[發明專利]一種豬細小病毒病活疫苗及其制備方法

無效

• 申請號: 200810204266.2
• 申請日: 2008-12-09
• 公開（公告）號: CN101745106A
• 公開（公告）日: 2010-06-23
• 發明（設計）人: 張婉華;倪建平;葉向陽;李春華;鄒勇;潘雪珠;徐平;曹偉明;朱永軍
• 申請（專利權）人: 上海佳牧生物制品有限公司;上海科立特農科(集團)有限公司
• 主分類號: A61K39/125
• 分類號: A61K39/125;A61P31/20
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 趙志遠

技術領域

本發明屬獸醫生物新醫藥技術領域，涉及豬細小病毒病疫苗，尤其涉及一種豬細小病毒病活疫苗及其制備方法。

背景技術

豬細小病毒病是由豬細小病毒(Porcine?parvovirus，PPV)感染而引起的豬繁殖障礙性疾病之一。PPV感染主要引起胚胎和胎兒的死亡，妊娠母豬表現流產，產死胎，木乃伊和弱仔等，尤其以產木乃伊胎多見。同時，PPV能加重豬圓環病毒引起的斷奶仔豬多系統衰竭綜合征，與其他免疫抑制性疾病并發感染時常給豬場帶來毀滅性打擊。本病廣泛分布于世界各地，給養豬業造成巨大的經濟損失。

自Mayr于1966年首次分離報道該病毒以來，已相繼從歐洲、美洲和亞洲等很多國家分離到豬細小病毒和檢測到抗體。我國在20世紀80年代初就有本病的報道，1983～1985年間，侯世寬、潘雪珠、鄔捷分別在黑龍江、上海、四川等地分離到PPV。近年來，在湖北、河南、山東、福建、廣西、新疆等地均有PPV感染的報道。調查表明，PPV在豬群中的感染率呈上升趨勢，在我國經產母豬和種公豬感染率高達92％。感染的公豬及母豬是主要的傳染源，病毒常由胎盤感染和交配感染傳給胎兒，也可通過被污染的食物、環境由呼吸道、消化道傳給易感動物，鼠類是重要的傳播媒介。

本病的流行常發生于春秋產仔季節，常見于初產母豬，一般呈地方性流行或散發。一旦PPV傳入陰性豬場，增殖、傳播迅速，于3個月內幾乎100％的豬只都會受到感染，在本病發生后，豬場可能連續幾年不斷地出現母豬繁殖失敗。母豬懷孕期感染后，其胚胎死亡率可達80％～100％。近年來由于規模化、集約化養殖程度越來越高，PPV感染呈現越來越嚴重的流行趨勢，給我國養豬業也造成嚴重危害。

PPV感染目前還沒有有效的治療方法，同其它許多病毒病的防制一樣，該病也主要以疫苗免疫預防為主。由于PPV血清型單一、免疫原性高，使得疫苗接種成為控制PPV感染的一種行之有效的方法。目前已有10多個國家研制出了PPV疫苗，包括滅活疫苗與弱毒活疫苗。

1.滅活疫苗

自1976年開始，國外就有關于PPV滅活疫苗的研究報道，并于20世紀80年代在美國、澳大利亞、法國等國家普遍應用。我國潘雪珠等(1987)首先成功研制了PPV滅活疫苗，此后鄔捷、韓孝成、肖馳、葉向陽等先后成功研制出PPV滅活疫苗。

目前我國已經取得新獸藥證書的豬細小病毒病疫苗有：上海農科院畜牧獸醫研究所研制的豬細小病毒油乳劑滅活疫苗((94)新獸藥證字第04號)、武漢中博生化有限公司豬細小病毒病滅活疫苗(CP-99株)(2006)新獸藥證字08號、華中農業大學、武漢科前動物生物制品有限責任公司、中牧實業股份有限公司聯合研制的豬細小病毒病滅活疫苗(wH-1株)((2006)新獸藥證字71號)。在市場上銷售豬細小病毒滅活疫苗的廠家主要有：上海佳牧生物制品有限公司(技術依托為上海農業科學院畜牧獸醫研究所)、齊魯動物保健品有限公司、武漢科前動物生物制品有限責任公司、上海海利生物藥品有限公司、上海松江生物藥品有限公司等。

滅活苗的使用劑量大，副反應也較大，促進了活疫苗的研發。

2.活疫苗

PPV弱毒活疫苗在國外已有商品化產品，最早發現和應用于臨床的是美國的PPV?NADL-2弱毒株，該毒株是將PPV強毒在實驗室利用細胞培養連續傳代50次以上致弱的。日本學者Fujisaki等將PPV野毒PPV?90HS在豬腎細胞上低溫(30℃)連續傳54代，產生HT變異株，在此基礎上，Akihiro等將HT株在豬腎細胞上培養并用紫外線照射后傳代，獲得了安全性更好的HT-SK-C株，利用該毒株生產的弱毒活疫苗已在日本商品化。

由于PPV強毒株的大量存在，人們對病毒重組及弱毒返強的擔心使弱毒活疫苗的應用受到一定限制，但是上述活疫苗在臨床上的多年應用效果證實，其是安全可靠的。

發明內容

本發明的目的就是為了提供一種具有良好安全性和免疫原性的豬細小病毒病活疫苗及其制備方法。

本發明的目的可以通過以下技術方案來實現：

一種豬細小病毒病活疫苗，其特征在于，該活疫苗采用豬細小病毒弱毒PPV_S-1A株，接種長勢良好的豬睪丸(ST)傳代細胞，收獲細胞培養物，加入適宜的穩定劑，經冷凍真空干燥制成，所述的活疫苗的每頭份病毒含量≥10^5.0TCID₅₀。