[發明專利]馬錢子堿復合磷脂脂質體及其制備方法和在制藥中的應用

無效

• 申請號: 200810236293.8
• 申請日: 2008-11-28
• 公開（公告）號: CN101406455A
• 公開（公告）日: 2009-04-15
• 發明（設計）人: 蔡寶昌;陳軍;胡敏敏;王瑋;張婷;高穎;陳志鵬
• 申請（專利權）人: 南京中醫藥大學
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K31/475;A61K47/24;A61P35/00
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司
• 代理人: 樓高潮

一、技術領域

本發明涉及中藥技術領域，特別是涉及一種馬錢子堿復合磷脂脂質體及其制備方法和在制備治療抗腫瘤藥物中的應用。

二、背景技術

馬錢子，又名番木鱉，始載于《本草綱目·卷十八》，是馬錢科植物馬錢(Strychnosnux_vomica?L.)的干燥成熟種子，性溫、味苦、有大毒，歸肝、脾經，具有散結消腫、通絡止痛的功效。馬錢子主要有效成分是生物堿類成分，以士的寧(strychnine，C₂₁H₂₂O₂N₂)和馬錢子堿(brucine，C₂₃H₂₆O₄N₂)為主。

藥理研究表明，馬錢子堿可能是馬錢子生物堿中最有開發前景的有效成分：①抗腫瘤試驗表明，馬錢子堿的活性顯著高于士的寧、馬錢子堿氮氧化物、異士的寧等其他馬錢子中的生物堿成分；②抗關節炎試驗也表明，士的寧沒有治療作用但馬錢子堿卻有確切的療效；③馬錢子堿具有理想的鎮痛抗炎作用；④馬錢子堿的毒性遠低于士的寧，口服中毒劑量為士的寧的71倍，注射為45倍。

由于馬錢子堿活性和毒性都很突出，采用脂質體包封可以達到減毒增效的目的，因此其制備方法與技術就成為了研究熱點。例如CN1698612A公開了一種納米馬錢子堿脂質體的制備方法，采用薄膜法制備了馬錢子堿脂質體；又如CN1718190A公開了利用硫酸銨梯度法制備馬錢子生物堿脂質體的方法。以上兩種脂質體的共同特點是采用單一的磷脂組分(如卵磷脂)作為脂質體的膜材。包封率是目前中國藥典規定的脂質體質量控制的主要指標之一，作為上市的脂質體產品，其包封率不得低于80％，由于包封率的限制，脂質體能夠載入的馬錢子堿藥物濃度往往很低，如從目前的文獻報道來看，基本在1mg/ml以下。例如張路等報道(中成藥，2005，27(6)：632)制備1mg/ml馬錢子堿脂質體，磷脂由單一氫化大豆磷脂組成，藥脂重量比為1：10，馬錢子堿包封率僅為61.24％。

三、發明內容

1.發明目的：

本發明需要解決的技術問題是提供一種臨床適用的馬錢子堿復合磷脂脂質體及其制備方法和應用，該新型脂質體與現有的馬錢子堿單一磷脂脂質體相比，載藥量和穩定性均有顯著提高，能夠滿足臨床應用的需要。

2.技術方案：

為達到上述目的，本發明提供了如下技術方案：

一種馬錢子堿復合磷脂脂質體制劑，其特征在于它是由兩類磷脂成分、馬錢子堿和膽固醇按下列重量份配比所制成：

馬錢子堿：1份、第一類磷脂：0.2～12份、第二類磷脂：1～24份、膽固醇：0.5～5份。

所述第一類磷脂是指氫化大豆磷脂、氫化蛋磷脂、二硬脂酰磷脂酰膽堿或二棕櫚酰磷脂酰膽堿中的一種或幾種，共同的特點是相變溫度在35～65℃范圍內。上述第二類磷脂是指大豆磷脂、蛋磷脂或二月桂酰磷脂酰膽堿中的一種或幾種，共同的特點是相變溫度在-20～25℃范圍內。

所述第一類磷脂和第二類磷脂的重量比例為2:1～1:36。

所述復合磷脂脂質體制劑，加入不同劑型的相應輔料能制成注射劑、口服液、外用凝膠劑、軟膏、噴霧劑或滴鼻劑。

一種馬錢子堿復合磷脂脂質體制劑的制備方法，其特征在于制備步驟如下：

(1)按重量比稱取第一類磷脂0.2～12份、第二類磷脂1～24份和膽固醇0.5～5份，溶解于無水乙醇中，注入硫酸銨水溶液；

(2)加熱或通過減壓方法除去乙醇；

(3)超聲處理或高壓乳勻，減少脂質體的粒徑；

(4)通過透析法、超濾法或凝膠柱層析法除去未被脂質體包封的硫酸銨，形成空白脂質體混懸液；

(5)按重量比加入馬錢子堿1份于上述空白脂質體中溫孵，使馬錢子堿被脂質體包封。

上述步驟(1)中所述的溶于無水乙醇中，以5ml/min的速度注入10～20倍體積的0.1～0.3ml/L的硫酸銨水溶液。

上述步驟(5)中所述的溫孵溫度為0～60℃，溫孵時間5～60min。

所述步驟(4)中所述的空白脂質體的制備可以采用薄膜分散法、逆向蒸發法、乙醇注入法、乙醚注入法、冷凍干燥法、前體脂質體法等，本發明采用優選的方法是乙醇注入法。

所述的馬錢子堿復合磷脂脂質體，載藥采用主動載藥技術(pH值梯度法和硫酸銨梯度法等)，本發明優選的方法是硫酸銨梯度法。