[發(fā)明專利]結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的藻藍(lán)蛋白β亞基類熒光蛋白及其應(yīng)用無效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 200810219660.3 | 申請(qǐng)日： | 2008-12-04 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN101759789A | 公開（公告）日： | 2010-06-30 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 趙開弘;周明;佟順剛;夏坤 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 廣州天寶頌原生物科技開發(fā)有限公司;華中科技大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C07K14/405 | 分類號(hào)： | C07K14/405;C07K19/00;C12N15/31;C12N15/62;C12N15/63;G01N33/52;G01N33/543 |
| 代理公司： | 廣州市南鋒專利事務(wù)所有限公司 44228 | 代理人： | 劉媖 |
| 地址： | 510663 廣東省廣州市科學(xué)*** | 國(guó)省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 結(jié)合 藻藍(lán)膽素 pcb 蛋白 亞基類 熒光 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的藻藍(lán)蛋白beta亞基類熒光蛋白，其特征在于：將藻藍(lán)蛋白beta亞基編碼基因克隆于表達(dá)質(zhì)粒，表達(dá)得到藻藍(lán)蛋白beta亞基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的藻藍(lán)蛋白beta亞基類熒光蛋白，其特征在于：所述的蛋白質(zhì)的序列為序列1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的藻藍(lán)蛋白beta亞基類熒光蛋白，其特征在于：所述的蛋白質(zhì)序列N端具有His-tag標(biāo)記，但是His-tag標(biāo)記不限于N端。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的藻藍(lán)蛋白beta亞基類熒光蛋白，其特征在于：所述的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB是指藻藍(lán)膽素PCB通過硫醚鍵結(jié)合在130位，相當(dāng)于原始藻藍(lán)蛋白beta亞基的82位。
5.一種結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的藻藍(lán)蛋白beta亞基類熒光蛋白突變體，其特征在于：將藻藍(lán)蛋白beta亞基編碼基因克隆于表達(dá)質(zhì)粒，利用基因工程方法將其突變，表達(dá)得到藻藍(lán)蛋白beta亞基突變體，對(duì)除結(jié)合色素的130外的所有位點(diǎn)進(jìn)行突變不會(huì)對(duì)蛋白性質(zhì)有較大的影響，屬于同類蛋白，對(duì)此蛋白進(jìn)行部分缺失，對(duì)蛋白性質(zhì)無大的影響，屬于同類蛋白。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的藻藍(lán)蛋白beta亞基類熒光蛋白突變體，其特征在于：將藻藍(lán)蛋白beta亞基編碼基因克隆于表達(dá)質(zhì)粒，利用基因工程方法把其第201位(相當(dāng)于原始藻藍(lán)蛋白beta亞基第153位)半胱氨酸殘基突變?yōu)楫惲涟彼釟埢磉_(dá)得到藻藍(lán)蛋白beta亞基突變體。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的藻藍(lán)蛋白beta亞基類熒光蛋白的突變體，其特征在于：所述的突變體的序列為序列2。
8.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的藻藍(lán)蛋白beta亞基類熒光蛋白突變體，其特征在于：所述的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB是指藻藍(lán)膽素PCB通過硫醚鍵結(jié)合在130位，相當(dāng)于原始藻藍(lán)蛋白beta亞基的82位。
9.一種鏈霉親和素標(biāo)記的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的藻藍(lán)蛋白beta亞基類熒光蛋白，其特征在于：將鏈霉親和素編碼基因和藻藍(lán)蛋白beta亞基編碼基因拼接后克隆于表達(dá)質(zhì)粒，表達(dá)得到鏈霉親和素和藻藍(lán)蛋白beta亞基的融合蛋白。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的鏈霉親和素標(biāo)記的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的藻藍(lán)蛋白beta亞基類熒光蛋白，其特征在于：所述的蛋白質(zhì)的序列為序列3。
11.根據(jù)權(quán)利要求9或10所述的一種鏈霉親和素標(biāo)記的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的藻藍(lán)蛋白beta亞基類熒光蛋白，其特征在于：鏈霉親和素在CpcB的N端，但是不限于在N端。
12.根據(jù)權(quán)利要求9、10或11所述的鏈霉親和素標(biāo)記的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的藻藍(lán)蛋白beta亞基類熒光蛋白，其特征在于：所述的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB是指藻藍(lán)膽素PCB通過硫醚鍵結(jié)合在258位，相當(dāng)于原始藻藍(lán)蛋白beta亞基的82位。
13.一種鏈霉親和素標(biāo)記的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的藻藍(lán)蛋白beta亞基類熒光蛋白突變體，其特征在于：將鏈霉親和素編碼基因和藻藍(lán)蛋白beta亞基編碼基因拼接后克隆于表達(dá)質(zhì)粒，利用基因工程方法把其第329位(相當(dāng)于原始藻藍(lán)蛋白beta亞基第153位)半胱氨酸殘基突變?yōu)楫惲涟彼釟埢磉_(dá)得到鏈霉親和素和藻藍(lán)蛋白beta亞基的融合蛋白的突變體。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的鏈霉親和素標(biāo)記的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的藻藍(lán)蛋白beta亞基類熒光蛋白突變體，其特征在于：所述的蛋白質(zhì)的序列為序列4。
15.根據(jù)權(quán)利要求13或14所述的鏈霉親和素標(biāo)記的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的藻藍(lán)蛋白beta亞基類熒光蛋白突變體，其特征在于：所述的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB是指藻藍(lán)膽素PCB通過硫醚鍵結(jié)合在258位，相當(dāng)于原始藻藍(lán)蛋白beta亞基的82位。
16.結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的藻藍(lán)蛋白beta亞基類熒光蛋白的應(yīng)用，其特征在于：利用鏈霉親和素標(biāo)記的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的藻藍(lán)蛋白beta亞基類熒光蛋白檢測(cè)可溶性抗原或抗體的免疫檢測(cè)。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的藻藍(lán)蛋白beta亞基類熒光蛋白的應(yīng)用，其特征在于：所述的免疫檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將可與固相結(jié)合并能識(shí)別抗原的第一抗體包被固相上，封閉液封閉未結(jié)合抗體部分，備用；
(2)將待測(cè)抗原、識(shí)別抗原的第二抗體、識(shí)別第二抗體的標(biāo)記生物素的抗抗體、標(biāo)記鏈霉素親和素的熒光藻膽蛋白按一定步驟加入固相中，充分反應(yīng)；
(3)利用微孔板熒光檢測(cè)儀或其它相應(yīng)的儀器檢測(cè)熒光，分析結(jié)果。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于廣州天寶頌原生物科技開發(fā)有限公司;華中科技大學(xué)，未經(jīng)廣州天寶頌原生物科技開發(fā)有限公司;華中科技大學(xué)許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請(qǐng)聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/200810219660.3/1.html，轉(zhuǎn)載請(qǐng)聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
- 可逆光致變色藻膽蛋白的制備方法
- 結(jié)合藻紅膽素的藻藍(lán)蛋白熒光探針的制備方法
- 一種鏈霉親和素標(biāo)記的結(jié)合藻紅膽素的藻藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì)的制備方法
- 鏈霉親和素標(biāo)記的結(jié)合藻紅膽素的藻藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì)的制備方法
- 鏈霉親和素標(biāo)記的結(jié)合藻紅膽素的藻紅藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì)的制備方法
- 鏈霉親和素標(biāo)記的結(jié)合藻紅膽素的藻紅藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì)的制備方法
- 分子設(shè)計(jì)結(jié)合藻紅膽素的藻紅藍(lán)蛋白α亞基類熒光蛋白質(zhì)的制備方法
- 分子設(shè)計(jì)鏈霉親和素標(biāo)記的結(jié)合藻紅膽素的藻紅藍(lán)蛋白α亞基類熒光蛋白質(zhì)的制備方法
- 一種重組藻藍(lán)膽素的制備方法及其應(yīng)用
- 一種提取藻藍(lán)膽素的方法
