[發明專利]幽門螺桿菌硝酸銀檢測試劑盒

無效

• 申請號: 200810224972.3
• 申請日: 2008-10-28
• 公開（公告）號: CN101726581A
• 公開（公告）日: 2010-06-09
• 發明（設計）人: 張丹
• 申請（專利權）人: 張丹
• 主分類號: G01N33/483
• 分類號: G01N33/483;G01N21/78
• 代理公司: 北京北新智誠知識產權代理有限公司 11100
• 代理人: 郭佩蘭

技術領域

本發明涉及一種用于檢測生物組織、粘液中幽門螺桿菌的試劑盒，特別是一種幽門螺桿菌硝酸銀檢測試劑盒

背景技術

幽門螺桿菌(HP)與慢性胃炎和消化性潰瘍的發生有密切關系，它的檢測對胃病患者的診斷和治療有一定的輔助作用。目前，采用最多的檢測HP的銀染方法是Warthin-Starry法，文獻記載幽門螺旋菌組織學技術顯示各種方法中，銀染法比較復雜，方法穩定性較差，組織切片染色不易控制，但切片圖像保存性穩定，細菌顯示最清晰。即該方法不足的地方是：銀染時間甚長，顯影甚快，要掌握這一步驟染出HP顯示較好的切片是不容易的，要選顯影最好的切片應用，造成上述缺陷的原因是：對苯二酚液很容易與氧結合而被氧化為對苯二醌，而作為分散劑和穩定劑的明膠液為單獨現用現配，稍有不慎將影響效果，因而該方法不能用于大批量染片，為適應目前的需要，有必要提供一種新型的幽門螺桿菌硝酸銀檢測試劑盒。

發明內容

本發明的目的是提供一種幽門螺桿菌硝酸銀檢測試劑盒，采用本發明，可使幽門螺桿菌的檢測具有方法穩定性、可重復性和易推廣性，且被檢測的生物組織或粘液中幽門螺桿菌存在形態清晰，易于被檢測。

為達到上述目的，本發明采用以下技術方案：

這種幽門螺桿菌硝酸銀檢測試劑盒，它包括：硝酸銀粉末，對苯二酚明膠粉末，去離子水。

所述的硝酸銀粉末與對苯二酚明膠粉末之重量比為1∶10～20；所述的對苯二酚明膠粉末中，對苯二酚粉末與明膠粉末的重量比為1∶50～200，明膠的用量太顯影緩慢。

所述的對苯二酚明膠粉末為經過預處理的粉末，其處理的方法是：將對苯二酚粉末及明膠粉末分別干燥；混勻；粉碎；過篩。干燥的溫度范圍為40-60℃.粉末的粒度為≤50目，但粒度大于0。

生物組織準備：生物組織經石蠟包埋切片置于玻璃載物片上烤干貼附牢固備用，或刮取粘膜表面粘液和組織碎屑置于玻璃載物片上冷風干燥，95％乙醇15分鐘固定備用。

本發明的原理是：利用生物組織成分對銀離子的還原性質的不同，借助含銀離子顯影液中對苯二酚的還原顯影輔助作用，使不同組織部位銀離子密度不同，從而顯示從淺黃色到黑色不同的色彩。也顯示出不同組織部位中相同微生物的相同的形態，其中HP呈深棕色至黑色。

本試劑盒的使用方法：

加定量的試劑溶媒于分別盛有硝酸銀粉末、對苯二酚明膠粉末的容器中，充分溶解備用；取部分硝酸銀液加入擺放有生物組織切片、粘液涂片的清潔染色缸中，置溫箱數十分鐘；去離子水涮洗，備用；將剩余硝酸銀液倒入對苯二酚明膠液，快速充分混合，將混合液加入擺放有生物組織切片、粘液涂片的清潔染色缸中，觀察；在生物組織切片、粘液涂片呈咖啡色時，傾去顯影液，自來水涮洗；脫水透明封固。

結果：組織、粘液中幽門螺桿菌呈深棕至黑色，組織圖像清晰，結構分明。

本試劑保存方法：干粉狀態，干燥避光處長期保存法。

由于本試劑盒的特點是采用預混合、粉末狀，其優點是：

1、這種制劑方便生產及運輸儲存，且使用方法簡便。

2、提高了溶液中銀離子的有效利用率，可控制組織色彩對比度，有利于觀察，其穩定性、可重復性好，還可降低試劑的用量。

附圖說明

圖1為人類胃組織幽門螺桿菌的銀染法顯示

圖2為人類胃組織幽門螺桿菌的銀染法顯示

圖3為人類牙齒刮片表面粘液內幽門螺桿菌的銀染法顯示

圖1、2中，Hp呈大小相近的短棒狀、彎曲狀、螺旋狀深綜或黑色顯像，聚居或散在出現，其中1為腺上皮，2為HP。圖3為人類牙齒刮片表面粘液內幽門螺桿菌的銀染法顯示：Hp呈大小相近的短棒狀、彎曲狀深綜或黑色顯像，散在出現，其中，2為HP，3為脫落細胞。

具體實施方式

實施例1：人類胃粘膜表面幽門螺桿菌的顯示方法

1、生物組織經石蠟包埋切片置于玻璃載物片上烤干貼附牢固備用，

2、檢測的方法是：

分別取30毫升和60毫升去離子水加于分別盛有1克硝酸銀粉末、2克對苯二酚明膠粉末的容器中，充分溶解備用；

取上述的一部分硝酸銀液，即：20毫升硝酸銀液加以一倍體積去離子水混勻，加入擺放有生物組織切片的清潔染色缸中，置60℃溫箱30分鐘；去離子水涮洗，備用；

將剩余硝酸銀液10毫升傾入對苯二酚明膠液(對苯二酚與明膠的重量比1∶50或1∶100)快速充分混合，并將混合液加入擺放有生物組織切片的清潔染色缸中，顯影2分鐘；在生物組織切片呈咖啡色時，傾去顯影液，自來水涮洗；脫水透明封固。