[發(fā)明專利]一種膽甾醇衍生物及其制備方法與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810238404.9
• 申請(qǐng)日: 2008-12-07
• 公開（公告）號(hào): CN101434634A
• 公開（公告）日: 2009-05-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王長云;邵長倫;牟海津;劉海燕;管華詩
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國海洋大學(xué)
• 主分類號(hào): C07J9/00
• 分類號(hào): C07J9/00;A01N45/00;A01P7/00
• 代理公司: 青島海昊知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)所有限公司
• 代理人: 崔清晨

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種膽甾醇衍生物，特別是涉及一種具有殺蟲作用的19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物及其制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)

自20世紀(jì)60年代以來，已經(jīng)從柳珊瑚中分離獲得了許多結(jié)構(gòu)新穎的活性化合物，主要包括二萜類、甾體類、生物堿類等，其生物活性包括抗腫瘤、抗菌、抗病毒、酶抑制作用等。對(duì)柳珊瑚的化學(xué)成分研究已經(jīng)成為海洋天然產(chǎn)物研究的一個(gè)熱門領(lǐng)域。

到目前為止，國內(nèi)外未見對(duì)蕾二歧燈芯柳珊瑚Dichotella?gemmacea(valenciennes)的化學(xué)成分的相關(guān)報(bào)道。更未見從蕾二歧燈芯柳珊瑚中分離得到19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物，也未見從其它生物中分離得到這種衍生物。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種來源于蕾二歧燈芯柳珊瑚的19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物及其制備方法與作為殺蟲劑在生物農(nóng)藥中的應(yīng)用，它能滿足現(xiàn)有技術(shù)的上述需求。

一種19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物，其特征在于它的結(jié)構(gòu)式為

式中R₁為烴基，R₂為酰基。

上述19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物的制備方法，其特征在于先將蕾二歧燈芯柳珊瑚用醇提取，將所得提取液減壓濃縮得到浸膏，將該浸膏懸浮于水中，用有機(jī)溶劑萃取；將所得萃取液減壓濃縮后運(yùn)用硅膠柱層析色譜、凝膠色譜和制備高效液相色譜分離純化，得到19位甲基氧化為羧基的膽甾醇類化合物。

上述的19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物在制備生物農(nóng)藥殺蟲劑中的應(yīng)用。

本發(fā)明從我國南海蕾二歧燈芯柳珊瑚中獲得19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物，該衍生物具有殺蟲活性，可用于開發(fā)生物農(nóng)藥殺蟲劑，應(yīng)用前景廣闊。

具體實(shí)施方式

制備本發(fā)明的化合物時(shí)，采取下述各步驟：

(1)生物樣品的提取：取新鮮的生物樣品蕾二歧燈芯柳珊瑚2850g，用自來水清洗，除去泥沙，將該樣品粉碎后先用3L?95％(質(zhì)量百分?jǐn)?shù)，下同)乙醇浸提3次，每次1d。合并3次提取液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用2L甲醇脫鹽3次，減壓濃縮得總浸膏。總浸膏用500mL水稀釋后，用等體積石油醚、乙酸乙酯和正丁醇分別萃取6次，減壓濃縮萃取液得到石油醚、乙酸乙酯和正丁醇浸膏，各浸膏密封保存于4℃冰箱中備用。

所述的乙醇可改為甲醇、異丙醇或正丁醇。

(2)分離：提取物各相萃取浸膏，首先經(jīng)過減壓硅膠柱層析(VLC)將各相浸膏按照其極性大小分成極性相近的幾個(gè)部分，然后經(jīng)過硅膠柱層析色譜、凝膠色譜和制備高效液相色譜分離和純化，得到本發(fā)明的化合物。所得化合物的波譜數(shù)據(jù)列于表1。

表1化合物1的核磁共振波譜數(shù)據(jù)

本實(shí)施例制得的19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物的結(jié)構(gòu)式為：

式中R₁為甲基，R₂為乙酰基。

本發(fā)明的化合物對(duì)鹵蟲致死活性實(shí)驗(yàn)：

取鹵蟲卵15mg置于500mL三角瓶中，加入處理過的海水300mL，用充氣泵緩緩充氣，25℃水浴中孵化48h，除去卵殼及未孵化的卵，獲得鹵蟲幼體，備用。

鹵蟲致死活性實(shí)驗(yàn)依照Solis的改良法，取24孔培養(yǎng)板，每孔加1mL含鹵蟲幼體的溶液(每孔20個(gè)鹵蟲)，制成測試培養(yǎng)板。將粗提物、各有機(jī)相浸膏及各單體化合物，用DMS0/水配置成2mg/mL的溶液，加入培養(yǎng)板孔中，每個(gè)粗提物及各相浸膏樣品設(shè)置100μg/mL，50μg/mL，10μg/mL三個(gè)終濃度，各化合物設(shè)置50μg/mL，25μg/mL，10μg/mL三個(gè)終濃度。每個(gè)濃度的樣品又各設(shè)三個(gè)平行樣。培養(yǎng)24h后，記錄鹵蟲死亡個(gè)數(shù)。鹵蟲致死活性采用校正死亡率表示：校正死亡率％＝[(對(duì)照組存活率-樣品組存活率)/對(duì)照組存活率]×100％

本發(fā)明的19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物在50μg/mL對(duì)鹵蟲的致死率為94.4％，在濃度為25μg/mL下的致死率為57.9％，表現(xiàn)出強(qiáng)烈的鹵蟲致死活性。

實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的19位甲基氧化為羧基的膽甾醇衍生物對(duì)鹵蟲表現(xiàn)出強(qiáng)的致死活性，因此可將其作為生物農(nóng)藥殺蟲劑。