[發明專利]一種棘胸蛙微衛星DNA標記及其用途

無效

• 申請號: 200810121952.3
• 申請日: 2008-10-23
• 公開（公告）號: CN101392253A
• 公開（公告）日: 2009-03-25
• 發明（設計）人: 鄭榮泉;葉容暉;楊光;成斌
• 申請（專利權）人: 浙江師范大學
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C12N15/11;C12Q1/68;C40B50/06;C40B40/08
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司
• 代理人: 金 祺

技術領域

本發明涉及分子標記技術，具體涉及一種棘胸蛙的DNA分子遺傳標記及其用途。

背景技術

微衛星(又稱為簡單重復序列，SSR)是由1-6個核苷酸組成的短序列串聯重復多次 而組成的一段DNA。由于微衛星側翼序列相對保守，根據其側翼序列設計引物，可用PCR 擴增出微衛星位點的序列。由于微衛星中重復單元的重復次數不同，因而擴增出的微衛星 序列的長度呈現多態性。微衛星序列廣泛存在于真核生物基因組中，而且隨機分布，具有 高度多態性，選擇上中性，共顯性等特點，是十分有效的遺傳標記，被廣泛應用于遺傳圖 譜構建、基因定位、遺傳關系分析、品種鑒定等領域。如用微衛星標記分析苧麻品種的親 緣關系(Zhou等，2005，Progress?in?Natural?Science，15：137-142)、用微衛星DNA標記 進行豬品種分類的專利申請“適于豬品種分類的豬微衛星DNA標記”(公開號CN 1370834A)、用微衛星DNA標記進行家蠶分子連鎖遺傳分析的專利申請“家蠶的SSR標 記及其應用”(公開號CN?1970792A)。

棘胸蛙(Paa?spinosa?David)，屬兩棲綱、無尾目、蛙科。棘胸蛙個體大，肉質細嫩潔 白，味道鮮美，具有很高的營養價值和藥用價值，素有“百蛙之王”的美稱。由于人為捕 殺和自然環境的惡化，野生棘胸蛙資源遭到嚴重破壞，開展棘胸蛙人工養殖既有助于保護 野生資源，又能滿足市場需求?，F在，棘胸蛙是我國重要的養殖蛙類之一，但是由于其基 礎研究薄弱，要實現規模養殖還有許多亟待解決的問題，其中包括需要一套有效的分子標 記對其進行遺傳關系分析、種質資源調查、標記輔助育種等。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種棘胸蛙微衛星DNA標記，利用這些分子標記能 對棘胸蛙進行遺傳分析、種質資源調查和輔助育種。

為了解決上述技術問題，本發明提供一種棘胸蛙微衛星DNA標記，該微衛星DNA標 記的核苷酸序列分別為SEQ?ID?NO：1～SEQ?ID?NO：8這8種序列中的任意一種；所述SEQ ID?NO：1對應的微衛星編號為Psp16，SEQ?ID?NO：2對應的微衛星編號為Psp17，SEQ?ID NO：3對應的微衛星編號為Psp18，SEQ?ID?NO：4對應的微衛星編號為Psp19，SEQ?ID?NO： 5對應的微衛星編號為Psp20，SEQ?ID?NO：6對應的微衛星編號為Psp21，SEQ?ID?NO：7 對應的微衛星編號為Psp22，SEQ?ID?NO：8對應的微衛星編號為Psp23。

作為本發明的棘胸蛙微衛星DNA標記的改進：棘胸蛙微衛星DNA標記引物選自下列 引物對，其中的核苷酸序列為5′→3′，

Psp16??正向：GTATCATTTTGTGTTTTTT

???????反向：TTTGAATTGTCTTTTGTC

Psp17??正向：AGTTATGTGGCAGAGAAAC

???????反向：AAGAGCACAGGAGAGTCA

Psp18??正向：GCTTATTGTTGGGCTTCA

???????反向：TCACTGGCATCAGGTCTG

Psp19??正向：TCACAATCGACGTAATGG

???????反向：ACACACAGAGGGTCACACT

Psp20??正向：TTGGCTCATCAACTACCC

???????反向：AGTCACATAACATACCCCCT

Psp21??正向：ACTCTCGCCTCAATCC

???????反向：ATGTAGCTCAGCGTACTG

Psp22??正向：ATCTTAGGTGCAGCAACTT

???????反向：TCCCTTGTGTAGTGTTCAGT

Psp23??正向：TCGACGATTGCCAGAGACC

???????反向：GCTGGTGGGGAAACTACATTAT。

本發明還同時提供了該類棘胸蛙微衛星DNA標記的用途：用于對棘胸蛙進行遺傳分 析、種質資源調查或輔助育種。