[發明專利]編碼奈瑟氏球菌屬細菌分支酶的核酸分子以及α-1,6-分支α-1,4-葡聚糖的制備方法

有效

• 申請號: 200810083702.5
• 申請日: 1999-10-08
• 公開（公告）號: CN101386864A
• 公開（公告）日: 2009-03-18
• 發明（設計）人: V·巴特徹爾;M·庫安茲
• 申請（專利權）人: 拜爾生物科學有限公司;馬普科技促進協會
• 主分類號: C12N15/54
• 分類號: C12N15/54;C12N15/63;C12N9/10;C12N5/10;C07K16/40;C12P19/16;C08B30/00;A01H1/00;A01H5/00
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 羅菊華

1.選自下組的編碼奈瑟氏球菌屬細菌分支酶的核酸分子：

(a)由SEQ?ID?NO.2中所示氨基酸序列組成的蛋白的編碼核酸分子；

(b)由SEQ?ID?NO.1中所示編碼區組成的核酸分子；

(c)由質粒DSM?12425中插入片段編碼的氨基酸序列組成的蛋白質的編 碼核酸分子；

(d)由包括在質粒DSM?12425插入片段中的分支酶的編碼區組成的核酸 分子；和

(e)其序列由于遺傳密碼的簡并性而不同于(a)、(b)、(c)或(d)的核酸 分子的序列的核酸分子。

2.含有根據權利要求1的核酸分子的載體。

3.根據權利要求2的載體，其中所述核酸分子按有義鏈方向與保證原核 或真核細胞中轉錄的調節序列連接。

4.經權利要求1的核酸分子，或權利要求2或3的載體遺傳修飾的宿主 細胞。

5.制備奈瑟氏球菌屬細菌分支酶的方法，其中權利要求4的宿主細胞在 允許該蛋白表達的條件下培養，并從培養細胞和/或培養基分離該蛋 白。

6.制備奈瑟氏球菌屬細菌分支酶的方法，其中使用權利要求1的核酸分 子在體外轉錄和翻譯系統中產生該蛋白。

7.由權利要求1的核酸分子編碼的、或通過權利要求5或6的方法可獲 得的蛋白質。

8.特異識別權利要求7的蛋白質的抗體。

9.權利要求7的蛋白質在體外系統中制備α-1，6-分支α-1，4-葡聚糖中 的應用。

10.含有權利要求1的核酸分子的轉基因植物細胞，其中所述核酸分子與 保證在植物細胞中轉錄的調節序列連接。

11.含有權利要求10的轉基因植物細胞，其中所述核酸分子與保證編碼 蛋白在細胞質體中定位的信號序列的編碼序列連接。

12.制備轉基因植物的方法，其中：

(a)通過引入權利要求1的核酸分子或權利要求2或3的載體遺傳修 飾植物細胞；

(b)從根據步驟(a)產生的細胞再生植物；并且

(c)任選性地從根據步驟(b)產生的植物產生更多植物。

13.可從權利要求10或11的轉基因植物細胞、含有權利要求10或11 的植物細胞的轉基因植物或通過權利要求12的方法可獲得的轉基因 植物獲得的淀粉。

14.根據權利要求13的淀粉，其中所述淀粉的組成被改變，以致與相應 野生型植物的淀粉比較，其具有增加的膠體質地和/或降低的磷酸含量 和/或降低的峰值粘度和/或降低的成漿溫度和/或降低的淀粉顆粒大 小和/或改變的側鏈分布。

15.在細菌細胞中天然控制權利要求1的核酸分子的轉錄的調節區，其由 選自下組的核苷酸序列組成：

(a)由SEQ?ID?NO.1中所示核苷酸序列的第1-169位核苷酸組成的核苷 酸序列；和

(b)包含在質粒DSM?12425的插入片段中的調節區的核苷酸序列。

16.使用蔗糖底物和淀粉蔗糖酶與分支酶的酶組合制備α-1，6-分支α -1，4-葡聚糖的體外方法，其中通過分支酶和淀粉蔗糖酶的蛋白活性比 來控制分支程度和分子量，其中所述分支酶是由權利要求1的核酸分 子編碼的。