[發明專利]用金納米粒子檢測單鏈DNA堿基突變的方法無效
| 申請號： | 200810070946.X | 申請日： | 2008-04-18 |
| 公開（公告）號： | CN101261220A | 公開（公告）日： | 2008-09-10 |
| 發明（設計）人： | 孫莉萍;張建鋒;李輝;張其清;王秀燕;張召武 | 申請（專利權）人： | 廈門大學 |
| 主分類號： | G01N21/33 | 分類號： | G01N21/33;G01N21/78;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 廈門南強之路專利事務所 | 代理人： | 馬應森 |
| 地址： | 361005福*** | 國省代碼： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 納米 粒子 檢測 dna 堿基 突變 方法 | ||
1.用金納米粒子檢測單鏈DNA堿基突變的方法，其特征在于具體步驟如下：
1)制備膠體金：將氯金酸溶液和檸檬酸三鈉溶液的混合液加熱至沸騰，反應完成后冷卻至室溫，離心，濃縮，加入水重新分散，得膠體金，所述的混合液中，氯金酸的濃度為0.01％，檸檬酸三鈉的濃度為0.02％～0.05％；
2)取野生型單鏈DNA?10～50fmol加入到40～50μL膠體金中，混勻后得膠體金與野生型單鏈DNA復合體系；
3)取突變型單鏈DNA?10～50fmol加入到40～50μL膠體金中，混勻后得膠體金與突變型單鏈DNA復合體系；
4)在步驟2所得的膠體金與野生型單鏈DNA復合體系中加入2～4μL?1mol/L的鹽酸，混勻后發生團聚，作紫外可見吸收光譜檢測，膠體金與野生型單鏈DNA復合體系的紫外可見吸收光譜最大吸收峰發生紅移，發生紅移后的膠體金與野生型單鏈DNA復合體系的紫外可見吸收光譜最大吸收峰稱之為吸收峰1；
5)在步驟3所得的膠體金與突變型單鏈DNA復合體系中加入2～4μL?1mol/L的鹽酸，混勻后發生團聚，作紫外可見吸收光譜檢測，膠體金與突變型單鏈DNA復合體系的紫外可見吸收光譜最大吸收峰發生紅移，發生紅移后的膠體金與突變型單鏈DNA復合體系的紫外可見吸收光譜最大吸收峰稱之為吸收峰2；
6)當吸收峰2與吸收峰1有明顯差異時，據此可以判斷有突變發生。
2.如權利要求1所述的用金納米粒子檢測單鏈DNA堿基突變的方法，其特征在于所述的膠體金的粒徑為10～30nm。
3.如權利要求2所述的用金納米粒子檢測單鏈DNA堿基突變的方法，其特征在于所述的膠體金的粒徑為15nm。
4.如權利要求1所述的用金納米粒子檢測單鏈DNA堿基突變的方法，其特征在于：
在步驟2所得的膠體金與野生型單鏈DNA復合體系中加入2～4μL?1mol/L的鹽酸，混勻后可觀察顏色的變化，膠體金與野生型單鏈DNA復合體系由紅色變為其它顏色，稱之為顏色1；
在步驟3所得的膠體金與突變型單鏈DNA復合體系中加入2～4μL?1mol/L的鹽酸，混勻后可觀察顏色的變化，膠體金與突變型單鏈DNA復合體系由紅色變為其它顏色，稱之為顏色2；
當顏色2與顏色1有明顯差異時，據此可以判斷有突變發生。
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