[發明專利]中和抗生素營養血液培養基無效
| 申請號: | 200810093446.8 | 申請日: | 2008-04-21 |
| 公開(公告)號: | CN101565734A | 公開(公告)日: | 2009-10-28 |
| 發明(設計)人: | 曲奕 | 申請(專利權)人: | 曲奕 |
| 主分類號: | C12Q1/04 | 分類號: | C12Q1/04 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 266033山東省青島市*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 中和 抗生素 營養 血液 培養基 | ||
技術領域
本發明涉及一種中和抗生素營養血液培養基,其主要成分是牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂粉、硫酸鎂、對氨苯甲酸、土溫-80、無菌脫纖維O型人血(或無菌脫纖維羊血或兔血)、小牛血清經一定的工藝制成。用以供一般標本和已使用過抗生素及磺胺藥的病人標本分離培養用。利用培養試驗鑒別細菌的種類,其關鍵在于準確、快速、簡便。而細菌接種分離培養好壞,會直接影響檢測結果。往往需要將樣本通過不同方法進行分離培養,來進行細菌種類的鑒別,這是目前微生物實驗室最常用的手段。由于目前培養條件的應用范圍所限,供一般標本的分離培養用的培養基沒有特效的,存在所分離培養基營養不足、培養時間長、易出現假陽性或假陰性等問題。隨著生物研究的進展,國內外對細菌鑒別的增菌培養基研究也在不斷的發展中。生物工作者一直希望能有一種能克服上述不足的分離培養的培養基----中和抗生素營養血液培養基。
背景技術
本發明的目的在于提供一種能克服已有鑒別培養基不足的中和抗生素營養血液培養基。與其它同類培養基相比具備下列特點:所需接種量小,少量細菌即可迅速繁殖,在通常室溫下或37℃培養5-6小時即可觀察結果;不易出現假陽性和假陰性;能破壞標本中存在的抑菌物質,使細菌生長不受抑制。
發明內容
本發明的要點在于選擇合適的組分,并進行合理混配,經加溫、溶解、混合、冷卻、分裝、高溫滅菌等工藝而成一種中和抗生素營養血液培養基。
本發明選擇的配方如下(組分及其重量百分比%):牛肉膏(0.3-0.5)、蛋白胨(1.0-1.5)、氯化鈉(0.4-0.6)、瓊脂粉(2.1-2.3)、土溫-80(0.3-0.5)、49.3%硫酸鎂6-8ml、0.5%對氨苯甲酸6-8ml、無菌脫纖維O型人血(或無菌脫纖維羊血或兔血)6-8ml、小牛血清6-8ml、蒸餾水加至100ml。
本培養基含有豐富的營養成分,如牛肉膏、蛋白胨、小牛血清、血液是培養基中的營養和支持成分,對觀察鏈球菌,葡萄球菌的溶血比較滿意;分離腦膜炎球菌及嗜血桿菌屬好。氯化鈉用于調整滲透壓;磷酸二氫鉀用于調節pH。。標本接種后即計算時間,在通常室溫下或37℃培養,培養12小時后,即用劃線法移種到選擇性培養基上以分離致病菌。加入血液時溫度必須適宜,否則不利于與瓊脂混勻及觀察溶血情況。
本發明產品的制備方法是:
1)、將牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂粉、硫酸鎂、對氨苯甲酸、土溫-80、蒸餾水置于三角燒瓶內,混合并使液體浸濕瓊脂粉;
2)、加熱溶解,趁熱矯正pH至7.4,以絨布過濾,分裝于試管或燒瓶內,后置于壓力蒸氣滅菌器內,以1.05kg30分鐘;
3)、取出后冷至50℃左右,以無菌手續加入無菌脫纖維O型人血(或無菌脫纖維羊血或兔血)和小牛血清,輕輕搖勻,傾注平板.凝固后,抽樣于37℃培養18~24小時,如無細菌生長,冷藏備用。
本發明具有以下優點:(1)所需接種量小,培養時間短,少量細菌即可迅速繁殖,在通常室溫下或37℃培養8-12小時即可觀察結果;(2)不易出現假陽性或假陰性;(3)能破壞病人標本中存在的抗生素及磺胺藥的抑菌作用。
具體實施方式
下面結合實施例對本發明作進一步的詳細說明:
按照下表所列數據(重量百分比%)及其所述步驟進行配置:
配方一:
牛肉膏?????????????????????????????????????0.3-0.5
蛋白胨?????????????????????????????????????1.0-1.5
氯化鈉?????????????????????????????????????0.4-0.6
瓊脂粉?????????????????????????????????????2.1-2.3
土溫-80????????????????????????????????????0.3-0.5
硫酸鎂(49.3%)?????????????????????????????6-8ml
對氨苯甲酸(0.5%)??????????????????????????6-8ml
無菌脫纖維O型人血(或無菌脫纖維羊血或兔血)??6-8ml
小牛血清???????????????????????????????????6-8ml
蒸餾水?????????????????????????????????????加至100ml
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