[發明專利]一種豬胚胎移植方法

無效

• 申請號: 200810218335.5
• 申請日: 2008-12-12
• 公開（公告）號: CN101427946A
• 公開（公告）日: 2009-05-13
• 發明（設計）人: 律波;楊珍珍;蔡雅蘭;徐穎;陳玉;杜玉濤
• 申請（專利權）人: 深圳華大基因科技有限公司
• 主分類號: A61D19/04
• 分類號: A61D19/04
• 代理公司: 深圳中一專利商標事務所
• 代理人: 張全文

技術領域

本發明屬于一種胚胎移植方法，尤其涉及一種豬胚胎移植方法。

背景技術

豬的胚胎移植，是將豬的體內發育或是體外培養的早期胚胎取出，再移植到經同期化處理的受體豬輸卵管或子宮中，使其繼續發育的技術。胚胎移植是胚胎工程中不可缺少的重要部分，是連接供體(胚胎)與受體的橋梁。

現有豬的胚胎移植方法，主要通過手術法。

手術法移植胚胎能夠將胚胎移植到比較準確的部位，但在移植過程中，其過程需要剖開受體豬，并需要麻醉受體豬。這樣，豬體有創傷，需要術后恢復過程，而且手術部位會有感染的危險。另外，采用這種方法受體母豬使用次數也有限制。

發明內容

本發明實施例的目的在于提供一種豬胚胎移植方法，旨在解決在豬的胚胎移植過程中，手術和麻醉容易使受體母豬受到傷害，給其帶來痛苦的問題。

本發明實施例是這樣實現的，一種豬胚胎移植方法，包括如下步驟：

(1)將受體豬人工保定，清洗受體豬陰門部，從陰門處向陰道內插入深宮輸精管外管至其海綿頭堵住子宮頸口，再向深宮輸精管內插入內置的柔性細管至子宮角內；

(2)第一次灌注胚胎培養液于內置柔性細管中潤洗細管后，第二次注入胚胎培養液，將發育至囊胚階段的豬胚胎從內置柔性細管外部開口處注入，使其與培養液混合，由內置柔性細管引導進入子宮角，然后第三次注入胚胎培養液沖洗內置柔性細管，折疊內置柔性細管外端開口處，利用空氣壓力，使液體全部流入子宮內；

(3)抽出內置柔性細管后再抽出深宮輸精管外管，然后讓受體豬保持站立姿勢至少15分鐘。

與現有技術相比，上述技術方案直接用深宮輸精管輔助，不需要麻醉和手術，豬體表面沒有創口，無需恢復過程，無創口感染的危險。因此，在胚胎移植過程中，不會因此使受體母豬受到傷害，給其帶來痛苦。另外，受體母豬重復利用次數與正常母豬使用次數一致。

具體實施方式

為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下結合實施例，對本發明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發明，并不用于限定本發明。

本發明的實施例提供一種與現有豬胚胎移植方法相比，不需要麻醉和手術，為此，本發明實施例的豬胚胎移植方法，包括如下步驟：

(1)將受體豬人工保定，清洗受體豬陰門部，從陰門處向陰道內插入深宮輸精管外管至其海綿頭堵住子宮頸口，再向深宮輸精管內插入內置的柔性細管至子宮角內；

(2)第一次灌注胚胎培養液于內置柔性細管中潤洗細管后，第二次注入胚胎培養液，將發育至囊胚階段的豬胚胎從內置柔性細管外部開口處注入，使其與培養液混合，由內置柔性細管引導進入子宮角，然后第三次注入胚胎培養液沖洗內置柔性細管，折疊內置柔性細管外端開口處，利用空氣壓力，使液體全部流入子宮內；

(3)抽出內置柔性細管后再抽出深宮輸精管外管，然后讓受體豬保持站立姿勢至少15分鐘。

本實施例中，步驟(1)中保定是指：使豬體保持站立姿勢，豬口部用繩子一端綁好，繩子另一端捆綁在某固定物上，再利用靜壓反射，按壓豬體腰背部。這樣，可避免豬體過大晃動。

本實施例中，步驟(3)中，讓受體豬保持站立姿勢至少15分鐘，是為了避免液體倒流，造成胚胎流失。

本實施例中，步驟(2)中每次注入的胚胎培養液為3～5mL。因為母豬在妊娠早期，子宮液分泌很少，輸入液體量過多時，植入的胚胎會隨液體流入子宮頸管，造成胚胎的損失或死亡。

本實施例中，受體豬可以為斷奶后，自然觀測發情4～5天的經產母豬，此時，深宮輸精管采用經產深入子宮輸精管；受體豬也可以為初產母豬，此時，深宮輸精管則采用初產深入子宮輸精管。該兩種深入子宮輸精管皆包括一個帶海綿頭的輸精管，和一條至少1.5米長的內置柔性細管。

本實施例中，豬胚胎，包括手工克隆生產的豬胚胎，體外受精技術生產的豬胚胎以及活體采集的豬胚胎。該豬胚胎在體外條件下，在專業培養箱中發育至囊胚階段。將發育至囊胚階段的豬胚胎取出后，裝入移植導管中，如需運輸，應將移植導管封口，于38.5℃條件下運輸。

以上所述僅為本發明的較佳實施例而已，并不用以限制本發明，凡在本發明的精神和原則之內所作的任何修改、等同替換和改進等，均應包含在本發明的保護范圍之內。