[發(fā)明專利]青春雙歧桿菌grx066及其制備方法、用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810123350.1
• 申請日: 2008-05-21
• 公開（公告）號: CN101328471A
• 公開（公告）日: 2008-12-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王琴;顧瑞霞;任遠(yuǎn)慶;邵虎;李軍
• 申請（專利權(quán)）人: 克拉瑪依市農(nóng)牧業(yè)科學(xué)技術(shù)研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12Q1/04;A23L1/30;A23C9/123;A23C9/12;A23G9/36;C12R1/01
• 代理公司: 揚州市錦江專利事務(wù)所
• 代理人: 江平

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及功能性乳制品生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域。

技術(shù)背景

乳酸菌的降血壓作用在于其能夠代謝產(chǎn)生蛋白酶，從而降解蛋白質(zhì)，產(chǎn)生ACE活性抑制肽。乳酸菌代謝產(chǎn)生的蛋白酶，包括肽鏈內(nèi)切酶以及氨基肽酶等，在這些酶系的作用下，限制性水解蛋白質(zhì)，產(chǎn)生分子大小以及作用各有差異的生物活性肽段，其中包括已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的具有抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(Angiotensin?Converting?Enzyme，ACE)活性的小肽。

發(fā)酵乳制品的降血壓作用的強(qiáng)弱與其所使用的乳酸菌的種類密切相關(guān)。從自然環(huán)境中篩選出適合生產(chǎn)降血壓發(fā)酵產(chǎn)品的乳酸菌具有重要的意義。我國自古就有“藥食同源”的說法，通過改善飲食狀況預(yù)防和治療疾病。源于牛乳中蛋白的降壓肽只對高血壓患者起降壓的作用，對正常血壓無降壓作用，這些肽又是利用酶解產(chǎn)生，安全性高。如將具有降壓作用的乳酸菌與降血壓肽結(jié)合開發(fā)成保健食品，長期服用可預(yù)防、緩解和輔助治療高血壓，這種方式必將為人們所接受。隨著人們生活水平的提高，人們越來越重視食品的天然性和功能性，因此將降血壓肽和益生菌結(jié)合生產(chǎn)功能性酸乳，具有十分廣闊的前景。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一目的是提供一種具有較強(qiáng)降血壓作用的青春雙歧桿菌。

本發(fā)明青春雙歧桿菌grx066，于2008年3月17日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址：北京市朝陽區(qū)大屯路，中國科學(xué)院微生物研究所。保藏編號：CGMCC?NO.2406，分類命名：青春雙歧桿菌(Bifidobacterium?adolescentis)。

經(jīng)試驗驗證，本發(fā)明所述青春雙歧桿菌grx066對低pH和高膽汁酸鹽具有抗性，表明本發(fā)明菌株具有耐受人消化道不良環(huán)境能力。

利用本發(fā)明菌株發(fā)酵牛乳，可以大量產(chǎn)生具有抑制血壓升高的活性物質(zhì)-血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制肽(Angiotensin?I-Converting?Enzyme?Peptide，ACEIP)。即利用熱處理(如95℃/5分鐘)冷卻到37℃后的牛乳接種2％～5％的本發(fā)明菌株，經(jīng)37℃培養(yǎng)16～18小時，此時發(fā)酵乳對ACE的抑制活性最大，表明本發(fā)明菌株、代謝產(chǎn)物及分解產(chǎn)物具有很強(qiáng)的抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的活性。

本發(fā)明的第二目的是發(fā)明青春雙歧桿菌grx066的制備方法。

包括以下步驟：

(1)通過培養(yǎng)基從傳統(tǒng)乳制品中分離獲得乳酸菌；

(2)利用酶比色法篩選出其發(fā)酵乳抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(AngiotensinI-Converting?Enzyme，ACE)活性比較強(qiáng)的菌株；

通過細(xì)菌形態(tài)學(xué)、生理學(xué)和培養(yǎng)特征，并通過法國梅埃里公司API系列鑒定試劑條和16SrRNA進(jìn)行分析鑒定，證實了通過以上方法制備的菌株是具有較強(qiáng)抑制血壓升高的青春雙歧桿菌菌株grx066。

本發(fā)明的第三目的是發(fā)明青春雙歧桿菌grx066的用途。

青春雙歧桿菌grx066可用于生產(chǎn)具有降血壓功能的乳制品。

將青春雙歧桿菌grx066與液態(tài)乳共發(fā)酵后用于制備酸奶或乳酸菌飲料或冰淇淋。

也可將青春雙歧桿菌grx066培養(yǎng)物經(jīng)冷凍干燥用于生產(chǎn)具有降血壓功能的食品。

由于乳制品中含有青春雙歧桿菌grx066而成為具有輔助治療和穩(wěn)定高血壓癥狀作用的一種食療性產(chǎn)品。

附圖說明

圖1為本發(fā)明所述青春雙歧桿菌grx066經(jīng)平板培養(yǎng)的菌落形態(tài)觀察圖。

圖2為本發(fā)明所述青春雙歧桿菌grx066經(jīng)革蘭氏染色的普通光學(xué)顯微結(jié)構(gòu)照。

具體實施方式

一、樣品來源

本例菌株來源于我國新疆民族傳統(tǒng)乳制品-酸馬奶。酸馬奶俗稱馬奶酒，是我國蒙古族和哈薩克族等少數(shù)民族地區(qū)的傳統(tǒng)乳制品，是一種珍貴的發(fā)酵乳產(chǎn)品。

二、從酸馬奶中分離出乳酸菌

將新疆民族傳統(tǒng)乳制品酸馬奶樣品接種到MRS培養(yǎng)物中于37℃培養(yǎng)24小時。將該培養(yǎng)物涂布在MRS瓊脂平板上，然后在37℃厭氧培養(yǎng)3天。培養(yǎng)后，收集在瓊脂培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落，并進(jìn)一步純化，用其檢測細(xì)菌特征，如下文所述的革蘭氏染色模式(如圖2)、糖酵解能力等。

將分離獲得的菌株用含11％脫脂乳的肉湯培養(yǎng)物培養(yǎng)后加入保護(hù)劑凍干，保存在-18℃，然后用于各種檢測細(xì)菌特征的試驗。

三、體外篩選具有抑制能力強(qiáng)的菌株

本發(fā)明主要通過比較其不同分離菌株發(fā)酵乳的ACE抑制活性，從而獲得抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶能力強(qiáng)的益生菌。