[發(fā)明專利]一種篩選自身抗原的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810089581.5
• 申請日: 2008-04-08
• 公開（公告）號: CN101556278A
• 公開（公告）日: 2009-10-14
• 發(fā)明（設計）人: 趙曉航;高紅軍;喬媛媛
• 申請（專利權(quán)）人: 中國醫(yī)學科學院腫瘤研究所;中國人民解放軍海軍總醫(yī)院
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N27/64
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 羅菊華

1.篩選自身抗原的方法，包括步驟：

1)采用選擇的細胞系作為可能含有抗原的蛋白樣品的來源；

2)將所述細胞系的細胞蛋白分成亞蛋白組分；

3)以患者或健康人對照血清作為一抗，對每種蛋白組分進行一維Western印記初篩；

4)總結(jié)實驗組和對照組陽性信號的規(guī)律，比較分析二者在不同分子量的印記信號差 異，包括陽性率和信號相對強弱的差異；

5)根據(jù)一維Western印記實驗的結(jié)果選擇可以產(chǎn)生自身抗體的典型血清為一抗，選擇 陰性血清為對照，選擇陽性率高的亞蛋白組分作為二維Western印記的可能含有抗原的蛋 白樣品；

6)采用5)中選擇的一抗、對照，通過二維Western印記對5)中的可能含有抗原的蛋白樣 品進行篩選和質(zhì)譜鑒定，

其中步驟1)中的細胞系選自人的腫瘤細胞或者其他疾病相關細胞。

2.權(quán)利要求1的方法，其中步驟2)中的亞蛋白組分包括胞漿蛋白組分，膜系統(tǒng)蛋白組 分，細胞骨架組份和/或細胞核蛋白組分。

3.權(quán)利要求1的方法，其中步驟2)中的分成亞蛋白組分的方法包括采用商品化的試劑 盒。

4.權(quán)利要求1的篩選自身抗原的方法，其中含有抗原的蛋白樣品的來源是EC0156。

5.權(quán)利要求1的篩選自身抗原的方法，其中含有抗原的蛋白樣品的來源是KYSE410細 胞。

6.權(quán)利要求4的篩選自身抗原的方法，其中篩選到的抗原是enolase-1、PGK1、HSP105、 vinculin、phosphoglyceratemutase1和triosephosphateisomerase1。

7.權(quán)利要求5的篩選自身抗原的方法，其中篩選到的抗原是P53和MBP-1。