[發明專利]微生態復合菌劑及微生態復合菌劑的制備方法

無效

• 申請號: 200810209573.X
• 申請日: 2008-11-28
• 公開（公告）號: CN101406489A
• 公開（公告）日: 2009-04-15
• 發明（設計）人: 劉宇峰;王金英;于沖;曲曉軍;夏海華;孫建華;奚新偉;王哲;楊賀晴;趙曉磊
• 申請（專利權）人: 黑龍江省科學院微生物研究所
• 主分類號: A61K36/064
• 分類號: A61K36/064;A61P1/00;A61P43/00;C12N1/16;C12N1/20;A61K35/74
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所
• 代理人: 單 軍

1.微生態復合菌劑的制備方法，其特征在于微生態復合菌劑按以下步驟進行制備：一、分別對納豆芽孢桿菌、乳酸克魯維酵母菌和嗜酸乳桿菌進行培養；二、擴大培養；三、將乳酸克魯維酵母菌、嗜酸乳桿菌和納豆芽孢桿菌分別轉入相應的高菌濃度培養液繼續培養至菌落濃度為1.0×10⁷～9.9×10⁹個/mL，然后在0～4℃、5000～10000r/min的條件下離心15～50min；四、將三種菌體離心沉淀物分別放入含有脫脂乳粉、海藻糖、甘油、蔗糖、谷氨酸鈉的保護劑中，然后在-10～-70℃的環境中預凍10～24h，再在無菌條件下真空冷凍干燥，三種菌的凍干粉等質量混合后加入大豆低聚糖，即得到微生態復合菌劑；其中步驟四中大豆低聚糖的加入量占微生態復合菌劑總質量的10％～30％；步驟四中菌體離心沉淀物與保護劑的重量比為1～9∶10，保護劑中脫脂乳粉的質量濃度為10％、海藻糖的質量濃度為1％、甘油的質量濃度為1％、蔗糖的質量濃度為1％、谷氨酸鈉的質量濃度為0.1％。

2.根據權利要求1所述的微生態復合菌劑的制備方法，其特征在于步驟一中嗜酸乳桿菌在25～40℃、100～180r/min的條件下用乳清培養基旋轉或振蕩培養24～72h；步驟一中乳酸克魯維酵母菌在25～40℃、100～180r/min的條件下用乳清培養基旋轉或振蕩培養24～72h；步驟一中納豆芽孢桿菌在25～40℃、100～180r/min的條件下用蔗糖肉胨液體培養基旋轉或振蕩培養24～72h。

3.根據權利要求2所述的微生態復合菌劑的制備方法，其特征在于用于培養嗜酸乳桿菌的乳清培養基按重量百分比由0.5％的酵母膏、0.03％的胱氨酸和余量的波美度為5°BX的麥芽汁組成，并調節pH值為6.8；用于培養乳酸克魯維酵母菌的乳清培養基為波美糖度是10°BX的麥芽汁，調節pH值為6.8；用于培養納豆芽孢桿菌的液體培養基按重量百分比由2.0％的麥芽糖、1.5％的大豆胰蛋白胨、0.2％的酵母膏、0.3％的K₂HPO₄、0.05％的MgSO₄.5H₂O、0.02％的CaCl₂.5H₂O和余量的蒸餾水組成，并調節pH值為7.0。

4.根據權利要求1所述的微生態復合菌劑的制備方法，其特征在于步驟三中嗜酸乳桿菌的高菌濃度培養液按重量百分比由10％的乳清粉、1％的葡萄糖、0.03％的胱氨酸和余量的雙蒸餾水組成，并調節pH值為6.8；步驟三中乳酸克魯維酵母菌的高菌濃度培養液按重量百分比由10％的乳清粉、1％的葡萄糖和余量的雙蒸餾水組成，并調節pH值為6.8；步驟三中納豆芽孢桿菌的高菌濃度培養液按重量百分比由1％的蛋白胨、1％的蔗糖、1％的牛肉浸膏、0.5％的NaCl和余量的蒸餾水組成，并調節pH值為6.8。