋白混合液裝入一個容器，蛋白混合液由7個多腫瘤標志物蛋白檢測指標按不同濃度混合而成。質控品可以監測整個檢測系統的CV值，保證每次檢測結果的有效性。