[發(fā)明專(zhuān)利]一種用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810202902.8
• 申請(qǐng)日: 2008-11-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101757688A
• 公開(kāi)（公告）日: 2010-06-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何紅兵
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 上海松力生物技術(shù)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): A61L27/26
• 分類(lèi)號(hào): A61L27/26;A61F2/82
• 代理公司: 上海科盛知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31225
• 代理人: 趙志遠(yuǎn)

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及動(dòng)物纖維蛋白膠材料，尤其是涉及一種用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的方法。

背景技術(shù)

纖維蛋白膠是由富纖維蛋白原組分(Fibrinogen-Rich-Fraction?FRF。其中主要含有纖維蛋白原、XIII因子、纖維連接蛋白)、凝血酶、氯化鈣等組成的生物材料。通過(guò)模擬凝血反應(yīng)的最后階段，用凝血酶激活纖維蛋白原形成纖維蛋白。Liu等使用原子力熒光顯微鏡檢測(cè)單一纖維蛋白絲的彈性限度和可延長(zhǎng)性，顯示纖維蛋白具有異乎尋常的可延長(zhǎng)性和彈性，其物理性能遠(yuǎn)強(qiáng)于蜘蛛絲，這一結(jié)果刊登在2006年8月的“科學(xué)”雜志上。

纖維蛋白膠材料的應(yīng)用目前還主要集中在臨床止血方面，在其他方面的應(yīng)用還有極大擴(kuò)展空間，尤其是組織工程支架方面。纖維蛋白可以促進(jìn)成纖維細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞分泌細(xì)胞外基質(zhì)；可以與眾多的細(xì)胞基質(zhì)(如纖維連接蛋白)，生長(zhǎng)因子(如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子，血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子等)結(jié)合，使其成為一種“智能生物材料”，作為一種創(chuàng)傷愈合和組織修復(fù)的起始蛋白。近年來(lái)逐漸引起人們?cè)絹?lái)越多的重視。纖維蛋白膠體的機(jī)械強(qiáng)度，伸展性、降解速度等物理特性可以通過(guò)添加凝血酶、XIII因子、鈣離子、纖溶活性物質(zhì)及其它輔料加以調(diào)節(jié)；另外，纖維蛋白膠(無(wú)論是人血來(lái)源還是動(dòng)物血來(lái)源)在外科臨床的廣泛應(yīng)用，證明該材料與人體組織相容性極好，不僅具有豐富的原料來(lái)源，宿主對(duì)移植物不產(chǎn)生免疫反應(yīng)，安全可靠。所以纖維蛋白膠的應(yīng)用還有待挖掘。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種方法簡(jiǎn)單可靠、可隨意變換結(jié)構(gòu)、應(yīng)用性強(qiáng)的用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的方法。

本發(fā)明的目的可以通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)：一種用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：(1)分別配置A1和B1溶液，(2)將A1和B1溶液等量快速混勻并倒入模具，(3)冷凍干燥，(4)伽馬射線照射滅菌；所述的A1溶液包括重量比為3～9∶1∶0.05～0.2∶15～25的纖維蛋白原，羧甲基纖維素，氨肽酶和甘油；所述的B1溶液為凝血酶1～5IU/ml，氯化鈣2～8mg/ml。

所述的A1溶液包括重量比為6∶1∶0.1∶18的纖維蛋白原，羧甲基纖維素，氨肽酶和甘油；所述的B1溶液為凝血酶2IU/ml，氯化鈣4.4mg/ml。

所述的A1和B1溶液在1～3分鐘內(nèi)混勻并倒入模具，并在1～3分鐘后從模具中取出。

所述的A1和B1溶液在2分鐘內(nèi)混勻并倒入模具，并在2分鐘后從模具中取出。

所述的冷凍干燥使材料的水份在1％以下。

所述的冷凍干燥使材料的水份為0.5～1％。

所述的伽馬射線照射滅菌為20～30KGY劑量的伽馬射線照射24～72小時(shí)。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明采用的工藝簡(jiǎn)單有效，只要提供適合的模具均能制作出以纖維蛋白為原料的支架，利于纖維蛋白膠的應(yīng)用，纖維蛋白原的濃度具有調(diào)整空間，可以制作出不同性質(zhì)的纖維蛋白支架，采用凍干后射線滅菌技術(shù)，可以保證纖維蛋白不被破壞，這點(diǎn)是制作組織工程支架的基礎(chǔ)。

附圖說(shuō)明

圖1為管形支架的模具示意圖；

圖2為凍干曲線圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。

實(shí)施例1

配置溶液：

一，纖維蛋白原溶液10ml備用(A1)，其中纖維蛋白原30mg/ml、羧甲基纖維素CMC5mg/ml、氨肽酶APN?0.5mg/ml、甘油90mg/每份。二，準(zhǔn)備催化劑溶液(B1)10ml，B1溶液中凝血酶2IU/ml，氯化鈣4.4mg/ml備用。

制備凝膠管：

如圖1所示，把A1溶液和B1溶液混勻攪拌后，迅速注入塞好皮塞3的玻璃套1和玻璃桿2套件。

凍干：小心取下凝膠管放入準(zhǔn)備好的平皿中，凍干，凍干曲線如圖2所示。

滅菌：采用3層塑膠袋將凍干材料密封，在20-30KGY劑量下輻照滅菌24小時(shí)。

實(shí)施例2

一種用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的方法，該方法包括以下步驟：(1)分別配置A1和B1溶液，(2)將A1和B1溶液等量在1分鐘內(nèi)混勻并倒入模具，并在1分鐘后從模具中取出，(3)冷凍干燥，使材料的水份為0.5％，(4)采用20KGY劑量的伽馬射線照射72小時(shí)滅菌；所述的A1溶液包括重量比為3∶1∶0.05∶15的纖維蛋白原，羧甲基纖維素，氨肽酶和甘油；所述的B1溶液為凝血酶1IU/ml，氯化鈣2mg/ml。

實(shí)施例3

一種用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的方法，該方法包括以下步驟：(1)分別配置A1和B1溶液，(2)將A1和B1溶液等量在3分鐘內(nèi)混勻并倒入模具，并在3分鐘后從模具中取出，(3)冷凍干燥，使材料的水份為1％，(4)采用20KGY劑量的伽馬射線照射36小時(shí)滅菌；所述的A1溶液包括重量比為9∶1∶0.2∶25的纖維蛋白原，羧甲基纖維素，氨肽酶和甘油；所述的B1溶液為凝血酶5IU/ml，氯化鈣8mg/ml。