[發(fā)明專利]一株高產(chǎn)四甲基吡嗪的枯草芽孢桿菌及其發(fā)酵生產(chǎn)四甲基吡嗪的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810235366.1
• 申請日: 2008-12-08
• 公開（公告）號: CN101445786A
• 公開（公告）日: 2009-06-03
• 發(fā)明（設計）人: 徐巖;朱兵峰;范文來
• 申請（專利權(quán)）人: 江南大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P17/12;C12R1/125
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所
• 代理人: 時旭丹;劉品超

1.一株產(chǎn)四甲基吡嗪的菌株，其命名為枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)XZ1124，已保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，其保藏編號為CCTCC?NO：M208157。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的菌株，其特征是該枯草芽孢桿菌的細菌學特征是：菌落形態(tài)初期為灰色、突起、圓形、表面光滑有光澤，培養(yǎng)后期菌落邊緣呈不規(guī)則狀，表面扁平、灰白色、無光澤；顯微鏡鏡檢為短桿狀，長1.6-3.0μm，直徑0.6-0.7μm，產(chǎn)芽孢；生理生化特征為革蘭氏陽性、好氧、化能異養(yǎng)菌，從葡萄糖、果糖、甘露糖、麥芽糖或蔗糖產(chǎn)酸，接觸酶陽性，硝酸鹽還原陽性，V-P反應陽性，可水解酪蛋白、明膠和淀粉，不利用檸檬酸鹽、丙酸鹽；其16S?rRNA基因序列與多株枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)16S?rRNA的基因序列具有＞99％同源性。

3.在用枯草芽孢桿菌發(fā)酵生產(chǎn)四甲基吡嗪的方法中提高四甲基吡嗪產(chǎn)量的方法，其特征是枯草芽孢桿菌CCTCC?NO：M?208157在裝有50mL葡萄糖培養(yǎng)基或蔗糖培養(yǎng)基的250mL搖瓶中，于37℃條件下，在搖床上以200rpm的轉(zhuǎn)速發(fā)酵培養(yǎng)120h，在大量積累前驅(qū)物質(zhì)3-羥基-2-丁酮的情況下，得到濃度為3.25或3.68克每升的四甲基吡嗪；

所述葡萄糖培養(yǎng)基以蒸餾水定容至1L：葡萄糖100-150g/L，蛋白胨30g/L，酵母膏10g/L，磷酸氫二銨30g/L，pH7.0-7.5；

所述蔗糖培養(yǎng)基以蒸餾水定容至1L：蔗糖100-150g/L，蛋白胨30g/L，酵母膏10g/L，磷酸氫二銨30g/L，pH7.0-7.5。

4.在用枯草芽孢桿菌發(fā)酵生產(chǎn)四甲基吡嗪的方法中提高四甲基吡嗪產(chǎn)量的方法，其特征是枯草芽孢桿菌CCTCC?M?208157在裝有50mL蔗糖豆餅粉培養(yǎng)基的250mL搖瓶中，于37℃條件下，在搖床上以200rpm的轉(zhuǎn)速發(fā)酵培養(yǎng)120h，在大量積累前驅(qū)物質(zhì)3-羥基-2-丁酮的情況下，得到濃度為4.08克每升的四甲基吡嗪；

所述蔗糖豆餅粉培養(yǎng)基以蒸餾水定容至1L：蔗糖100-150g/L，豆餅粉40g/L，酵母膏5g/L，磷酸氫二銨30g/L，pH7.0-7.5。