[發(fā)明專利]一種重組蛋白在制備預(yù)防糖尿病口服藥物中的應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810072084.4
• 申請日: 2008-11-07
• 公開（公告）號(hào): CN101428136A
• 公開（公告）日: 2009-05-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周克夫;王世媛;韓偉;吳漢州;劉升發(fā)
• 申請（專利權(quán)）人: 廈門大學(xué);廈門伯賽基因轉(zhuǎn)錄技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): A61K38/16
• 分類號(hào): A61K38/16;A61P3/10
• 代理公司: 廈門南強(qiáng)之路專利事務(wù)所
• 代理人: 馬應(yīng)森

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種重組蛋白(人前胸腺素α原)，尤其是涉及一種重組蛋白的制備方法及其在制備預(yù)防糖尿病口服藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

隨著人們生活水平的提高，高糖、高脂和高膽固醇食物的長期攝入將造成人體肥胖，而肥胖和超重已經(jīng)成為世界性的流行病之一，人們已經(jīng)意識(shí)到過多食用精加工的碳水化合物造成能量過剩是引起肥胖的一個(gè)重要原因，因?yàn)檫^多的碳水化合物攝入后會(huì)轉(zhuǎn)化為脂肪沉積在體內(nèi)，同時(shí)長期高碳水化合物食品還會(huì)造成空腹血糖升高，增加胰島的負(fù)荷，糖耐量作用降低，長期積累將大大增加患II型糖尿病的危險(xiǎn)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)長期喂養(yǎng)高糖、高脂和高膽固醇食物的小鼠和兔子4周后其空腹血糖，血脂明顯比喂養(yǎng)正常飼料的動(dòng)物高，出現(xiàn)血糖和血脂代謝紊亂，并且發(fā)現(xiàn)喂養(yǎng)高糖、高脂和高膽固醇食物的動(dòng)物肝臟，腎臟結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，肝臟糖原合成發(fā)生異常，并且發(fā)生脂肪堆積，胰腺中的胰島數(shù)量減少，胰島細(xì)胞也相應(yīng)減少。

人前胸腺素α原(prothymosinα)是一個(gè)小的酸性蛋白，相對(duì)分子質(zhì)量13,000，最初由大鼠的胸腺分離得到。雖然胸腺素是由胸腺分泌的，但是在體內(nèi)許多組織都有胸腺素原α的表達(dá)，而且是不含內(nèi)含子的一種保守的DNA序列。胸腺肽的臨床應(yīng)用始于20世紀(jì)70年代中期，其最主要的貢獻(xiàn)是對(duì)胸腺依賴性疾病的治療，它對(duì)于維持原發(fā)性免疫缺陷病、自身免疫疾病和癌癥患者的免疫反應(yīng)性，刺激其特異性淋巴細(xì)胞的活性起著主要作用，因此廣泛應(yīng)用于治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡、白塞氏綜合征、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、重癥感染、支氣管哮喘、急慢性肝炎和腫瘤等疾病。另外，由于人類的老化明顯地反映胸腺組織的萎縮和功能的衰竭，胸腺肽可以推遲一些老年性疾病的出現(xiàn)，因此應(yīng)用胸腺肽抗衰老也有著極其廣闊的前景。

人ProTα由109個(gè)氨基酸殘基組成，它對(duì)提高機(jī)體免疫力、抗機(jī)會(huì)感染以及促進(jìn)淋巴細(xì)胞的成熟與分化，對(duì)IL-2和IL-2R的表達(dá)有一定的促進(jìn)作用，甚至于發(fā)現(xiàn)它對(duì)腫瘤也有一定治療作用。

近年來，糖尿病的病因和發(fā)病機(jī)理研究表明氧化應(yīng)激與糖尿病的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)(1、曹文彬等，抗氧化微量營養(yǎng)素防治糖尿病的研究進(jìn)展，長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，22(2)：73-74)，為了防止糖尿病的發(fā)生發(fā)展，人們對(duì)一些具有防治糖尿病作用的天然抗氧化物進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，發(fā)現(xiàn)它們通過表達(dá)不同的機(jī)制與作用環(huán)節(jié)打斷氧化侵襲引致胰島β細(xì)胞損害的惡性循環(huán)，從而為天然抗氧化治療糖尿病提供了一個(gè)新的策略。

Nrf2(NF-E2-related?factor2)是細(xì)胞調(diào)節(jié)抗氧化應(yīng)激反應(yīng)的重要轉(zhuǎn)錄因子，生理狀態(tài)下它與胞漿蛋白伴侶分子Keap1(Kelch-like?ECH—associated?proteinl)結(jié)合使活性處于相對(duì)抑制狀態(tài)。在氧化應(yīng)激源作用下，Nrf2與Keap1解偶連后與抗氧化反應(yīng)元件ARE(antioxidantresponse?element)上GCTGAGTCA位點(diǎn)結(jié)合，啟動(dòng)ARE調(diào)控的第II相解毒酶及抗氧化酶基因表達(dá)，增加細(xì)胞對(duì)氧化應(yīng)激的抗性。Nrf2-Keap1系統(tǒng)在細(xì)胞抵御外源性或內(nèi)源性氧化應(yīng)激的機(jī)制中有重要地位(2、Dinkova?KostovaAT，et?al.Direct?evidence?that?sulfhydryl?groups?of?Keap1are?the?sensors?regulating?induction?of?phase?2?enzymes?that?protect?against?carcinogens?andoxidants.Proc?Natl?Acad?Sci?USA，2002，99(18)：11908-11913；3、Zhang?DD，HanninkM，Distinct?cysteine?residues?in?Keap1?are?required?for?Keap1-dependent?ubiquitination?of?Nrf2?andfor?stabilization?of?nrf2?by?chemopreventive?agents?and?oxidative?stress[J].Mol?Cell?Biol，2003，23(22)：8137-5151；4、Geoffrey?F.Kelso，et?al.Prevention?of?Mitochondrial?Oxidative?DamageUsing?Targeted?Antioxidants.Annals?of?the?New?York?Academy?of?Sciences.2002，959：263-274)。