[發(fā)明專利]一種CEA重組腺相關(guān)病毒載體及其構(gòu)建方法與應用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810093221.2
• 申請日: 2008-04-23
• 公開（公告）號: CN101307327A
• 公開（公告）日: 2008-11-19
• 發(fā)明（設計）人: 劉勇;保羅·L·赫蒙納特
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州博沃津生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C12N15/86
• 分類號: C12N15/86;C12N15/12;C12N7/01;C12N5/10;A61K38/17;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 魯兵

1、一種CEA重組腺相關(guān)病毒載體，是將腺相關(guān)病毒載體中的腺相關(guān)病毒結(jié)構(gòu)基 因替換為癌胚抗原基因或其突變型癌胚抗原CEA基因得到的重組腺相關(guān)病毒載體。

2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的CEA重組腺相關(guān)病毒載體，其特征在于：將所述重組 腺相關(guān)病毒載體中的p5啟動子替換為巨噬細胞病毒啟動子、beta肌動蛋白啟動子和 SV40病毒啟動子中的一個或幾個啟動子。

3、一種構(gòu)建權(quán)利要求1所述重CEA組腺相關(guān)病毒載體的方法，是先將腺相關(guān)病 毒載體中的腺相關(guān)病毒結(jié)構(gòu)基因剔除，再用癌胚抗原CEA基因或其突變型基因取代該 剔除基因，得到重組腺相關(guān)病毒載體。

4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的構(gòu)建方法，其特征在于：所述方法還包括將所述重組 腺相關(guān)病毒載體中的p5啟動子替換為巨噬細胞病毒啟動子、beta肌動蛋白啟動子和 SV40病毒啟動子中的一個或幾個啟動子的步驟。

5、與權(quán)利要求1所述CEA重組腺相關(guān)病毒載體相關(guān)的產(chǎn)品，包括重組腺相關(guān)病 毒質(zhì)粒、重組腺相關(guān)病毒顆粒和被重組腺相關(guān)病毒載體感染或轉(zhuǎn)染的細胞系。

6、根據(jù)權(quán)利要求5所述的產(chǎn)品，其特征在于：所述細胞系包括單核細胞-巨噬細 胞-樹突狀細胞系和T淋巴細胞系。

7、權(quán)利要求1或2所述的CEA重組腺相關(guān)病毒載體在制備抗腫瘤藥物中的應用。

8、權(quán)利要求5或6所述的產(chǎn)品在制備抗腫瘤藥物中的應用。

9、根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的應用，其特征在于：所述腫瘤為乳腺癌、結(jié)腸癌、 胃癌或肺腺癌。

10、一種體外殺滅腫瘤的方法，包括以下步驟：

1)將腫瘤所在體系中自然產(chǎn)生的單核細胞-巨噬細胞-樹突狀細胞或T淋巴細胞被 權(quán)利要求1或2所述的攜帶野生型癌胚抗原CEA基因的重組腺相關(guān)病毒載體和/或攜 帶突變型癌胚抗原CEA基因的重組腺相關(guān)病毒載體感染或轉(zhuǎn)染，或被權(quán)利要求5或6 所述的產(chǎn)品處理，各自得到處理后的細胞；

2)將步驟1)中處理后的單核細胞-巨噬細胞-樹突狀細胞加入腫瘤所在體系中殺 滅腫瘤；或?qū)⑽幢惶幚淼腡淋巴細胞與所述處理后的單核細胞-巨噬細胞-樹突狀細胞 混合培養(yǎng)形成抗原特異性細胞毒性T淋巴細胞，再將該抗原特異性細胞毒性T淋巴細 胞加入腫瘤所在體系中殺滅腫瘤；或?qū)⒈惶幚淼腡淋巴細胞和未被處理的單核細胞- 巨噬細胞-樹突狀細胞加入腫瘤所在體系中殺滅腫瘤。