[發(fā)明專利]靈芝孢子破壁率的測定方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810071866.6
• 申請日: 2008-10-06
• 公開（公告）號: CN101446581A
• 公開（公告）日: 2009-06-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 黃晉之;黎志銀;柯斌榕;李曄
• 申請（專利權(quán)）人: 福建仙芝樓生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/48
• 分類號: G01N33/48
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及真菌孢子破壁率的測定方法，尤其是靈芝孢子破壁率 的測定方法。

背景技術(shù)

靈芝孢子有兩層十分堅實的孢壁，不容易受化學(xué)和外力破壞，對 孢子內(nèi)部有一定的保護(hù)作用，因而不利于人體的消化和有效功能成分 的吸收，甚至服用后，部分孢子在糞便中仍然完整無缺。為了提高靈 芝孢子粉的保健、藥效功能，破壁處理是靈芝孢子產(chǎn)品加工過程中的 一項非常重要的工序，孢子的破壁率已經(jīng)成為靈芝孢子產(chǎn)品質(zhì)量鑒定 的必要指標(biāo)之一。目前常用的方法是用一定濃度孢子的水懸浮液，點 滴于血球計數(shù)板上，在顯微鏡下讀出破壁前后完整孢子的數(shù)量，然后 計算出單位重量所含完整孢子的數(shù)量，利用公式

計算出孢子的“破壁率”。在檢測中，孢子在懸浮液中的分散均勻度 對測定數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性有極大的影響。一個分布不均、結(jié)塊太多的孢子 懸浮液，不僅難以讀出孢子數(shù)量，更無法保證讀數(shù)的精確性和代表性。 目前只能通過增加孢子的水懸浮液的密度和黏度，來改進(jìn)孢子的懸浮 性（如在孢子的水懸浮液中加蔗糖、食鹽或硫酸鋅等），以及使用高 速剪切攪拌來達(dá)到均勻分散孢子的目的。盡管如此，孢子平均分散的 程度和可靠性還是不能保證，這可從圖1、圖2中看出。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)中的不足之處，提供一種使 孢子平均分散的程度較高，能較為精確的測定靈芝孢子破壁率的方 法。

本發(fā)明為一種靈芝孢子破壁率的測定方法,其要點在于：（1）取 適量同一批次的靈芝未破壁孢子粉A和破壁后孢子粉B，在未破壁孢 子粉及破壁孢子粉B分別加入固體分散劑充分混合，用液體溶劑分別 稀釋上述兩種混合物，定容后，混合均勻；

（2）分別取上述兩份靈芝孢子粉懸浮液點滴在血球計數(shù)板上， 在顯微鏡下,讀出孢子粉破壁前后所含完整孢子的數(shù)量，計算出單位 重量所含完整孢子的數(shù)量，利用公式

計算出孢子破壁率。

本發(fā)明利用“干物顆粒間的均勻混合”原理，在孢子粉與溶劑混 合成懸浮液之前先與固體分散劑進(jìn)行均勻混合，避免孢子結(jié)團(tuán)以及不 能均勻分散的缺陷，達(dá)到了計數(shù)精確、檢測結(jié)果具有代表性的目的。

在未破壁孢子粉A或破壁孢子粉B中所加的固體分散劑量為所取 未破壁孢子粉A或破壁孢子粉B量的0.5倍至它在溶劑中的飽和濃度 量。液體溶劑一般選用蒸餾水，固體分散劑為顆粒微小、不結(jié)塊、并 可以完全溶解于所選用的液體溶劑的固體粉末或晶體，如蔗糖、食鹽、 硫酸鋅等，可以由一種物質(zhì)構(gòu)成，也可由多種物質(zhì)混合而成，大小為 20-200目之間，最好是50-100目的細(xì)糖粉。當(dāng)它們?nèi)芙庠谒锖螅? 也有增加水的密度和黏度的作用，有利于孢子在懸浮液中的物理穩(wěn)定 性，但這不是本專利所采用的“固體分散劑”最重要的原因。

為了計量準(zhǔn)確最好將靈芝未破壁孢子粉A和破壁后孢子粉B在與 固體分散劑混合前先進(jìn)行烘干。烘干溫度為50℃-80℃，烘干時間大 約3-5小時即可。

為了增加孢子在水中的分散性和減少孢子重新聚集，在定容前往 混合液中加入表面活性劑，所加的量占未破壁孢子粉A重量的 0.05%--5%之間。表面活性劑可為土溫80，也可以使用其他類同的水 溶性表面活性劑或清潔劑，如家用洗滌劑、清潔劑、或乳化劑TERGITOL 等。

所謂的機(jī)械攪拌是指可以使用如超聲震蕩器、乳化機(jī)、磁振蕩機(jī) 或旋渦混合器等來促進(jìn)懸浮液的均勻混合。

由于孢子破壁后，單位重量中所含完整的未破壁的孢子數(shù)較少， 為了計量準(zhǔn)確，所取的破壁孢子粉B的量為未破壁孢子粉A的1.5-3 倍。

本發(fā)明的優(yōu)點在于利用“干物顆粒間的均勻混合”原理，在孢子 粉與水混合成懸浮液之前先與固體分散劑進(jìn)行均勻混合，避免孢子結(jié) 團(tuán)以及在懸浮液中不能均勻分散的缺陷，從而達(dá)到了計數(shù)精確、檢測 結(jié)果具有代表性的目的。

附圖說明

圖1顯微鏡下在加糖的水溶液里的孢子分布狀態(tài)

圖2顯微鏡下在加糖和土溫的水溶液里的孢子分布狀態(tài)

圖3顯微鏡下在用本專利方法處理后的孢子分布狀態(tài)

圖4顯微鏡下在用本專利方法處理后破壁孢子分布狀態(tài)

具體實施方式

為了充分公開本發(fā)明的靈芝孢子粉破壁率的測定方法，以下結(jié)合 實施例加以說明，但本發(fā)明并不局限于這些實施例。

實施例1：芝孢子粉破壁率的測定，具體步驟如下：