[發明專利]用作生物活性分子載體的刺梧桐膠復合多糖微球及其制備方法

有效

• 申請號: 200810093997.4
• 申請日: 2008-04-25
• 公開（公告）號: CN101565515A
• 公開（公告）日: 2009-10-28
• 發明（設計）人: 張繼;杜兆莉;魏鑠蘊;王云普;張生堂;許生軍;白志強;楊麗
• 申請（專利權）人: 西北師范大學
• 主分類號: C08L5/00
• 分類號: C08L5/00;C08L5/08;C08J3/12;C12N11/10
• 代理公司: 北京中恒高博知識產權代理有限公司
• 代理人: 高 松

技術領域

本發明涉及酶及其它活性分子載體的領域，尤其是刺梧桐膠復合多糖微球。

背景技術

刺梧桐膠復合多糖微球是以復合生物多糖為材料制備的內部多孔，表面有特殊功能基團的耐酸堿的高分子微球。

高分子微球的制備方法，國內外研究者十分重視。并被多種專利所公開，如：日本專利2554835申請了一種油水乳液微球的制備方法；日本專利1649922申請了交聯聚合物、聚合物微粒及其制備方法；法國專利10102303申請了二氧化硅微球，其制備及聚集的方法以及二氧化硅微球的可能應用；美國專利1226927申請了離子交聯聚磷腈微球的凝聚制備法；中國專利CN1485362、中國專利CN?1607033、中國專利CN1698900等申請了殼聚糖微球制備方法及應用；中國專利ZL200510105928.6申請了以生物多糖羅望子膠與殼聚糖、沙蒿膠與殼聚糖復合物為原料制備的一種耐酸堿微球；中國專利CN10107040申請了一種具有核殼結構的糖基化聚丙烯微球的制備方法及其應用；中國專利CN1275619、中國專利CN1234444等申請了卡拉膠與葡聚甘露聚糖或魔芋多糖復配的固定化細胞載體的制備及其應用；中國專利CN10104579申請了核殼型淀粉微球的合成方法；中國專利CN1314430、中國專利CN1293952等發明了聚丙烯酸或絲心蛋白等復配制備高分子微球的方法和用途；中國專利CN10109189申請了一種銀納米顆粒與聚合物微球載體的復合材料及其制備方法；中國專利CN10105861申請了一種交聯聚苯乙烯微球的制備方法。上述生物多糖微球機械性能較差，在酸堿性溶液中穩定性不太好，生產工序較復雜，成本較高。

國內外專利均未涉及以刺梧桐膠為原料的微球的制備方法及應用。

發明內容

本發明的目的在于提供一種表面具有功能基團，機械性能好，溶脹體積小，耐酸堿性優良，成本低的天然生物刺梧桐膠復合多糖微球及其制備方法。

本發明刺梧桐膠復合多糖微球的制備方法如下：

(1)取一定量的刺梧桐膠加入到質量分數為40％的氫氧化鈉水溶液中，氫氧化鈉水溶液與刺梧桐膠比為體積(ml)∶質量(g)＝10～12∶1，同時加入四硼酸鈉，刺梧桐膠與四硼酸鈉質量比為5～12∶1～3，在60℃水浴中恒溫22～26h，然后用濃度為90％冰乙酸中和多余的堿，用截留分子量為8000～10000的透析袋常溫下在流動的蒸餾水中透析48h除去多余的鹽分，在50℃、0.08MPa條件下真空干燥68～76h后得到脫乙酰的刺梧桐膠干粉，脫乙酰度為82％～88％；

(2)將脫乙酰的刺梧桐膠與殼聚糖混合，質量比為1～1.2∶1，在20℃～25℃、1000rpm/min轉速下加入到蒸餾水中，水溶液中含體積比為1.0％～1.6％的冰醋酸，得到質量濃度為2～2.4％(g/ml)刺梧桐膠與殼聚糖復合膠體溶液；

(3)在40℃水浴、400～600rpm/min的條件下，將2.0～3.0ml吐溫80和40～60ml復合膠體溶液先后加入到石油醚和液體石蠟混合溶液80～120ml中，石油醚和液體石蠟體積比為40～45∶40～35，乳化8～12min，得乳化液；

(4)在乳化液中加入質量濃度為45～55％的戊二醛水溶液1.5～2.5ml，溫度上升到55℃，在400～600rpm/min的轉速下反應0.5～1h，室溫下，靜止1～2min，傾去上層液體后，剩余部分依次用石油醚、無水乙醇兩種溶劑各浸泡15～30min，0.06MPa抽濾，得到分散的微球；

(5)室溫下，抽濾后分散的微球用1mol/L的鹽酸溶液浸泡24h，用蒸餾水洗滌微球若干次，在50℃，0.08MPa條件下真空干燥6～10h，制得具有-CHO和-COOH表面功能的刺梧桐膠復合多糖微球。

以上制備工藝是以脫乙酰的刺梧桐膠與殼聚糖復合物為原料，戊二醛為交聯劑，進行聚合反應而成。

將制得的刺梧桐膠復合多糖微球進行了如下物理、機械性能測試：利用掃描電鏡、紅外光譜、熱分析等表征刺梧桐膠復合多糖微球，在室溫下測定溶脹系數和機械強度，在不同pH值下測定其耐酸耐堿性。

1、掃描電鏡觀察證實，刺梧桐膠復合多糖微球體呈表面粗糙且多孔的蜂窩狀結構，微球形態均一，粒徑為0.6×10²～2.1×10²μm。