[發明專利]豬繁殖與呼吸綜合征病毒強毒株、其弱毒疫苗株及其應用

有效

• 申請號: 200810097546.8
• 申請日: 2008-05-13
• 公開（公告）號: CN101280292A
• 公開（公告）日: 2008-10-08
• 發明（設計）人: 童光志;田志軍;周艷君;安同慶;彭金美
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;C12N7/08;A61K39/12;A61P31/14;C12Q1/70
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司
• 代理人: 孫皓晨;費碧華

技術領域

本發明涉及一株病毒強毒株以及由其傳代致弱的弱毒疫苗株，尤其涉及一株豬繁殖與呼吸綜合征病毒強毒株HuN4、由該強毒株HuN4傳代致弱的弱毒疫苗株HuN4-F112，本發明還涉及弱毒疫苗株在預防或治療高致病性豬藍耳病中的應用，該屬于生物醫藥領域。

背景技術

2006年春夏之際，我國南方部分地區發生以發熱、皮膚發紅、高發病率和高死亡率為主要特征的豬“高熱病”，隨后逐漸蔓延至全國大部分省份。經大量的病原分離鑒定、動物試驗證實，豬“高熱病”的主要病原為高致病性豬藍耳病病毒變異株，該病也被稱為“高致病性豬藍耳病”。直至今日，疫病形勢依然嚴峻，生豬飼養是我國廣大農民賴以增收的主要產業，如何防控該病已經成為目前最為關心的問題。

高致病性豬藍耳病(高致病性豬繁殖與呼吸綜合征)有以下特點：高熱，體溫可達41℃以上，并伴有高發病率和死亡率，通常情況下發病率高達50％以上，死亡率約40％～90％。其中，感染豬、康復豬及其污染物是本病的主要傳染源。不同日齡、不同品種的豬均可發生。本病主要通過呼吸道或通過公豬的精液經生殖道在同豬群間進行水平傳播，也可以進行母子間的垂直傳播。病毒可通過鼻、眼分泌物、胎兒及子宮甚至公豬的精液排出，感染健康豬只。此外，風媒傳播在本病流行中具有重要的意義，通過氣源性感染可以使本病在3km以內的豬群中傳播，傳播速度極快。

高致病性豬藍耳病有以下癥狀：病豬精神沉郁，采食量下降，發病嚴重者食欲廢絕，嗜睡，嘔吐，拉稀，流鼻涕，呼吸困難。病死豬耳尖多因發紺而呈藍紫色，體表常有出血尤其皮表、肢體遠端出血；有的臀部、腹部及后肢皮膚出現紐扣狀潰瘍或結痂。起初個別豬只發燒，隨后迅速傳播至大部分豬，體溫升高至40～41.5℃，出現個別豬突然死亡。病豬呼吸困難，喜伏臥，部分豬出現嚴重的腹式呼吸，有的表現喘氣或呈不規則呼吸。部分患豬眼分泌物增多，出現結膜炎癥狀。部分豬伴有腹瀉。發病豬群死亡率很高，有的豬場高達50％以上，其中以保育肥豬最為嚴重。部分母豬在懷孕后期(100～110天)出現流產、死胎。病程稍長的病豬全身蒼白，出現貧血現象，被毛粗亂，部分病豬后肢無力，個別病豬瀕死前不能立，最后全身抽搐而死。

剖檢病理變化：病豬的淋巴結一般均有腫大、出血，其中以腹股溝淋巴結、頜下淋巴結和腸系膜淋巴結出血嚴重，有的腹股溝淋巴結只是腫大，無出血現象；肺有不同程度的實變；喉頭氣管基本正常，個別喉頭有黏液；大部分豬心內膜和心外膜有出血點；脾臟基本正常，個別邊緣有壞死；肝臟基本正常；腎臟多數有條狀出血斑；胃基本正常，個別有胃底潰瘍和出血；小腸多數管壁透明，個別豬腸道卡他出血。

高致病性豬藍耳病的病原為豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PorcineReproductive?and?Respiratory?Syndrome?Virus，PRRSV)變異株。通過對全國各地分離的PRRSV變異株進行完整的ORF5和部分Nsp2基因序列比較分析發現，來自不同豬場的PRRSV高度同源，而且在Nsp2基因上都有兩個相同位點的缺失，Nsp2基因的第483位和533-561位氨基酸發生缺失。而與2005年以前的PRRSV的Nsp2同源性僅為69.8-86.2％。新分離毒株的GP5基因相互之間也是高度同源(98.5％-100.0％)，與以前的PRRSV毒株相比變異也比較大。

同其它病毒性疾病一樣，目前尚無有效的治療性藥物用于PRRS的治療，免疫接種是防制該病的最有效方法。目前商品化的PRRS疫苗主要是由經典株制備的弱毒苗和由變異株制備的滅活苗。經由經典株制備的弱毒苗免疫后，在變異株的攻擊下多數豬會發病、增重減慢，部分豬發生死亡；經由變異株制備的滅活苗免疫豬后，在變異株的攻擊下絕大多數豬會發病、死亡。由此可見目前的PRRS疫苗雖然種類繁多，但沒有任何一種疫苗可對豬體產生足夠的保護作用。面對依然十分嚴峻的疫情，開發新型高效的PRRS疫苗已是迫在眉睫。

發明內容

本發明目的之一是提供一株豬繁殖與呼吸綜合征病毒強毒株。

本發明目的之二是提供一株由該豬繁殖與呼吸綜合征病毒強毒株傳代致弱的弱毒疫苗株，用該弱毒疫苗株所制備的疫苗對于高致病性豬藍耳病具有良好的保護效力。

本發明目的之三是提供一種預防或治療高致病性豬藍耳病的疫苗組合物。

本發明的上述目的分別是通過以下技術方案來實現的：