[發明專利]一種制備小型哺乳動物皮膚碾壓撕脫傷模型的方法

無效

• 申請號: 200810231715.2
• 申請日: 2008-10-13
• 公開（公告）號: CN101385663A
• 公開（公告）日: 2009-03-18
• 發明（設計）人: 潘寶華;夏煒;胡強;劉賓;郭樹忠
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第四軍醫大學
• 主分類號: A61B19/00
• 分類號: A61B19/00;A61K49/00
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司
• 代理人: 朱海臨

技術領域

本發明涉及一種制備小型哺乳動物皮膚碾壓撕脫傷模型的方法，特別涉及一種制備大鼠皮膚碾壓撕脫傷模型的方法。

背景技術

建立小型哺乳動物皮膚碾壓撕脫傷模型是研究皮膚撕脫傷創面修復及用藥的一個極為重要的實驗方法和手段。皮膚撕脫傷是整形外科常見的創傷之一，近年來其發生率有增加的趨勢。皮膚撕脫傷后，撕脫組織在早期往往有血液循環并保持一定的活力，但隨著傷后時間的推移，受傷組織逐漸出現繼發性壞死。以往皮膚撕脫傷的基礎研究較少，主要是缺乏皮膚撕脫傷的動物模型。

實用的皮膚碾壓撕脫傷模型是研究藥物和治療方法的前提。以往曾有豬后肢皮膚碾壓撕脫傷模型，使用仿汽車皮膚撕脫傷模型機，將豬固定在滑動小車上的水泥平臺上，通過控制機械的轉速及壓力造成豬下肢皮膚撕脫傷。但是使用豬后肢皮膚撕脫傷模型形成的撕脫皮瓣壞死面積難于精確控制，而且各種實驗費用也相當高，不便于進行大規模的標本研究。

發明內容

本發明的目的在于提供一種以小型哺乳動物制作皮膚碾壓撕脫傷模型的方法，可獲得壞死面積較為恒定的撕脫皮瓣，具有產生碾壓力控制準確，操作簡便，重復性好的特點。

為達到以上目的，本發明是采取如下技術方案予以實現的：

一種制備小型哺乳動物皮膚碾壓撕脫傷模型的方法，其特征在于，包括下述步驟：

(1)皮瓣制備：取若干8周齡以上大鼠分三組，腹腔注射麻醉后對其背部皮膚脫毛消毒后，行背部皮膚剝離手術，所形成的皮瓣為背部中后1/3處橫向矩形，大小為長寬比＝2，蒂在一側腹中線外側；

(2)碾壓撕脫：將制作好的大鼠背部矩形皮瓣置于皮膚碾壓撕脫傷形成機底板的電子秤臺面上，開動電機，控制碾輪勻速轉動，同時使碾輪以勻速橫向移動，當碾輪輪緣上的橡膠齒接觸皮瓣時即對其產生碾壓撕脫，皮瓣所受碾壓力可通過皮膚碾壓撕脫傷形成機的高度調節裝置實現，使碾輪作用于皮瓣的壓力為1.0-3.5kg，在同一壓力下，每組大鼠皮瓣試樣重復碾壓3次，形成大鼠皮膚碾壓撕脫傷；

(3)碾壓撕脫程度的觀察與分析：7天后用美藍標出皮瓣存活及壞死范圍，以數碼相機拍照，圖片利用計算機全自動圖像分析求出皮瓣成活面積與總面積之比，成活率＝(總面積-壞死面積/皮瓣總面積)×100％；所有數據均采用均數±標準差(x±s)表示，結果用SPSS13.0軟件進行統計學分析；

(4)建立碾壓撕脫傷模型：根據碾壓撕脫程度的觀察與分析篩選出碾壓力適合、形成壞死面積適中的碾壓撕脫傷條件為；碾壓力為2.0-2.5kg，組壞死面積適中，占皮瓣總面積的1/3強。

上述方法中，所述行背部皮膚剝離手術是在深筋膜下剝離形成皮瓣，保留真皮下血管網。所述矩形皮瓣大小為6×3cm。所述碾輪勻速轉動的轉速為50r/min。所述碾輪作用于皮瓣的壓力1.0-3.5kg分為三個子范圍：1.0-1.5kg、2.0-2.5kg、3.0-3.5kg。

本發明的有益效果是：在碾壓力為2.0-2.5kg時，能穩定制作出成活率為0.42±0.036％的撕脫皮瓣。本發明方法具有產生碾壓力控制準確，操作簡便、皮瓣壞死面積恒定，重復性好的優點，是研究創傷修復機制的較好模型。

附圖說明

圖1為本發明所用皮膚碾壓撕脫傷形成機結構圖。圖中：1、電子秤；2、底板：3、滑動座：4、支架；5、絲杠；6、中間齒輪；7、傳動軸；8、碾輪；9、導軌；10、齒條；11、螺母；12、限位開關。

圖2為在大鼠背部選取皮瓣大小的照片。

圖3為在行背部皮膚剝離手術時采用深筋膜下剝離形成皮瓣，保留真皮下血管網的照片。

圖4為7d后2.0-2.5kg組壞死面積適中的碾壓撕脫傷模型照片。

圖5為傷后12h皮瓣白細胞大量浸潤照片100×。

圖6為傷后12h微血管內血栓形成照片400×。

圖7為傷后3天后血管內大量血栓形成照片，可見殘存的白細胞100×。

圖8為傷后7天皮瓣呈均勻凝固性壞死照片，皮瓣內很少見到白細胞100×。

具體實施方式

以下結合附圖及對實施例本發明作進一步的詳細描述。

實驗材料

選用8周齡的Sprague-Dawley大鼠(第四軍醫大學實驗動物中心提供)18只分三組，每組6只，雌雄不限，體重280-320g，普通喂養。OLYMPUS?CX31顯微鏡及攝像系統(日本)，LEICA-2135型旋轉切片機(德國)，石蠟包埋切片機(上海)。

實驗設備