[發明專利]一種毒死蜱農藥降解菌、其菌劑和制備方法

有效

• 申請號: 200810215259.2
• 申請日: 2008-09-18
• 公開（公告）號: CN101469313A
• 公開（公告）日: 2009-07-01
• 發明（設計）人: 胡美英;鐘國華;高燕
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A62D3/02;C12R1/645;A62D101/04
• 代理公司: 廣州粵高專利代理有限公司
• 代理人: 林麗明

技術領域

本發明涉及微生物技術領域，尤其是涉及一種毒死蜱農藥降解菌、其菌劑和制備方法。?

技術背景?

水果、蔬菜是人們必不可少的生活必需品，農藥是果蔬生產過程中防治病蟲草害、保證產量質量必不可少的選擇。?

確保果蔬農藥殘留符合食品衛生標準，涉及每位公民的生命健康，已成為各級政府實施“菜籃子、果籃子”工程的重要內容。同時，隨著生活水平的不斷提高，“綠色食品、無公害果蔬”日益深入民心，果蔬農藥殘留亦成為公眾關注的焦點之一。?

在利益驅動、病蟲危害、使用者素質等各種因素綜合作用下，農藥的不科學使用情況普遍嚴重，并直接導致了果蔬農藥殘留的嚴重超標，威脅人們的生命安全與健康，而且很大程度上影響了我國果蔬出口創匯。國際市場以農藥殘留為最大的直接切入點，對我國出口果蔬樹起嚴格的“綠色壁壘”。國家出入境檢驗檢疫總局、農業部等部門指出農藥殘留已成為我國果蔬出口創匯的最主要阻礙因素和“瓶頸”，必須高度重視果蔬農藥殘留的源頭控制及治理新技術研究。?

果蔬農藥殘留治理新技術是食品安全生產的關鍵配套技術。控制農藥污染源以及殘留治理新技術研究是解決食品中農藥殘留的基本辦法。目前減少農藥殘留污染的研究大多集中在選用高效低毒低殘留?化學農藥和生物農藥、改進劑型及應用技術方面，但是收效甚微。農產品生產過程中農藥的使用不可缺少，尋求高效、安全、經濟的農產品農藥殘留處理新技術，解決病蟲害防治用藥與農藥殘留的矛盾，已成為科研工作者亟待解決的具有重大經濟和社會意義的重大科研命題。利用微生物降解劑處理農產品，是農藥殘留控制處理的新領域、新途徑，許多發達國家和大公司企業投入巨資以從事農藥殘留高效降解菌的研究開發。實驗室和實際應用研究都表明利用微生物來降解果蔬中的農藥殘留，可有效提高農產品的品質和經濟價值。?

毒死蜱是近年來使用非常廣泛的一種農藥，目前還沒有發現專門針對毒死蜱農藥的降解菌劑。?

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術的不足，提供一種新的毒死蜱農藥降解菌。?

本發明另一目的是提供了實現所述毒死蜱農藥降解菌的方法。?

本發明的還有一個目的是提供了使用所述毒死蜱農藥降解菌制備菌劑的方法，得到的菌劑可以使毒死蜱等有機磷農藥的殘留量降低85％以上，具有較高的降解效果，生產和使用成本較低。?

本發明的技術方案是提供一種毒死蜱農藥降解菌，所述降解菌為枝孢菌屬Cladosporium?sp.的Hu-01菌株，CladosporiumCladosporioides(Fresen.)de?Vries?Hu-01，于2007年7月20日在湖北武漢珞珈山武漢大學中國典型培養物保藏中心保藏，菌種保藏號為CCTCC?M207111，該菌株ITS序列分析的Genebank登陸號為?EF405864。?

所述毒死蜱農藥降解菌的制備方法，包括以下步驟：?

菌種采用砂土管保存法保存；將毒死蜱農藥降解菌Hu-01的菌種在培養皿上活化，接種于試管斜面；按照以下配方配制查彼氏培養基(Czapek?medium)：硝酸鈉：2.0g，氯化鉀：0.5g，硫酸鎂：0.5g，磷酸氫二鉀：1.0g，硫酸鐵：0.01g，蔗糖：30.0g，蒸餾水：1000mL。在pH7.0的液體查彼氏培養基中，接入0.1g濕菌體，在28℃，150r/min的搖床中培養1～7d。?

本發明提供了采用所述毒死蜱農藥降解菌制備降解菌劑的方法，包括以下步驟：?

(1)將毒死蜱農藥降解菌Hu-01的菌種在培養皿上活化，接種于試管斜面；?

(2)將毒死蜱農藥降解菌Hu-01的斜面種接種于查彼氏培養基搖瓶中，振蕩培養至對數期；?

(3)將(2)菌種按照8％～10％的接種量種入種子罐，培養至對數生長期；?

(4)將到達對數期種子液按照8％～10％的接種量接種入生產罐培養；?

(5)培養液經離心取上清得菌液，菌液立即加入保護劑，分裝成液體劑型。?

步驟(3)所述種子罐培養條件為無菌空氣的通氣量為45～60L/min，攪拌速度為200～300轉/分，溫度28℃。?

步驟(3)種子罐所用的培養基配方為NaNO₃0.2％，K₂HPO₄0.1％，KCl0.05％，MgSO₄0.05％，Fe₂(SO₄)₃0.001％，蔗糖3％，蛋白胨0.5％。?