[發明專利]一種大鼠慢性后肢缺血模型的制備方法

無效

• 申請號: 200810224385.4
• 申請日: 2008-10-23
• 公開（公告）號: CN101390779A
• 公開（公告）日: 2009-03-25
• 發明（設計）人: 張建;陳兵;李建新;俞恒錫;羅濤;楊盛家;佟鑄;汪忠鎬
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學宣武醫院
• 主分類號: A61B19/00
• 分類號: A61B19/00
• 代理公司: 北京正理專利代理有限公司
• 代理人: 李 超

技術領域

本發明涉及一種慢性后肢缺血動物模型的制備方法，屬于醫學生物技術領域和 實驗動物學領域。

背景技術

據國外的資料統計，在美國每年有超過15萬人因為下肢的嚴重缺血而不能行介入 或者手術治療，隨著動脈硬化的不斷進展，下肢缺血不斷加重。最后患者只能選擇截 肢。近幾年隨著再生醫學的不斷發展，不斷有新的治療性血管新生手段出現如：將各 種生長因子導入缺血部位，以達到血管新生(angiogenesis)或者血管生成 (arteriogenesis)的目的。動物試驗發現如：骨髓干細胞，細胞因子(VEGF，bBGF等) 都可以有效的促進血管生成或者血管新生以改善下肢血供，為臨床治療無流出道，嚴 重的慢性下肢缺血患者提供了新的治療思路，但是以上的治療手段應用到臨床后效果 卻難以領人滿意，當然，原因是多方面的，但不可否認的是，其中一個重要的原因是 目前在研究治療性血管新生手段和機制時，所利用的動物模型都是急性下肢缺血模型， 不能全方面的反應慢性下肢缺血后機體的各種病理生理變化特點。

目前國內外研究肢體缺血所用動物模型都是基于急性缺血，制備方法主要是通過 結扎股動脈，髂外動脈，或者剝脫股深動脈的方法造成下肢的急性缺血，在急性缺血 的后期一般是被認為是慢性缺血過程。文獻報道在發生急性缺血后，局部產生的剪切 力；炎性反應；內皮主細胞的局部浸入，以上三大機制都在短時間內參與血管新生和 生成。

但是在臨床上我們面臨的往往是在動脈硬化的基礎上造成下肢的慢性缺血，長期 的慢性缺血使下肢肌肉通過改變代謝方式以及肌纖維的構型來適應對缺血的改變，從 而避免了如急性下肢缺血所造成的壞死，炎性反應，而不是通過局部血管急性代償后 改善下肢血運的。綜上所述，急性下肢缺血與臨床慢性下肢缺血有諸多方面存在差異， 目前應用的急性后肢缺血動物模型并不適合研究的需要。

我們知道動物模型對研究疾病的發生發展及治療有著重要意義，準確的動物模型 應該具有穩定可靠，重復性強，制備簡單等特點。肢體缺血模型在國內外應用極為廣泛， 但是有關肢體缺血模型的專門研究卻一向少見。即使在相關的文獻中對該模型的敘述 也甚少。

就目前的參考文獻來看，缺血狀態有暫時缺血和慢性缺血之分。前者多用于缺血 預處理和缺血再灌注的研究之中，其制作方式有兩種：一是外用止血帶止血器或繃帶 等環扎于肢體根部，過一段時間后再放開，以此達到暫時缺血的目的；另一種是分離局 部的供血動脈，或用動脈夾暫時夾閉血流。

急性缺血是肢體缺血模型的主流，應用最為廣泛其制作方法大體上以結扎并切除 后肢的供血動脈主干或其分支為主。但是在大多數的動物模型制作過程中，如果結扎 并切斷某一支供血動脈的近端，通常引起遠端肢體缺血壞死的情況并不多見：據報道犬 的下肢缺血模型需要結扎14支動脈，包括盆腔動脈，髂總動脈股總動脈和它們的分支。 經過6周以后，這些犬的患肢能恢復到大致正常的血流水平。切斷兔的髂總動脈形成的 肢體缺血只能維持17天，30天以后，兔不表現出嚴重的后肢缺血。

也有研究者采用其它方式制作肢體缺血模型：如邊杰芳等在制作犬后肢缺血模型 時，在股動脈壁切一小口，向遠端插入螺旋狀金屬絲一根，縫合一針固定金屬絲，然后縫 合動脈切口使金屬絲留在股動脈內。Gale?L.Tang于大鼠股動脈根部加上ameroid constrictor(一種可吸水收縮的材料)后，使股動脈外徑逐漸縮窄從而達到制備慢性下肢 缺血模型的目的。但此類模型也存在諸如：下肢缺血時間維持時間短；物理性縮窄血 管外徑于臨床病變相差甚遠；缺血時間不易控制等缺點，所以其制作出的缺血模型其具 體效果仍待驗證。

目前國內外尚無其他慢性下肢缺血模型的報道。

發明內容

本發明要解決的第技術問題是提供一種慢性后肢缺血動物模型的制備方法。

為實現上述目的，本發明采取以下技術方案：

一種慢性后肢缺血動物模型的制備方法，在實驗動物的股動脈中插入線栓材料至 膝關節附近，縫合切口；造成動脈管腔狹窄并產生異物反應，使管腔內逐漸產生內膜 增生，逐漸造成下肢血流的減少，建立慢性后肢缺血動物模型。