[發(fā)明專利]一種腫瘤組織全抗原的制備方法和用途有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 200810201438.0 | 申請(qǐng)日: | 2008-10-21 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN101724010A | 公開(kāi)(公告)日: | 2010-06-09 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 朱學(xué)軍;范振芳;李曉惠;孫雪梅 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 江蘇省中醫(yī)院 |
| 主分類號(hào): | C07K1/14 | 分類號(hào): | C07K1/14;C07K14/47;A61K39/00;A61P35/00 |
| 代理公司: | 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100 | 代理人: | 徐迅;張睿 |
| 地址: | 210029 江蘇省南*** | 國(guó)省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 腫瘤 組織 抗原 制備 方法 用途 | ||
1.一種腫瘤組織全抗原的制備方法,其特征在于,所述的方法包括步驟:
(1)將腫瘤活檢組織的4-10%甲醛固定的石蠟包埋樣本和二甲苯混合,使石 蠟溶解,得到含有腫瘤組織的溶液;
(2)將含有腫瘤組織的溶液離心、得到沉淀1;
(3)將沉淀1和pH小于7的碳酸鈉水溶液混合0.5-12小時(shí),離心除去液 體得到沉淀2;
(4)將沉淀2置于水蒸汽中進(jìn)行滅活細(xì)胞漿中蛋白酶的處理10-30分鐘, 得到滅活了細(xì)胞漿中蛋白酶的腫瘤組織;
(5)將步驟(4)得到的腫瘤組織進(jìn)行勻漿處理,得到乳糜狀液體;和
(6)將乳糜狀液體和水溶液混合得到腫瘤組織全抗原;所述水溶液包括生理 鹽水、RPMI-1640、DMEM、和PBS;
所述腫瘤為淋巴瘤。
2.如權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟(3)中將沉淀1和pH 小于5的碳酸鈉水溶液混合0.5-12小時(shí)。
3.如權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟(4)中的水蒸汽溫度為 100-150℃。
4.一種腫瘤疫苗的制備方法,其特征在于,所述的方法包括步驟:
(a)將腫瘤活檢組織的4-10%甲醛固定的石蠟包埋樣本和二甲苯混合,使石 蠟溶解,得到含有腫瘤組織的溶液;
(b)將含有腫瘤組織的溶液離心、得到沉淀1,并除去二甲苯;
(c)將沉淀1和pH小于7的碳酸鈉水溶液混合0.5-12小時(shí),離心除去液 體得到沉淀2;
(d)將沉淀2置于水蒸汽中進(jìn)行滅活細(xì)胞漿中蛋白酶的處理10-30分鐘, 得到滅活了細(xì)胞漿中蛋白酶的腫瘤組織;
(e)將步驟(d)得到的腫瘤組織進(jìn)行勻漿處理,得到乳糜狀液體;
(f)將乳糜狀液體和水溶液混合得到腫瘤組織全抗原;所述水溶液包括生理 鹽水、RPMI-1640、DMEM、和PBS;和
(g)將樹(shù)突狀細(xì)胞和步驟(f)得到的腫瘤組織全抗原混合、培養(yǎng),得到腫 瘤疫苗;
所述腫瘤為淋巴瘤。
5.一種如權(quán)利要求1-3任一所述的制備方法得到的腫瘤組織全抗原。
6.一種疫苗組合物,其特征在于,所述的組合物包括如權(quán)利要求5所述的腫 瘤組織全抗原和樹(shù)突狀細(xì)胞。
7.一種如權(quán)利要求4所述的制備方法得到的腫瘤疫苗。
8.如權(quán)利要求5所述的腫瘤組織全抗原的用途,其特征在于,用作或被用于 制備腫瘤疫苗。
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