[發(fā)明專利]一種對羥基磷灰石進(jìn)行熒光標(biāo)記的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810162190.1
• 申請日: 2008-11-18
• 公開（公告）號: CN101419140A
• 公開（公告）日: 2009-04-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蔡玉榮;姚菊明;李恭楚;王秀華
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江理工大學(xué)
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N21/64;A61B5/00
• 代理公司: 杭州求是專利事務(wù)所有限公司
• 代理人: 林懷禹

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種對羥基磷灰石進(jìn)行熒光標(biāo)記的方法。

背景技術(shù)

自然界中，脊椎動物硬組織的主要生物礦物相是羥基磷灰石。研究發(fā)現(xiàn)，人工合成的羥基磷灰石具有與礦物相羥基磷灰石相同的成分、結(jié)構(gòu)和優(yōu)秀的生物相容性，因此被認(rèn)為是最理想的骨組織修復(fù)替代材料之一，在臨床上已被廣泛用于骨組織缺失和缺損的修復(fù)和替代。

近年來，隨著分析檢測方法和技術(shù)的飛速發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)構(gòu)成人體硬組織的羥基磷灰石顆粒的基本構(gòu)成單元都保持在納米尺度—有序的羥基磷灰石顆粒鑲嵌在膠原蛋白中，賦予了骨組織優(yōu)秀的生物學(xué)和力學(xué)性能“Gao?H.，Ji?B.，Jager?I.L.，Arzt?E.，F(xiàn)ratz?P.，PNAS，2003，100，5597；Curry?J.D.，Proc.R.Soc.Lond.B，1997，196，443”。生物礦化及仿生材料研究使得人們將目標(biāo)轉(zhuǎn)向了納米羥基磷灰石。目前認(rèn)為人體內(nèi)鈣化過程是在正確時間、正確地點(diǎn)，生成和維持正確量和正確結(jié)構(gòu)的礦化產(chǎn)物“王夔，化學(xué)通報，2003，15，428；楊曉達(dá)，張?zhí)焖{(lán)，王夔，化學(xué)進(jìn)展，2004，16，836”，在此過程中，細(xì)胞和有機(jī)基質(zhì)起到了重要的調(diào)控作用，但是其調(diào)控機(jī)理卻知之甚少。此外，作為一種新型的生物醫(yī)用材料，人們更多關(guān)注的是納米羥基磷灰石的生物相容性。目前比較一致的結(jié)論是納米羥基磷灰石能夠抑制腫瘤細(xì)胞和癌細(xì)胞的增殖和分化“Fu?Q，Zhou?N，HuangW，Wang?D，Zhang?L，Li?H.，J?Biomed.Mater.Res.(A)2005，74A?156；Wang?Y.，Yan?Y.H.，Li?Sh.P.，J?Wuhan?Univ.Tech.(mater.Scien.Edition)2005，20，184”，但對于普通細(xì)胞的影響則具有多樣性。相關(guān)的研究工作還有很多“Thomas?J.W.，Celaletdin?E.，Robert?H.D.，Rochard?W.S.，Biomaterials?2000，21，1803；Sun?J.，Lin?F.，Hung?T.，Tsuang?Y.，Chang?W.，Liu?H.，J.Biomed.Mater.Res.1999，311；Welzel?T.，Radtke?I.，Meyer-Zaika?W.，Heumannb?R.，Epple?M.J?Mater.Chem.2004，14，2213.”。磷酸鈣這種特殊的細(xì)胞生物相容性以及近來在用作非病毒基因/藥物載體以及齲齒修復(fù)和牙小管填充等方面表現(xiàn)出來的潛能使得人們對其在生物醫(yī)學(xué)方面的應(yīng)用寄予厚望。但是關(guān)于磷酸鈣與細(xì)胞作用的機(jī)理研究卻剛剛起步，很多疑問還亟待回答，例如磷酸鈣是在哪個位置上對細(xì)胞產(chǎn)生影響，細(xì)胞膜上還是細(xì)胞內(nèi)？它的哪些特征是影響細(xì)胞的關(guān)鍵因素？它通過哪些途徑實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞的生物學(xué)行為的影響？是否可以通過人為改變磷酸鈣的物化性能來調(diào)控細(xì)胞的行為？這些問題的解決對于我們了解生物礦物礦化機(jī)理和設(shè)計(jì)開發(fā)新型醫(yī)用材料以及制定安全性評價標(biāo)準(zhǔn)都有著深遠(yuǎn)且現(xiàn)實(shí)的意義。

進(jìn)行納米羥基磷灰石的生物相容性、礦化機(jī)理以及與細(xì)胞相互作用的研究時，我們首先遇到的一個問題是如何對該種材料進(jìn)行示蹤。解決這個問題最有效的辦法是對該材料進(jìn)行生物標(biāo)記。例如，將近紅外熒光量子點(diǎn)與羥基磷灰石復(fù)合“儲茂泉，金鑫，發(fā)明專利，近紅外熒光量子點(diǎn)標(biāo)記的羥基磷灰石及其制備方法和應(yīng)用。公開號：CN1693410A”，或者將鋱、銪等“DoatA.，F(xiàn)anjul?M.，PellieF.，Hollande?E.，Lebugle?A.，Biomaterials?2003，24，3365；Riwotzki?K.，Meyssamy?H.，Schnablegger?H.Angew?Chem?lnt?Ed.2001，40，573.”稀土離子摻雜到羥基磷灰石中，使其可發(fā)出熒光等，但這些材料的制備方法通常比較復(fù)雜，而且量子點(diǎn)和稀土元素的生物相容性還有待于考證。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服背景技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明的目的在于提供一種對羥基磷灰石進(jìn)行熒光標(biāo)記的方法，所得材料具有很好的生物相容性，穩(wěn)定的光學(xué)性質(zhì)，較窄的熒光激發(fā)波長范圍，適用于需要對羥基磷灰石進(jìn)行示蹤的環(huán)境中，尤其適用于羥基磷灰石和細(xì)胞間界面及作用機(jī)理的研究。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：