[發(fā)明專利]快速診斷日本血吸蟲病的膠體碳試紙條

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810143399.3
• 申請日: 2008-10-23
• 公開（公告）號: CN101393216A
• 公開（公告）日: 2009-03-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 車宏莉;汪世平;陳秀春
• 申請（專利權(quán)）人: 車宏莉;汪世平;陳秀春
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及寄生蟲病診斷領(lǐng)域，具體涉及快速診斷日本血吸蟲病的膠體碳層析試紙條的 建立。

背景資料：

血吸蟲病是一種嚴(yán)重危害人類身體健康和生命安全、阻礙疫區(qū)經(jīng)濟(jì)發(fā)展和社會進(jìn)步的人 獸共患病。全世界74個國家，6億人受感染威脅，2億人被感染，其中1.2億人出現(xiàn)癥狀，2000 萬人被嚴(yán)重感染。血吸蟲病病情的控制至今仍然是急待解決的一個嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。迄 今，在我國湖南、湖北、安徽、江西、江蘇、云南、四川7個省市流行仍較嚴(yán)重。血吸蟲病快 速診斷的研究對于傳染源的監(jiān)測、疫情的控制將起到積極作用。因此，研究簡便快速、準(zhǔn)確 靈敏、能診斷多種動物，并能對感染程度進(jìn)行定量或半定量檢測的新型診斷技術(shù)和方法，已 成為當(dāng)前血吸蟲病診斷迫切需要解決的問題。

快速診斷試紙條(dipstick)是20世紀(jì)90年代以來發(fā)展起來的一項(xiàng)新型體外診斷技術(shù)，因其 操作簡便、快速，更適用于門診使用和現(xiàn)場普查及輕度流行區(qū)的篩查，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域特別 是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中得到了廣泛應(yīng)用。在目前的快速診斷試紙條中，應(yīng)用標(biāo)記物一般為膠體金和膠 體染料，標(biāo)記的蛋白有抗原、葡萄球菌蛋白A(SPA)、二抗等，皆能達(dá)到一定的敏感性和特 異性，但一般只針對一種生物進(jìn)行檢測，且無法定量或者半定量檢測血吸蟲病的感染程度， 不能滿足日本血吸蟲病診斷的需要。

朱蔭昌(朱蔭昌，何偉，華萬全，等.血吸蟲病快速診斷——膠體染料試紙條法的研究 [J].中國血吸蟲病防治雜志，2000，12(1):18-20.)用膠體染料標(biāo)記日本血吸蟲可溶性蟲卵抗原 (SEA)，再用羊抗人IgG包被硝酸纖維素膜(NC膜)捕獲標(biāo)記抗原與抗體的復(fù)合物；曾小軍(曾 小軍，陳紅根，袁建華.快速膠體金免疫層析法的建立及其對血吸蟲病的診斷效果[J].中國血 吸蟲病防治雜志，2005，17(1):24-27.)用膠體金標(biāo)記羊抗人多克隆抗體，以此檢測患者血清中 的抗血吸蟲抗體。但標(biāo)記蛋白和檢測線捕獲蛋白用相應(yīng)的抗體只能應(yīng)用于某種動物的檢測， 上述方法只能完成人的血吸蟲病診斷，不能對其它動物進(jìn)行診斷，且不能進(jìn)行定量或半定量 檢測。

雷家慧(應(yīng)用膠體金SEA-Dipstick法檢測日本血吸蟲病血清抗體的研究[J].中國人獸共 患病雜志，2001，17(2):22-24.)和喻鑫玲(喻鑫玲，何永康，楊瑞清.膠體金SPA雙聯(lián)抗體檢測 試紙條法診斷日本血吸蟲病的初步研究[J].實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2006，13，(3):521-523)應(yīng)用金標(biāo)SPA 作為顯色劑，分別以SEA和SEA、童蟲抗原(SSA)雙聯(lián)抗原包被NC膜檢測日本血吸蟲抗體。 何偉等(何偉，朱蔭昌，曹國群.膠體染料試紙條法檢測牛血吸蟲病的進(jìn)一步研究[J].中國血吸 蟲病防治雜志，2006，18，(4):270-274.)采用膠體染料標(biāo)記SEA，以葡萄球菌A蛋白(SPA)包被 NC膜作為捕捉蛋白，實(shí)現(xiàn)多種動物的血吸蟲病檢測。上述方法中應(yīng)用了能與人及多種哺乳動 物IgG的Fc段結(jié)合的SPA，可對多種動物的血吸蟲病進(jìn)行檢測。但SPA與IgG的結(jié)合不屬于抗 原抗體反應(yīng)，其結(jié)合能力主要決定于IgG的來源及其亞類。不同來源IgG與SPA親合力的順序 為豬>狗>人>猴>豚鼠>小鼠>牛。其對綿羊、大鼠來源IgG的親和力較差，與犢牛、馬、山羊 的IgG則不能結(jié)合，因而標(biāo)記SPA同樣存在其自身的局限性。同樣，仍無法做到血吸蟲病的定 量或半定量檢測。

據(jù)報道，雙抗原夾心法其敏感性和特異性比其他方法要高(彭運(yùn)潮，胡述光，劉增再，等. 免疫膠體金技術(shù)診斷日本血吸蟲病的研究進(jìn)展[J].動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2005，26(10):23-27.)。 金顏輝等(金顏輝，張長弓，方瑩，等.口蹄疫抗體免疫金標(biāo)快速檢測試紙法的建立[J].福建 畜牧獸醫(yī)，2004，26(1):4-5.)采用雙抗原夾心法建立了檢測口蹄疫O型抗體的免疫膠體金快 速檢測試紙條法，并與ELISA法進(jìn)行了比較，其符合率達(dá)100％。彭運(yùn)潮等(彭運(yùn)潮，劉金明，孫 安國，等.快速診斷家畜日本血吸蟲病免疫層析試紙條的研制與初步應(yīng)用[J].中國血吸蟲病 防治雜志，2006，18(3):197-200.)利用雙抗原夾心的原理建立了GICA法用于多種動物血吸蟲 病的檢測，其陽性率達(dá)91.6％，陰性符合率達(dá)87.5％，具有較高的靈感性和特異性。但在診斷 日本血吸蟲病的快速診斷試紙條中無論是應(yīng)用膠體金還是膠體染料作標(biāo)記物，都沒能完成血 吸蟲病的定量或半定量檢測。

發(fā)明內(nèi)容：