[發(fā)明專利]苔蘚表達(dá)促進(jìn)區(qū)域有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200810131111.0 | 申請日: | 2004-07-30 |
| 公開(公告)號: | CN101555479A | 公開(公告)日: | 2009-10-14 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | M·羅德里格斯-佛朗哥;W·約斯特;A·威斯;G·戈?duì)?/a> | 申請(專利權(quán))人: | 格里革新生物技術(shù)有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/29 | 分類號: | C12N15/29;C12N15/82;C12N5/10;C12P21/00;C07K14/415;C12Q1/68 |
| 代理公司: | 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所 | 代理人: | 羅菊華 |
| 地址: | 德國*** | 國省代碼: | 德國;DE |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 苔蘚 表達(dá) 促進(jìn) 區(qū)域 | ||
1.SEQ?ID?NO:24的序列所示的分離的核酸分子,其是野生型細(xì)胞核來源的苔蘚表達(dá)促進(jìn)區(qū)域。
2.權(quán)利要求1的分離的核酸分子,其特征在于它還包含苔蘚啟動子。
3.權(quán)利要求1的分離的核酸分子,其特征在于它還包含5′UTR區(qū)域和/或5′內(nèi)含子和/或3′UTR。
4.權(quán)利要求1的分離的核酸分子,其特征在于它還包含重組多肽產(chǎn)物的編碼區(qū),所述的編碼區(qū)在苔蘚表達(dá)促進(jìn)區(qū)域的控制下。
5.權(quán)利要求1的分離的核酸分子,其特征在于它還包含選擇標(biāo)記。
6.權(quán)利要求1的分離的核酸分子,其特征在于它還包含與將要用其轉(zhuǎn)化的物種的基因組序列同源的序列,以使在該物種中靶向整合。
7.在真核宿主細(xì)胞中表達(dá)重組多肽產(chǎn)物的方法,包括以下的步驟:
(1)提供重組DNA克隆載體,該載體包含根據(jù)權(quán)利要求1到6中任何一項(xiàng)的分離的核酸分子;
(2)轉(zhuǎn)化所述的真核宿主細(xì)胞,該細(xì)胞在天然情況下不含有在苔蘚表達(dá)促進(jìn)區(qū)域控制下的所述重組多肽產(chǎn)物的編碼區(qū)域;
(3)在適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng)轉(zhuǎn)化的真核宿主細(xì)胞;
(4)表達(dá)所述的重組多肽;以及
(5)分離表達(dá)的重組多肽。
8.權(quán)利要求7的方法,其特征在于所述的真核宿主細(xì)胞選自植物細(xì)胞。
9.權(quán)利要求7的方法,其特征在于所述的真核宿主細(xì)胞選自苔蘚細(xì)胞。
10.權(quán)利要求7的方法,其特征在于所述的真核宿主細(xì)胞選自小立碗蘚細(xì)胞。
11.權(quán)利要求7的方法,其中所述重組DNA克隆載體還包含所述重組多肽產(chǎn)物的編碼區(qū)域,所述編碼區(qū)域在所述宿主中在苔蘚表達(dá)促進(jìn)區(qū)域的控制下。
12.權(quán)利要求11的方法,其特征在于所述真核宿主細(xì)胞選自植物細(xì)胞。
13.權(quán)利要求11的方法,其特征在于所述真核宿主細(xì)胞選自苔蘚細(xì)胞。
14.權(quán)利要求11的方法,其特征在于所述真核宿主細(xì)胞選自小立碗蘚細(xì)胞。
15.權(quán)利要求7-14中任一項(xiàng)的方法,其特征在于所述的宿主細(xì)胞是原絲體苔蘚組織細(xì)胞。
16.權(quán)利要求7-14中任何一項(xiàng)的方法,其特征在于培養(yǎng)基不含有向其中添加的植物激素。
17.權(quán)利要求7到9、11到13中任何一項(xiàng)的方法,其特征在于細(xì)胞選自來自立碗蘚屬、葫蘆蘚屬、泥炭蘚屬、角齒蘚屬、地錢屬以及Sphaerocarpos的苔蘚細(xì)胞。
18.權(quán)利要求7到14中任何一項(xiàng)的方法,其特征在于宿主細(xì)胞瞬時表達(dá)所述的重組多肽產(chǎn)物。
19.權(quán)利要求1到6中任何一項(xiàng)的分離的核酸分子的用途,用于在工業(yè)上制備多肽。
20.權(quán)利要求1到6中任何一項(xiàng)的分離的核酸分子的用途,用于在工業(yè)上提供制備多肽的重組細(xì)胞。
21.權(quán)利要求1到6中任何一項(xiàng)的分離的核酸分子的用途,用于表達(dá)苔蘚多肽,所述苔蘚多肽的表達(dá)在天然情況下不由苔蘚表達(dá)促進(jìn)區(qū)域控制。
22.權(quán)利要求1到6中任何一項(xiàng)的分離的核酸分子的用途,用于提供表達(dá)苔蘚多肽的重組苔蘚細(xì)胞,所述苔蘚多肽的表達(dá)在天然情況下不由苔蘚表達(dá)促進(jìn)區(qū)域控制。
23.權(quán)利要求1到6中任何一項(xiàng)的分離的核酸分子的用途,用于篩選和確定表達(dá)促進(jìn)區(qū)域的共有序列。
24.權(quán)利要求1到6中任何一項(xiàng)的分離的核酸分子的用途,用于經(jīng)過翻譯后修飾的蛋白的重組表達(dá)。
25.權(quán)利要求1到6中任何一項(xiàng)的分離的核酸分子的用途,用于體外表達(dá)重組蛋白。
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