[發明專利]保持內源性促紅細胞生成素組織保護活性的長效促紅細胞生成素

無效

• 申請號: 200810149087.3
• 申請日: 2003-09-09
• 公開（公告）號: CN101371920A
• 公開（公告）日: 2009-02-25
• 發明（設計）人: A·切拉米;J·斯馬特;M·布賴恩斯;C·切拉米
• 申請（專利權）人: 沃倫藥品公司;肯尼思.S.沃倫研究院
• 主分類號: A61K38/19
• 分類號: A61K38/19;A61P7/00;A61P7/06;A61P13/12;A61P31/18
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 黃可峻

本申請是申請日為2003年9月9日的發明創造名稱為“保持內源性促紅細 胞生成素組織保護活性的長效促紅細胞生成素”的中國專利申請(國家申請號 為No.03824915.4，國際申請號為PCT/US2003/028073)的分案申請。

相關申請的參考

本申請要求2002年9月9日申請的美國臨時專利申請號60/409,020的優先 權，其內容在此引入作為參考。

技術領域

本發明涉及經修飾的能較好保持組織保護能力的長效促紅細胞生成素。特 別的，本發明涉及經化學修飾的長效促紅細胞生成素，所述化學修飾延長了其 在血清中的半衰期但還保持了天然蛋白在體內的組織保護功能。本發明還涉及 使用本發明所述長效促紅細胞生成素來治療貧血及其相關疾病。最后，本發明 涉及一種分析促紅細胞生成素是否具有組織保護能力的檢測方法。

背景技術

自然生成的或內源性的促紅細胞生成素(EPO)是一種主要由肝臟產生的 糖蛋白激素。內源性的EPO包含165個氨基酸，分子量(人類的)為大約30,000 大約到34,000道爾頓。EPO中的糖基，其由3個N-連接和1個O-連接的寡糖 鏈構成，它占了整個蛋白質分子量的大約40％。N-連接的寡糖鏈結合在24，38 和83位的天冬酰胺的氨基氮上，而O-連接的寡糖鏈結合在126位上的絲氨酸殘 基的氧原子上。EPO可能存在3種形式：α、β和脫唾液酸形式(Asialo)。α和 β形式具有相同的效力，生物活性，和分子量，但在糖類的組成上略有不同， 而脫唾液酸形式是除去了末端唾液酸(糖類)的α或β形式。

直到最近，內源性的EPO的主要功能是和其它生長因子一同刺激響應性骨 髓紅細胞前體細胞的增殖和成熟，以及保持個體的血細胞比容(在含有紅細胞 的全血中所占的百分率)。紅細胞的產生過程稱為紅細胞生成，它是一種被精確 調控的生理機制，在不妨礙循環的情況下優化紅細胞的數量使其滿足組織氧化 的需要。例如，當紅細胞輸送的氧減少時，EPO通過刺激骨髓中前體細胞吞轉 運化為成熟的紅細胞增加紅細胞的產生，產生的紅細胞隨即進入循環體系中。 當循環系統中的紅細胞的數量超過正常組織循環需要時，循環體系中的EPO就 減少。因此，當機體處于健康狀態時，血漿中EPO的濃度是非常低，僅足以刺 激替代由于老化而正常損失的紅細胞。血漿EPO的正常范圍是從0.01單位/ml 到0.03單位/ml。

假定個體中大多數的EPO是由腎產生的，腎功能的損失，例如慢性腎衰竭 (CRE)，會導致EPO數量的減少并且常常會導致貧血。同樣，貧血可能由其 它的慢性疾病，例如癌癥，或與這些疾病相關的治療，如化療所引起。因此， 已經證明，給紅細胞減少的個體施用重組的EPO(后面將詳細敘述到)能夠有 效的恢復血細胞比容的水平，所述重組的EPO與內源性EPO有基本上同樣的 生物活性。

除了其在慢性癥狀下保持血細胞比容水平中的作用外，重組EPO已經被用 于在選擇性或預定的手術之前增加紅細胞水平，從而減少或取消輸血的需要。 例如，施用重組EPO可以解除病人對通過輸血而感染病毒或病原的顧慮，或解 決宗教上限制輸血的問題。

進一步的，近來的一些證據表明，EPO作為細胞因子超家族的一員，具有 其它重要的治療屬性，這通過其與EPO受體(EPO-R)的相互作用來介導。例 如，EPO及其受體在緩減組織損傷中起著重要的作用，因為EPO和其受體相互 作用提供了改變缺氧細胞微環境的補償性應答，以及調控由于代謝壓力產生的 程序性細胞死亡。事實上，患有慢性腎衰竭和/或癌癥的病人使用EPO治療后， 一般會提高康復的感覺或智力的敏銳性，這樣的效果此前被歸功于病人血細胞 比容的增加。但近來，如在國際申請號WO/02053580和美國專利公開號 2002/0086818和2003/0072737中所述的，這些改進被歸功于EPO的組織保護和 增強的活性。

最近的研究同樣表明，全身性施用的EPO可以通過血腦屏障，因為形成血 腦屏障的毛細管也表達EPO受體。因此，這提供了從外周循環到腦部的受體介 導的胞吞作用的解剖基礎。