[發明專利]一種從柚核中提取檸檬苦素的工藝

有效

• 申請號: 200810204440.3
• 申請日: 2008-12-11
• 公開（公告）號: CN101531666A
• 公開（公告）日: 2009-09-16
• 發明（設計）人: 江邦和;王輝;徐環昕;寧方紅;張磊;劉坐鎮
• 申請（專利權）人: 華東理工大學華昌聚合物有限公司;上海華震科技有限公司
• 主分類號: C07D493/22
• 分類號: C07D493/22;A61K36/752
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司
• 代理人: 俞宗耀

技術領域

本發明屬于生物化學分離純化技術領域，具體涉及從柚核中分離純化提取檸檬苦素的工藝。

背景技術

檸檬苦素(limonin)即黃柏內酯，又稱吳茱萸苦素、白蘚內酯，是一種三萜類植物次生代謝產物，主要存在于蕓香科和楝科植物中。科屬蕓香科的柚子果實中含有檸檬苦素，以柚核中含量最大。檸檬苦素具有抗癌、鎮痛、除蟲和殺蟲、調節體內膽固醇水平，防止動脈粥樣化等功效。因此分離純化檸檬苦素引起了生化科研工作者的重視，文獻中已有相關分離純化檸檬苦素工藝的報道。

中國專利CN1279242A中提供了一種從蕓香科果實中提取檸檬苦素的工藝。該工藝先將蕓香科果核烘干粉碎，再用石油醚徹底脫脂三次，然后用丙酮抽提檸檬苦素，提取液蒸發濃縮至干后，用二氯甲烷和異丙醇的混合液溶解濃縮物，過濾后，置于低溫下，進行結晶，產品用二氯甲烷和異丙醇混合液重結晶兩次，得到檸檬苦素產品。該工藝在脫脂過程中，需消耗大量溶劑、電能，成本高，操作繁瑣且工藝不易放大。

施英等應用大孔吸附樹脂對檸檬苦素類似物進行了分離純化(施英，徐玉娟，吳娛明等.桔核中檸檬苦素類物質純化工藝的研究[J].廣東農業科學，2006，11：70～72)。該工藝用桔核提取的濃縮水溶液，經大孔吸附樹脂吸附分離，用乙醇水溶液淋洗，收集淋洗液后，冷凍干燥，得到檸檬苦素類似物。該技術能夠將檸檬苦素類似物分離出來，但含量不高，且不能分離出檸檬苦素單體。

綜上所述，現有技術工藝復雜，成本高，多為實驗室采用，不能大規模生產。

發明內容

本發明的目的是：提供一種簡單實用、溶劑淋洗劑可回收循環利用，成本低，適于進行大規模生產檸檬苦素制品的工藝。

為達到上述目的，采用的技術方案是：

一種從柚核中分離純化檸檬苦素的工藝，其特征在于依次包括下述步驟：

(1)柚核預處理??柚核經水洗滌、干燥后，粉碎；

(2)提取?柚核粉末料，以60％～80％乙醇水溶液作為溶劑，90℃～100℃熱回流抽提，得提取液；

(3)雜質分離?步驟(2)所述提取液稀釋至乙醇濃度為40％～60％，pH為3.0～5.0，以大孔吸附樹脂分離雜質，以30％～50％乙醇水溶液淋洗，淋洗液棄去；再以60％～80％乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液；

(4)濃縮、溶解??步驟(3)所述洗脫液減壓濃縮至干，用二氯甲烷溶解后過濾；

(5)結晶?步驟(4)得到的二氯甲烷過濾液中，加入2倍體積異丙醇，冷卻至4℃，緩慢攪拌結晶；

(6)過濾和干操?步驟(5)得到晶體物過濾，50℃～70℃真空干燥。

所述大孔吸附樹脂是骨架為苯乙烯-二乙烯苯共聚物的非極性吸附樹脂：市售HZ816、HZ818、HZ820中的一種。

步驟(1)中將經過水洗滌、60℃～70℃干燥6～8小時至衡重的柚核粉碎至20目～60目。

步驟(2)中，熱回流提取儀中柚核粉末料，粉末料重量(g)∶乙醇溶液(ml)為1∶(4-6)，進行20～35次的連續抽提。

經步驟(6)過濾和干操后，干燥成品用HPLC(Agilent?1100?Series)高效液相色譜儀測量含量，色譜柱：ZORBAX?SB-C18(4.6mm×100mm，3.5)；流動相：甲醇∶乙腈∶水＝45∶10∶45(v/v)；流速：0.6ml/min；檢測波長：210nm；柱溫：20℃。

結晶母液減壓蒸干，用乙醇溶解后，返回大孔吸附樹脂柱吸附分離。

本發明的有益效果是：利用熱回流提取、吸附樹脂分離雜質等過程，從柚核中提出了純度大于90％的檸檬苦素。工藝簡單，淋洗劑可回收循環利用，成本低，適合大規模生產應用。

附圖說明

圖1為從柚核中分離純化檸檬苦素的工藝流程圖。

具體實施方式

以下結合實施例對本發明作進一步說明，但并不限于實施例。

實施例中濃度非特別注明，均為體積百分濃度。

淋洗液可回收循環使用。

實施例1