[發明專利]酵母轉化與樹脂吸附耦合制備2－苯乙醇的方法

有效

• 申請號: 200810071807.9
• 申請日: 2008-09-18
• 公開（公告）號: CN101363030A
• 公開（公告）日: 2009-02-11
• 發明（設計）人: 王航;郭養浩;孟春;石賢愛;關昂
• 申請（專利權）人: 福州大學
• 主分類號: C12P7/22
• 分類號: C12P7/22;C12R1/865;C12R1/84;C12R1/78;C12R1/645
• 代理公司: 福州元創專利代理有限公司
• 代理人: 蔡學俊

1.一種酵母轉化與樹脂吸附耦合制備2-苯乙醇的方法，其特征在于：采用酵母為生物催化 劑，以L-苯丙氨酸為底物，以樹脂為產物分離介質，通氣攪拌轉化，并通過控制葡萄糖 流加速率抑制乙醇的生成，控制轉化溫度25～36℃，pH4～7，轉化10～100h，轉化液及樹 脂經后處理制得天然2-苯乙醇；其制備步驟為：

(1)酵母培養：酵母經過接種、斜面活化后進行種子擴大培養成二級種子液；

(2)生物轉化：將二級種子液接種至轉化培養基，通氣攪拌，控制溶氧大于0.5mg/L， 溫度25～36℃，用酸堿控制pH4～7，2小時后，加入L-苯丙氨酸至濃度1～20g/L， 并以合適的速率流加葡萄糖，使轉化溶液中的葡萄糖的濃度控制在0.01～20.0g/L； 所述轉化培養基組成為：葡萄糖20～40g/L，KH₂PO₄1g/L，尿素2～4g/L，MgSO₄0.3～0.5g/L，CaCl₂0.2g/L，溶劑為水，pH自然；

(3)產物原位轉移：酵母培養過程中加入大孔樹脂，加入量為50～300g/L發酵液；或者 將樹脂裝填成柱，通過泵將發酵液打入樹脂柱并將流出液再接入發酵罐形成循環； 或者將發酵液先經膜分離裝置分離菌體及固形物后，將濾過液上柱，過柱液全部或 部分返回發酵罐形成循環；當樹脂吸附飽和后可更換新樹脂；溶氧濃度、pH及補糖 速率等控制條件同(2)；在轉化過程可適當補加L-苯丙氨酸；轉化10～100h停止；

(4)樹脂后處理：從發酵液中取出樹脂，裝填成柱，用一定濃度乙醇動態洗脫，收集2- 苯乙醇洗脫峰，再通過精餾制得高純度天然2-苯乙醇。

2.根據權利要求1所述的酵母轉化與樹脂吸附耦合制備2-苯乙醇的方法，其特征在于：所 述酵母采用具有艾氏途徑的酵母。

3.根據權利要求1所述的酵母轉化與樹脂吸附耦合制備2-苯乙醇的方法，其特征在于：所 述酵母采用釀酒酵母、酸酒酵母、產朊球擬酵母、乳酸克魯維酵母、異常漢遜酵母、馬 克斯克魯維酵母或發酵畢赤酵母中的一種。

4.根據權利要求1所述的酵母轉化與樹脂吸附耦合制備2-苯乙醇的方法，其特征在于：所 述樹脂為大孔吸附樹脂；所述大孔吸附樹脂的用量與發酵液用量比為10～300g∶1L。

5.根據權利要求1所述的酵母轉化與樹脂吸附耦合制備2-苯乙醇的方法，其特征在于：所 述步驟(3)中膜分離采用孔徑0.1-1.2μm的中空纖維膜或陶瓷膜。

6.根據權利要求1所述的酵母轉化與樹脂吸附耦合制備2-苯乙醇的方法，其特征在于：所 述步驟(4)的樹脂后處理的條件為：用30～100％(v/v)乙醇洗脫樹脂，收集苯乙醇洗脫 峰，然后再精餾得到高純度苯乙醇。