[發(fā)明專利]窿緣桉組織培養(yǎng)快速繁殖方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810073558.7
• 申請日: 2008-04-29
• 公開（公告）號: CN101258836A
• 公開（公告）日: 2008-09-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳曉明;劉海龍;蔡玲;黃金使;覃子海;王以紅;吳幼媚;韋穎文;黃宏喜
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00;C12N5/04
• 代理公司: 廣西南寧公平專利事務(wù)所有限責(zé)任公司
• 代理人: 黃永校

1、窿緣桉組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于該繁殖方法包括以下步驟：

1.1優(yōu)良個(gè)體選擇

選擇窿緣桉實(shí)生林內(nèi)單株桉葉油中桉葉素含量為60％以上的無病蟲害個(gè)體為優(yōu)樹；

1.2外植體的采集、消毒

在優(yōu)樹離地面約30cm處進(jìn)行環(huán)割樹周長的2/3，割傷至韌皮部。待萌芽條生長至30～40cm時(shí)采集接種。將采回的枝條去除葉片后，用清水沖洗，再用沾有肥皂粉或洗潔精的軟毛刷進(jìn)行刷洗，后用去離子水清洗1～3次，將材料分成莖尖和莖段，用75％乙醇浸泡滅菌30s，蒸餾水沖洗1～3次后置于超凈臺，再用0.1％HgCI₂靜置浸泡2～6min，用無菌水沖洗1～2次；然后再倒入0.1％HgCI₂，以振蕩的方式進(jìn)行滅菌處理3～6min，最后用無菌水沖洗5～8次；

1.3莖段的初始培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)

將消毒好的莖斷接種到改良MS+6-BA0.1～0.5mg·L^-1+蔗糖30000mg·L^-1+瓊脂3000mg·L^-1的培養(yǎng)基上進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)。培養(yǎng)條件為25±2℃，1000～1500LX，每天光照10～14h為宜。30d后將密集的小叢生芽分割為單株或叢芽小束，轉(zhuǎn)接到改良MS+6-BA?1.5+IBA?0.5+蔗糖30000mg·L^-1+瓊脂3000mg·L^-1的增殖培養(yǎng)基上，以促進(jìn)培養(yǎng)物的腋芽和側(cè)芽萌發(fā)；

將叢生芽中株高2～3cm的單芽剪下，接種到生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根；

1.4煉苗、出瓶移栽

單芽生根長0.5～1.0cm時(shí)，把生根苗搬出培養(yǎng)室，移至大棚練苗10～30d，苗高2.0～4.0cm，根長1.5～2.0cm時(shí)，移栽到紅心土、木屑和泥炭土等混合的輕型基質(zhì)中；

1.5苗木管理

移栽一周后，噴施0.1％的復(fù)合肥溶液，每周1～2次。10～15d后，搬到自然條件的網(wǎng)室培育。苗高15～35cm，地莖0.18～0.25cm可出圃造林。

2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的窿緣桉組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于所述改良MS培養(yǎng)基的組成為：

KNO₃??????????????1900mg·L^-1

NH₄NO₃????????????1600mg·L^-1

CaCl₂.2H₂O????????460mg·L^-1

MgSO₄.7H₂O????????370mg·L^-1

CaNO₃.4H₂O????????200mg·L^-1

KH₂PO₃????????????170mg·L^-1

MnSO₄.4H₂O????????22.3mg·L^-1

ZnSO₄.7H₂O????????8.6mg·L^-1

CuSO₄.5H₂O????????0.025mg·L^-1

H₃BO₃?????????????6.2mg·L^-1

Na₂MoO₄.2H₂O??????0.25mg·L^-1?

KI????????????????0.83mg·L^-1

CoCl₂.6H₂O????????0.025mg·L^-1

維生素B1??????????0.4mg·L^-1

維生素B6??????????0.5mg·L^-1

煙酸??????0.5mg·L^-1

甘氨酸????2.0mg·L^-1

肌醇??????50mg·L^-1。

3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的窿緣桉組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于所述生根培養(yǎng)基的組成為：

1/2改良MS

IAA???????1.5mg·L^-1

NAA???????1mg·L^-1

蔗糖??????30000mg·L^-1

瓊脂粉????3800mg·L^-1。