[發明專利]一種疫苗佐劑

無效

• 申請號: 200810233763.5
• 申請日: 2008-12-26
• 公開（公告）號: CN101444623A
• 公開（公告）日: 2009-06-03
• 發明（設計）人: 胡云章;胡凝珠;王海漩;烏美妮
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院醫學生物學研究所
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39
• 代理公司: 昆明正原專利代理有限責任公司
• 代理人: 徐玲菊

技術領域

本發明涉及一種疫苗佐劑，尤其涉及化學式為Zn(OH)₂，化學式量為99.4046道爾頓的氫氧化鋅化合物，在制備疫苗佐劑方面的應用，屬于免疫學領域。

背景技術

鋅是所有生物體必需的微量元素，尤其是人體的生長發育離不開鋅。體內鋅水平的高低會對神經、生殖和免疫系統產生重要影響。鋅和機體免疫系統之間的關系較為復雜，主要體現在以下四個方面：①每日鋅的攝入與吸收的量取決于食物的組分、個體年齡和健康狀況；②鋅作為300多種具有生物活性的酶的輔助因子，能夠間接影響免疫系統；③鋅對淋巴細胞的產生、成熟和功能都能產生直接影響；④鋅能夠影響免疫促進劑的功能。

利用以上鋅的特性，人們在某些疾病的治療中采用了鋅制劑輔助療法，即在普通治療的同時給予患者一定劑量的鋅制劑，取得了良好的治療效果。目前，已在感染性疾病、自身免疫病等多項臨床實驗中觀察到了鋅的積極作用。

疫苗佐劑是當今疫苗研究開發的熱點，理想疫苗佐劑需要具備安全、有效、靶向和經濟的特點。當前，鋁佐劑是歷史最長的且應用最為廣泛的被批準用于人體的疫苗佐劑，它主要依靠儲存庫效應和免疫刺激效應兩種機制，顯著提高機體的免疫應答。但作為佐劑，它在安全性和靶向性方面還存在缺陷。而其他一些正在研究或已證實有佐劑作用的物質，由于安全性、有效性或經濟方面問題，未能被批準用于人體。

發明內容

為解決現有疫苗佐劑在安全性等方面的缺陷，本發明經過大量實驗和創造性勞動，提供了一種安全、有效、穩定、價廉的新型疫苗佐劑。

氫氧化鋅在等電點、水溶性等方面與氫氧化鋁具有較高的相似性，而且制備工藝簡單、成本低廉。為此，我們將這種含鋅的化合物作為免疫佐劑，應用于疫苗制備，并在動物實驗中檢驗其免疫增強作用，結果顯示氫氧化鋅作為佐劑與疫苗聯合應用能夠有效增強疫苗的體液免疫應答，其免疫增強效果優于鋁佐劑，并且其致敏性和安全性均優于鋁佐劑。

本發明的技術方案是：化合物氫氧化鋅在制備疫苗的佐劑方面的應用。尤其是化合物氫氧化鋅在制備甲肝疫苗的佐劑方面的應用。化合物氫氧化鋅與滅活的甲肝病毒抗原混合后免疫動物，能夠顯著增強抗原特異性的體液免疫應答。

所述化合物氫氧化鋅，其化學式為Zn(OH)₂，化學式量為99.4046道爾頓。

所述化合物氫氧化鋅作為疫苗佐劑應用于人體的推薦劑量為：0.25～5mg。

本發明所述化合物氫氧化鋅和滅活甲肝病毒抗原混合物在動物實驗中的應用劑量為：每只小鼠0.25～1.5mg氫氧化鋅和12.8EU滅活甲肝病毒抗原。

本發明與現有技術相比具有下列優點和效果：①氫氧化鋅安全、無毒。②氫氧化鋅制備工藝簡單、成本低廉。③氫氧化鋅能夠高效刺激機體免疫應答，免疫增強效果優于鋁佐劑。④氫氧化鋅致敏性和安全性優于鋁佐劑。

附圖說明

圖1：28周內，使用不同劑量的氫氧化鋅對小鼠血清IgG水平的影響，與滅活HAV抗原(無佐劑)組相比，P<0.05，與鋁佐劑組相比，P<0.05

圖2：A，HAV?Al組腦病理，箭頭所示位置存在小膠質細胞小結(40×)；B，HAV?Al免疫組的肝臟病理，未見異常(40×)；C，HAV?Al免疫組的腎臟病理，未見異常(100×)；E-F，HAV?Zn3免疫組的腦、肝、腎臟病理均未見異常(40×)

圖3為G-I，HAV?Zn4免疫組的腦、肝、腎臟病理，均未見異常(40×)

圖4為35天內，氫氧化鋅對小鼠血清特異性IgE水平的影響，與OVA(無佐劑)組相比，P≥0.05，與OVA鋁佐劑組相比，P<0.05，與OVA(無佐劑)組相比，P<0.05。

具體實施方式

下面結合實施對本發明做進一步描述，但發明之內容并不局限于此。

實施例1

1.氫氧化鋅的制備和定性定量分析

A、氫氧化鋅佐劑的制備：將濃度為7mol/L的氨水溶液在60℃持續攪拌的條件下逐滴緩慢加入到濃度為0.6mol/L的醋酸鋅溶液中，至pH值達到5.5并維持穩定時，停止加入，然后持續加熱1小時，在容器壁上有白色膏狀物生成，將此白色膏狀物移入離心管中，14000rpm離心1分鐘，吸出上清，所余白色沉淀用適量純水洗滌三次后，用純水混懸收集，得氫氧化鋅懸濁液，將該氫氧化鋅懸濁液121℃下高壓滅菌20分鐘，備用。該化學反應的反應方程式如下：