[發(fā)明專利]N-端修飾的人胸腺肽α1復(fù)合物及其制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810081021.5
• 申請(qǐng)日: 2008-02-21
• 公開（公告）號(hào): CN101514228A
• 公開（公告）日: 2009-08-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張卓兵;劉小玲
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 張卓兵
• 主分類號(hào): C07K14/47
• 分類號(hào): C07K14/47;C07K1/107;A61K38/17;A61P1/16;A61P35/00;A61P31/16;A61P31/18;A61P31/14
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1、一種N-端修飾的人胸腺肽α1復(fù)合物，其特征在于胸腺肽α1N-端氨 基酸改變成為包含半胱氨酸(Cys)的序列，結(jié)構(gòu)改變公式為：Xn+Y，X為包括 半胱氨酸(Cys)在內(nèi)的親水性氨基酸，n為1-3；Y為缺少N端絲氨酸(Ser) 的人胸腺肽α1的天然序列。其中優(yōu)選改變?yōu)榻z氨酸(Ser)變成半胱氨酸(Cys)， 其序列如SEQ?ID?No：1。

2、權(quán)利要求1所述的N-端修飾為含半胱氨酸的人胸腺肽α1復(fù)合物，其 特征在于聚乙二醇特異性與半胱氨酸連接。

3、權(quán)利要求2所述的聚二乙醇連接的人胸腺肽α1復(fù)合物，其特征在于 聚乙二醇可以是并且不限于：馬來(lái)酰亞胺聚二乙醇(PEG?Maleimide)、乙烯砜 聚二乙醇(PEG?Vinyl?Sulfone)、碘乙酰胺聚二乙醇(PEG?Idooacetamide)、 巰基吡啶聚二乙醇(PEG?Orthopyridyl?Disulfide)。

4、權(quán)利要求2所述的聚二乙醇連接的人胸腺肽α1復(fù)合物，其特征在于 聚乙二醇的分子量為3000至8000道爾頓、8000至20000道爾頓、20000至 60000道爾頓。

5、一種N-端修飾的人胸腺肽α1復(fù)合物的生產(chǎn)方法，其特征在于胸腺肽 α1N-端氨基酸改變成為包含半胱氨酸(Cys)的序列，結(jié)構(gòu)改變公式為：Xn+Y， X為包括半胱氨酸(Cys)在內(nèi)的親水性氨基酸，n為1-3；Y為缺少N端絲氨 酸(Ser)的人胸腺肽α1的天然序列。其中優(yōu)選改變?yōu)榻z氨酸(Ser)變成半 胱氨酸(Cys)。

6、權(quán)利要求5所述的N-端修飾為含半胱氨酸的人胸腺肽α1復(fù)合物的生 產(chǎn)方法，其特征在于聚乙二醇特異性與半胱氨酸連接，具體方法如下：

第一步：通過(guò)加入還原劑如DTT、β巰基乙醇等，還原N-端含半胱氨酸 的人胸腺肽α1；

第二步：將與巰基反應(yīng)的聚乙二醇如馬來(lái)酰亞胺聚二乙醇按聚乙二醇∶ 人胸腺肽α1＝1-20∶1(分子摩爾比)加入至還原后的N-端含半胱氨酸的人胸 腺肽α1的磷酸緩沖液中，室溫下反應(yīng)2小時(shí)；

第三步：采用Seplacryl?S-100HR分子篩柱純化聚乙二醇連接的人胸腺 肽α1復(fù)合物。

7、權(quán)利要求6所述的聚二乙醇連接的人胸腺肽α1復(fù)合物的生產(chǎn)方法， 其特征在于聚乙二醇可以是并且不限于：馬來(lái)酰亞胺聚二乙醇(PEG?Maleimide)、 乙烯砜聚二乙醇(PEG?Vinyl?Sulfone)、碘乙酰胺聚二乙醇(PEG?Idooacetamide)、 巰基吡啶聚二乙醇(PEG?Orthopyridyl?Disulfide)。

8、權(quán)利要求6所述的聚二乙醇連接的人胸腺肽α1復(fù)合物的生產(chǎn)方法， 其特征在于聚乙二醇的分子量為3000至8000道爾頓、8000至20000道爾頓、 20000至60000道爾頓。

9、權(quán)利要求1至4所述N-端修飾的人胸腺肽α1復(fù)合物在人類免疫系統(tǒng) 相關(guān)疾病治療中的應(yīng)用。

10、權(quán)利要求1至4所述N-端修飾的人胸腺肽α1復(fù)合物在人類免疫系統(tǒng) 相關(guān)疾病治療中的應(yīng)用，其中相關(guān)疾病包括：肝炎、腫瘤、病毒性感染疾病如 感冒、愛滋病、非典型性肺炎(SARS)等。