[發明專利]胎兒甲種球蛋白檢測微粒、其制備及應用

有效

• 申請號: 200810204998.1
• 申請日: 2008-12-30
• 公開（公告）號: CN101769931A
• 公開（公告）日: 2010-07-07
• 發明（設計）人: 趙衛國;王海蛟;陳晨輝
• 申請（專利權）人: 博陽生物科技(上海)有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/543;G01N33/52;G01N21/76;G01N21/64
• 代理公司: 上海光華專利事務所 31219
• 代理人: 許亦琳;余明偉

1.一種用于檢測胎兒甲種球蛋白的檢測微粒，為抗-AFP抗體包被的發光微粒，所述檢測微 粒經如下工藝制得：

a）混合：將發光微粒與抗-AFP抗體混合于MES緩沖液中，發光微粒與抗-AFP抗體的 質量比例為（8-15）：1；

b）反應：加入MES緩沖液配制的EDAC溶液混合并反應，混合溶液中，發光微粒與EDAC 的質量比為（15-40）：1混合；

c）往步驟b獲得的反應液中加入MES緩沖液配制的BSA溶液混勻并反應；

d）清洗產物，獲得抗-AFP抗體包被的發光微粒。

2.如權利要求1所述用于檢測胎兒甲種球蛋白的檢測微粒，其特征在于，所述發光微粒粒 徑為50nm到400nm。

3.如權利要求1所述用于檢測胎兒甲種球蛋白的檢測微粒，其特征在于，所述發光微粒表 面官能團選自羧基或醛基。

4.如權利要求1所述用于檢測胎兒甲種球蛋白的檢測微粒，其特征在于，所述發光微粒的 發光量為150,000-350,000光子數/100μg發光微粒。

5.如權利要求1所述用于檢測胎兒甲種球蛋白的檢測微粒，其特征在于，所述，發光微粒 與抗-AFP抗體的質量比例為12.5：1。

6.如權利要求1所述用于檢測胎兒甲種球蛋白的檢測微粒，其特征在于，所述步驟d的清 洗的方式為離心法清洗。

7.一種胎兒甲種球蛋白的檢測試劑盒，包括權利要求1-6中任一權利要求所述用于檢測胎 兒甲種球蛋白的檢測微粒。

8.如權利要求7所述胎兒甲種球蛋白的檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括生物 素標記的抗-AFP抗體或親和素包被的感光微粒中的一種或兩種。

9.如權利要求8所述胎兒甲種球蛋白的檢測試劑盒，其特征在于，所述生物素標記的抗-AFP 抗體中，生物素與抗體的分子比例為(10-20)：1。

10.如權利要求8所述胎兒甲種球蛋白的檢測試劑盒，其特征在于，所述親和素包被的感光 微粒中，親和素與感光微粒的質量比例為1：（3-10）。

11.如權利要求8所述胎兒甲種球蛋白的檢測試劑盒，其特征在于，所述用于檢測胎兒甲種 球蛋白的檢測微粒、生物素標記的抗-AFP抗體以及親和素包被的感光微粒分別獨立包 裝，且均為混懸液。

12.如權利要求11所述胎兒甲種球蛋白的檢測試劑盒，其特征在于，所述混懸液的溶劑選 自HEPES緩沖體系或Tris緩沖體系。

13.如權利要求12所述胎兒甲種球蛋白的檢測試劑盒，其特征在于，所述用于檢測胎兒甲 種球蛋白的檢測微粒混懸液的溶劑為pH8.0的成分為HEPES、NaCl和EDTA-Na-2H₂O的 HEPES緩沖液。

14.如權利要求12所述胎兒甲種球蛋白的檢測試劑盒，其特征在于，所述生物素標記的抗 -AFP抗體混懸液的溶劑為pH8.0的成分為Tris、NaCl和EDTA-Na-2H₂O的Tris緩沖液。

15.如權利要求12所述胎兒甲種球蛋白的檢測試劑盒，其特征在于，所述親和素包被的感 光微粒混懸液的溶劑為成分為HEPES、NaCl和EDTA-Na-2H₂O的HEPES緩沖液。

16.如權利要求11所述胎兒甲種球蛋白的檢測試劑盒，其特征在于，所述混懸液中還包括 蛋白保護劑、防止微粒聚集的穩定試劑或防腐劑中的一種或多種。

17.如權利要求7-16中任一權利要求所述胎兒甲種球蛋白的檢測試劑盒，其特征在于，所 述檢測試劑盒中還包括陽性對照和陰性對照。

18.如權利要求7-16中任一權利要求所述胎兒甲種球蛋白的檢測試劑盒，其特征在于，所 述試劑盒中還包括多種已知濃度的胎兒甲種球蛋白溶液，不同濃度的胎兒甲種球蛋白溶 液分別獨立包裝。