[發明專利]一種用于早期卵巢癌診斷的檢測試劑盒

無效

• 申請號: 200810073433.4
• 申請日: 2008-01-23
• 公開（公告）號: CN101261275A
• 公開（公告）日: 2008-09-10
• 發明（設計）人: 李力;王琪;黎丹戎;陽志軍
• 申請（專利權）人: 李力;王琪;黎丹戎;陽志軍
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/574
• 代理公司: 廣西南寧公平專利事務所有限責任公司
• 代理人: 黃永校

1、一種用于早期卵巢癌診斷的檢測試劑盒，包括96孔聚苯乙烯酶標板、過氧化物酶標記的人抗兔IgG、多克隆抗體包被板、質控品和輔助試劑，其特征在于還含有重組人CCL18和重組人CXCL1參照品、鼠抗人CCL18單克隆抗體、鼠抗人CXCL1單克隆抗體、兔抗人CCL18多克隆抗體、兔抗人CXCL1多克隆抗體。

2、根據權利要求1所述的用于早期卵巢癌診斷的檢測試劑盒，其特征在于所述重組人CCL18和重組人CXCL1參照品是經CCL18和CXCL1?cDNA克隆、重組蛋白的誘導表達、Ni?NTA螯合樹脂層析分離純化而獲得。

3、根據權利要求1所述的用于早期卵巢癌診斷的檢測試劑盒，其特征在于所述兔抗人CCL18多克隆抗體，兔抗人CXCL1多克隆抗體，是將重組人CCL18，重組人CXCL1，免疫新西蘭兔，經過3-4次加強免疫后符合效價要求時，立即頸動脈采血，分離血清后，用Protein?G柱親和層析純化獲得。

4、根據權利要求1所述的用于早期卵巢癌診斷的檢測試劑盒，其特征在于所述鼠抗人CCL18單克隆抗體、鼠抗人CXCL1單克隆抗體是將純化的His融合蛋白與等量完全弗氏佐劑混合，充分乳化后，經皮下注射免疫BALB/c小鼠，經腹腔注射加強免疫，用不完全弗氏佐劑充分乳化抗原，共加強免疫，取效價高的老鼠，脾內注射抗原加強免疫4天后，取脾細胞與骨髓瘤細胞Sp2/0在PEG4000作用下融合，用間接酶聯免疫法篩選mAb分泌陽性的雜交瘤細胞，經3、4次有限稀釋法克隆化后，選擇2株mAb分泌持續陽性的雜交瘤細胞擴大培養，并按常規制備腹水并純化獲得。

5、根據權利要求1所述的用于早期卵巢癌診斷的檢測試劑盒，其特征在于所述多克隆抗體包被板是將兔抗人CCL18多克隆抗體和兔抗人CXCL1多克隆抗體稀釋后滴入酶標板各孔，經吸附、洗板、封閉、吹干步驟處理后制得。

6、根據權利要求1所述的用于早期卵巢癌診斷的檢測試劑盒，其特征在于所述輔助試劑包括酶聯免疫反應溶液、顯色液、終止液及清洗緩沖液。