[發明專利]一種三聚氰胺人工抗原的合成方法無效
| 申請號: | 200810234130.6 | 申請日: | 2008-11-03 |
| 公開(公告)號: | CN101402683A | 公開(公告)日: | 2009-04-08 |
| 發明(設計)人: | 胥傳來;孫鳳霞;劉麗強;彭池方;徐麗廣;謝會玲;袁媛;尹麗梅 | 申請(專利權)人: | 江南大學 |
| 主分類號: | C07K14/765 | 分類號: | C07K14/765;G01N33/53 |
| 代理公司: | 無錫市大為專利商標事務所 | 代理人: | 時旭丹;劉品超 |
| 地址: | 214122江蘇省無錫*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 三聚 人工 抗原 合成 方法 | ||
1.一種三聚氰胺人工抗原的合成方法,其特征是以三聚氰胺為半抗原,利用其結構中原有的氨基,通過戊二醛使半抗原和牛血清蛋白發生結合,制備三聚氰胺的人工抗原,即三聚氰胺-牛血清蛋白;合成步驟為:
(1)制備A液:稱取13mg的半抗原于25mL燒杯中,加入含質量濃度50%甲醛的pH7.2的磷酸鹽緩沖液4mL,在室溫磁力攪拌下至充分溶解后,逐滴加入質量濃度25%的戊二醛12mL,在室溫磁力攪拌下反應3h,此液為A液;
(2)制備B液:稱取10mg的牛血清蛋白溶于pH9.6、0.05mmol/L的碳酸鹽緩沖液2mL中,低溫保存,此液為B液;
(3)在室溫磁力攪拌下,將B液緩慢滴加到A液中,并在攪拌條件下繼續反應3h,期間分兩次共加入2mL的磷酸鹽緩沖液,即得到人工抗原混合液;
(4)將人工抗原混合液移入透析袋中,用0.01mol/L、pH7.2的磷酸鹽緩沖液透析3-4天,每天更換2次磷酸鹽緩沖液;最后使用凍干法將透析袋中的液體制成粉末,即得到人工抗原:三聚氰胺-牛血清蛋白;
(5)三聚氰胺人工抗原的鑒定:采用紫外分光光度法測定偶聯比。
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