[發明專利]一種LMP－1重組腺相關病毒載體及其構建方法與應用

無效

• 申請號: 200810093226.5
• 申請日: 2008-04-23
• 公開（公告）號: CN101255442A
• 公開（公告）日: 2008-09-03
• 發明（設計）人: 劉勇;保羅·L·赫蒙納特
• 申請（專利權）人: 廣州博沃津生物技術有限公司
• 主分類號: C12N15/86
• 分類號: C12N15/86;C12N15/38;C12N7/01;C12N5/10;A61K39/245;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司
• 代理人: 魯兵

技術領域

本發明涉及載體及其應用，特別是涉及一種重組腺相關病毒載體及其構建方法與其在制備抗腫瘤藥物中的應用。

背景技術

腺相關病毒(AAV)的基因結構已經被鑒定。1983年，Samulski等人描述了AAV的末端重復片段(上游5’端片段，下游3’端片段)(Samulski?RJ，Srivastava?A，BernsKI，Muzyczka?N.Rescue?of?adeno-associated?virus?from?recombinant?plasmids：gene?correction?within?the?terminal?repeats?of?AAV.Cell.33：135-143.)。1984年，Hermonat等人描述了AAV的低感染顆粒(lip)基因和包膜(cap)基因(Hermonat?PL，Labow?MA，Wright?R，Berns?KI，Muzyczka?N.Genetics?ofadeno-associated?virus：isolation?and?preliminary?characterization?ofadeno-associated?virus?type?2?mutants.J?Virol.51：329-339.Hermonat，P.L.，and?Muzyczka，N.Use?of?adeno-associated?virus?as?a?mammalian?DNA?cloningvector：transduction?of?neomycin?resistance?into?mammalian?tissue?culturecells.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.81：6466-6470.)。1986年，Labow等人鑒定了位于上游5’端片段和rep基因之間的p5啟動子(LabowMA，Hermonat?PL，BernsKI.Positive?and?negative?autoregulation?of?the?adeno-associated?virus?type2genome.J?Virol.160：251-258.)。

1984年，美國博沃基因國際有限公司的主要技術技術負責人之一Paul?L.Hermonat教授率先證明AAV載體可用于人類疾病的基因治療(Hermonat，P.L.，andMuzyczka，N.Use?of?adeno-associated?virus?as?a?mammalian?DNA?cloning?vector：transduction?of?neomycin?resistance?into?mammalian?tissue?culture?cells.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.81：6466-6470.)。目前，主要是歐美國家在進行以AAV為基礎的基因治療人類疾病的臨床試驗。據美國糧食和藥品管理局統計，現有十余項以AAV為基礎的基因治療臨床試驗正在進行，主要是將攜帶治療基因的AAV病毒注入患者體內，使其在體內表達治療基因，從而達到治療疾病的目的。主要針對治療的疾病有帕金森氏綜合癥、風濕性關節炎、血友病、心力衰竭、進行性肌萎縮和奧茲海默綜合癥等非腫瘤性疾病。但是，應用于臨床治療的AAV病毒仍存在一些問題，例如攜帶治療基因大小受到明顯限制，病毒本身不穩定，導致治療基因表達不穩定，以及造成療效不一致。雖然AAV病毒本身的免疫原性很弱，但所表達的治療基因容易在患者體內誘發自身免疫反應，甚至導致嚴重的毒副作用。