[發明專利]Math1基因對感音神經性耳聾的治療作用無效
| 申請號： | 200810222414.3 | 申請日： | 2008-09-16 |
| 公開（公告）號： | CN101392267A | 公開（公告）日： | 2009-03-25 |
| 發明（設計）人： | 楊仕明;翟所強;高維強;郭維維;胡吟燕;陳偉;申衛東;王秋菊;韓東一;楊偉炎 | 申請（專利權）人： | 楊仕明;中國人民解放軍總醫院 |
| 主分類號： | C12N15/861 | 分類號： | C12N15/861;C12N7/01;C12N15/12;A61K48/00;A61P27/16 |
| 代理公司： | 北京律誠同業知識產權代理有限公司 | 代理人： | 梁 揮;祁建國 |
| 地址： | 100853*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | math1 基因 神經性 耳聾 治療 作用 | ||
1、一種表達Math1基因的腺病毒載體，通過將編碼Math1蛋白的基因可操作地與表達載體pAdeno-X重組而構建，其特征在于，其具有圖1所示的結構。
2、權利要求1所述腺病毒載體的構建方法，包括：
(1)將質粒PRK5-Math1-EGFP可操作地克隆到穿梭載體pshuttle?2，獲得穿梭表達載體pshuttle?2-Math1-EGFP，其具有圖3所示的結構；
(2)將步驟(1)的穿梭載體pshuttle?2-Math1可操作地與腺病毒表達載體pAdeno-X重組，獲得腺病毒表達載體pAdeno-Math1-EGFP。
3、權利要求2所述的構建方法，其特征在于，所述步驟(1)中利用Xba?I和Kpn?I雙酶切進行所述重組，所述步驟(2)中利用PI-Sce?l和I-CeuI雙酶切進行所述重組。
4、權利要求2或3所述的構建方法，其特征在于，所述重組進一步包括回收、T4DNA連接酶連接、轉化大腸桿菌EColi.DH5?α、培養以及篩選。
5、一種表達Math1蛋白的轉化體，其特征在于，其含有權利要求1所述的載體和宿主。
6、權利要求5所述的轉化體，其特征在于，所述宿主是腺病毒。
7、一種制備表達Math1蛋白的重組腺病毒的方法，包括：
(1)將編碼Math1蛋白的基因可操作地與表達載體pAdeno-X重組獲得載體pAdeno-Math1-EGFP；
(2)將步驟(1)所獲得的載體線性化后轉染HEK293細胞；
(3)離心，獲得純化的重組腺病毒。
8、權利要求7所述的方法制備的重組腺病毒在耳聾的基因治療方面的應用。
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