[發(fā)明專利]細(xì)胞培養(yǎng)繁殖樹莓的方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810246902.8
• 申請(qǐng)日: 2008-12-30
• 公開（公告）號(hào): CN101766120A
• 公開（公告）日: 2010-07-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馮連春;韓德昌;孫維厚;楊家鶴;高興安
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 沈陽(yáng)科奧可再生能源研究所
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 沈陽(yáng)亞泰專利商標(biāo)代理有限公司 21107
• 代理人: 韓輝

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種灌木類經(jīng)濟(jì)植物的組織培養(yǎng)，特別是涉及一種細(xì)胞培養(yǎng)繁殖樹莓的方法，屬于生物工程和灌木類經(jīng)濟(jì)植物的快速繁育技術(shù)。

背景技術(shù)

樹莓是一種薔薇科懸鉤子屬多年生落葉小灌木，果實(shí)富含氨基丁酸、維生素、水楊酸、抗氧化物歧化酶鞣酸等防病抗癌藥素，具有降血脂、解熱鎮(zhèn)痛、養(yǎng)筋活血等功效，具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。目前，我國(guó)已有樹莓栽培面積約3000hm²，據(jù)預(yù)測(cè)，我國(guó)樹莓的發(fā)展空間約為50000hm²。由于現(xiàn)有繁育苗木方式落后，苗木供不應(yīng)求已經(jīng)成為目前發(fā)展樹莓生產(chǎn)的主要限制因素。我國(guó)生態(tài)環(huán)境問題日益突出，荒漠化面積很大(如科爾沁沙地等)。樹莓對(duì)干旱和貧瘠的耐受性強(qiáng)，適應(yīng)性廣。在科爾沁沙地大力發(fā)展樹莓不但對(duì)我國(guó)生態(tài)保護(hù)和恢復(fù)具有著重要意義，還能擴(kuò)大當(dāng)?shù)氐木蜆I(yè)，促進(jìn)人們?cè)鍪罩赂?。擴(kuò)繁推廣樹莓既具有較高的經(jīng)濟(jì)效益，又有重大的社會(huì)和生態(tài)效益。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的就在于克服現(xiàn)有技術(shù)存在的上述不足，給出一種細(xì)胞培養(yǎng)繁殖樹莓的方法，這種細(xì)胞培養(yǎng)繁殖樹莓的方法針對(duì)樹莓繁育苗木方式落后、苗木供不應(yīng)求這一現(xiàn)實(shí)狀況，采用組培技術(shù)建設(shè)大規(guī)模樹莓苗木基地快速繁育樹莓，加快我國(guó)的荒漠化治理與生態(tài)恢復(fù)，促進(jìn)地區(qū)經(jīng)濟(jì)建設(shè)發(fā)展。

本發(fā)明給出的技術(shù)解決方案是：這種細(xì)胞培養(yǎng)繁殖樹莓的方法，其特點(diǎn)是

選用樹莓幼嫩莖段、莖尖作外植體(以春季為佳)，剪去葉片沖洗，然后在無菌室用酒精消毒，再用氯化汞溶液浸泡，用無菌水沖洗，剪成帶腋芽莖段，接種到滅過菌的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，然后在26±1℃，光照強(qiáng)度1900lx，光照時(shí)間12h/d條件下培養(yǎng)，8～12天后即可長(zhǎng)出側(cè)芽，當(dāng)側(cè)芽長(zhǎng)至2～3cm時(shí)，可進(jìn)行繼代培養(yǎng)。

將側(cè)芽切成小塊，接種在試管中的培養(yǎng)基上，在溫度26±1℃下培養(yǎng)，光照強(qiáng)度2000lx，光照時(shí)間12h/d。22～28天后長(zhǎng)出4～7片嫩葉；

將經(jīng)過幾次繼代培養(yǎng)之后的芽苗從試管中取出，接種在培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)(繼代次數(shù)越多越易生根)，生根培養(yǎng)溫度為26±1℃，暗培養(yǎng)+光照培養(yǎng)，光照時(shí)間14h/d，光照強(qiáng)度1800lx，15～20天后，芽體基部就長(zhǎng)出4～6條不定根，敞開培養(yǎng)瓶，在培養(yǎng)室內(nèi)鍛煉4～6天后，即可移栽到苗床上；

在網(wǎng)室(或大棚)中準(zhǔn)備鋪好基質(zhì)的苗床。將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，放在溫水(18～22℃)中，將附著在根上的培養(yǎng)基清洗掉(不得傷苗)，再用溫水清洗，將培養(yǎng)基徹底洗掉，最后將試管苗蘸IBA溶液后移栽入苗床；

移栽初期，適當(dāng)遮蔭保濕(濕度在85～95％)；在苗床上培養(yǎng)22～28天后即可轉(zhuǎn)入營(yíng)養(yǎng)缽內(nèi)，28～32天后，即可移入大田。

注：在移栽入苗床前的所有接種操作均在超凈工作臺(tái)上完成。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：樹莓生長(zhǎng)期短，經(jīng)濟(jì)效益高；易于管理，病害較少；栽培當(dāng)年即可坐果，第二年即有經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量，3～4年就進(jìn)入盛果期，經(jīng)濟(jì)壽命可達(dá)15～25年，畝產(chǎn)可達(dá)1000kg，最低市價(jià)5元/kg，即直接經(jīng)濟(jì)效益5000元/畝/年。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的具體技術(shù)方案做進(jìn)一步說明：

選用樹莓幼嫩莖段、莖尖作外植體(以春季為佳)，剪去葉片，放入洗衣粉水(濃度約5％)浸泡5min后，在自來水下沖洗30～60min(水流不宜過大)，然后在無菌室先用70～75％酒精消毒10s，再用0.1％的氯化汞溶液浸泡7～10min，用無菌水沖洗4～5次，剪成0.5～1.5cm的帶腋芽莖段，接種到滅過菌的誘導(dǎo)培養(yǎng)基(MS_改良+6-BA?2mg/L+NAA?0.45mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂7g/L)上，然后在26±1℃，光照強(qiáng)度1900lx，光照時(shí)間12h/d條件下培養(yǎng)。約10天后即可長(zhǎng)出側(cè)芽，當(dāng)側(cè)芽長(zhǎng)至2～3cm時(shí)，可進(jìn)行繼代培養(yǎng)。

將側(cè)芽切成約1mm的小塊，接種在試管中的培養(yǎng)基(2MS_改良+6-BA?2mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖40g/L+瓊脂7g/L)上，在溫度26±1℃下培養(yǎng)，光照強(qiáng)度2000lx，光照時(shí)間12h/d。約25天后，可長(zhǎng)出4～7片嫩葉。