[發明專利]珠體組、珠體組的制造方法和珠體組的使用方法

無效

• 申請號: 200810096190.6
• 申請日: 2008-05-09
• 公開（公告）號: CN101303348A
• 公開（公告）日: 2008-11-12
• 發明（設計）人: 岸井典之;市村真理;阿部友照;中川和博;安田章夫;鹽野真由美;大西通博;山本拓郎;武田實
• 申請（專利權）人: 索尼株式會社
• 主分類號: G01N33/50
• 分類號: G01N33/50;C12Q1/68;G01N33/68;G01N21/76
• 代理公司: 北京康信知識產權代理有限責任公司
• 代理人: 余剛;吳孟秋

相關申請的交叉引用

本發明包含于2007年5月10日和2007年6月27日向日本專 利局提交的日本專利申請JP?2007-125273和日本專利申請JP 2007-168866的主題，其全部內容結合于此作為參考。

技術領域

本發明涉及一種在生化分析技術中特別有用的新型技術。更具 體地，本發明涉及一種能夠通過新型方法進行各個珠體的識別的珠 體組、珠體組的制造技術和關于該珠體組的應用技術。

背景技術

在生化技術等領域中，在某些情況下可以使用通常稱為“珠體 (微珠)”的微粒載體。作為珠體最廣泛采用的生化應用，可列舉 的有使用硅石珠體或聚合物珠體作為用于液相色譜法的分離柱中 的填充材料。

通過使珠體的表面結合抗體、抗生物素蛋白等，還可以使其用 于從生物樣品中捕獲、分離、精制目標物質等。例如，將其上已預 先固定了對蛋白質中的特定氨基酸序列的抗體的珠體混合在細胞 提取液中以捕獲目標蛋白質(或其復合體)的方法已成為用于分析 蛋白質的相互作用的有用方法(ISOBE，Toshiaki和TAKAHASHI， Nobuhiro：“Extra?Issue-Experimental?Lecture?2?for?Postgenome?Age， Proteome?Analysis?Methods”，p.166-174，2000，Yodosha?Co.，Ltd.)。

還已知有使用“磁性珠體”的方法。可以舉出使用其上已固定 有針對微生物抗原的抗體的磁性珠體來通過抗原-抗體反應從樣品 中捕獲和檢測目標微生物的例子(日本專利公開第2006-017554和 2001-004631號等)。還已經提出了另一種方法，將磁性珠體與微通 道系統組合以進行細胞的分離(日本專利公開第2006-006166號)。

又已經提出了另一種方法。根據該方法，允許在珠體表面進行 物質間的相互作用(例如雜交)。然后，為了分析物質間的相互作 用存在與否，向相互作用的位置施加電場，從而使珠體根據保持在 珠體上的各物質電荷量(庫侖力)而遷移(日本專利公開第 2003-302373號)。

此外，分析技術已經建立了實際應用，其中，使用了可以通過 根據兩種熒光染料不同比例的組合區分從各種珠體發出的光的顏 色一種一種地區分這些不同種的珠體的珠體組(最多由多達100種 珠體組成)(“LUMINEX”系統(注冊商標)；訪問 http://hitachisoft.jp/dnasis/luminex/microbead/beads.html)。然而，因 為不同種珠體是根據發光強度的不同區分的，所以該方法需要精確 地檢測發光。

發明內容

如上所述，目前在生化領域對珠體的應用技術的開發仍在進行 中，并期待其應用在未來進一步擴展。

另一方面，對可以在各種生化分析技術的領域促成高速化、綜 合分析的實現、效率的提高、精度的提高等新型技術有突出的需求。 例如，主要的技術需求包括在DNA序列技術中的讀取時間的高速 化、以及在藥物篩選技術中工作效率的提高。近年來，已報道了不 編碼蛋白質的核糖核酸(RNA)存在并控制蛋白質的功能，并且已 提出某些DNA片段充當了風濕病發病的原因。因此，對用于細胞 中作為片段存在的DNA或RNA序列的綜合和高精度檢測中的技術 有突出的需求。

希望提供可以滿足上述技術需求的新型生化分析技術。更具體 地，本發明的主要需求是提供一種能夠顯著增加可一種一種地區分 的各種珠體的數量的珠體識別技術，以及利用珠體識別技術的應用 分析技術。

在本發明的一個實施例中，因此提供了一種由多個珠體子組組 成的珠體組，其中，每個子組中的珠體每個都設置有允許參與預定 的對應反應或相互作用的物質固定在其上的表面，并且，在所述珠 體組中的所述各個珠體分別設置有不同的物理要素，以便所述珠體 組中的所述各個珠體可以通過計算機分析在所述珠體組中的所述 各個珠體的拍攝圖像而被分成所述多個子組。珠體的外形、珠體核 心部分的外形、標識符等可以作為物理要素的例子。應注意，本文 廣泛使用的術語“反應或相互作用”表示了化學結合(包括物質間 的非共價結合、共價結合和氫鍵結合)和離解，并且例如，廣泛地 包括諸如作為核酸(核苷酸)之間的互補結合，以及大分子-大分子、 大分子-小分子和小分子-小分子的結合或離解的雜交的特定結合或 離解。