[發(fā)明專利]谷胱甘肽凍干粉的制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810069962.7
• 申請日: 2008-07-11
• 公開（公告）號: CN101319244A
• 公開（公告）日: 2008-12-10
• 發(fā)明（設計）人: 周小華;王東;鄭申聲
• 申請（專利權）人: 重慶大學
• 主分類號: C12P21/02
• 分類號: C12P21/02;C07K1/14;A61K38/06;A23L3/3535;A23L1/226;A23K1/16;C12R1/85
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1.一種谷胱甘肽凍干粉的制備方法，其特征在于具體的方法步驟如下：

(1)GSH提取液的制備

以面包干酵母為原料，按照面包干酵母的重量∶蒸餾水的體積∶二甲苯的體積比為1∶2～3∶0.03～0.05的比例，先在面包干酵母中加入蒸餾水，攪拌混合均勻，再加入二甲苯，并攪拌混合均勻后，置于搖床上振蕩5～8小時，然后再加入與混合液等體積的蒸餾水，再進行抽濾，棄濾渣，收集濾液，對濾液用稀鹽酸調節(jié)pH值為1.0～3.0，然后加入氯化鈉固體，攪拌混合均勻，制備出氯化鈉的摩爾濃度為0.05～0.2mol/L的還原型谷胱甘肽提取液；

(2)反膠束溶液的制備

以磷酸二辛酯為萃取劑，以正辛醇為稀釋劑制備反膠束溶液，將P₂₀₄加入正辛醇中，攪拌均勻后，配制出P₂₀₄的摩爾濃度為0.1～0.2mol/L的P₂₀₄溶液，然后按P₂₀₄溶液的P₂₀₄∶蒸餾水的摩爾比為1∶5～20的比例，在P₂₀₄溶液中加入蒸餾水，攪拌0.5～1.5小時；

(3)萃取

在第(1)步和第(2)步完成后，按第(1)步制備出的GSH提取液∶第(2)步制備的P₂₀₄反膠束溶液的體積比為1∶2～4的比例，先將GSH提取液和P₂₀₄反膠束溶液置于萃取器中，然后進行攪拌萃取10～45min，再用離心機以7000～9000r/min的速度，對其進行離心分離5～15min后，靜置分層，分別收集上層反膠束相和下層水相，然后再次在收集的水相中，加入2～4倍體積的第(2)步制備出的P₂₀₄反膠束溶液，再次進行萃取和離心分離，再次分別收集下層水相和上層反膠束相，如此重復萃取2～4次，最后合并各次收集的上層萃取有GSH的反膠束溶液；

(4)反萃取

第(3)步完成后，按第(3)步最后收集的萃取有GSH的反膠束溶液∶氯化鈉的摩爾濃度為0.05～0.2mol/L的氯化鈉溶液的體積比為1∶2～4的比例，先將萃取有GSH的反膠束溶液置于萃取器中，再加入氯化鈉溶液，攪拌混合均勻，最后用氫氧化鈉溶液調節(jié)其pH值為10.0～12.0，進行攪拌反萃取35～65min，再用離心機以7000～9000r/min的速度，對其進行離心分離5～15min，靜置分層后，分別收集下層水相和上層反膠束相，然后，再次在收集的反膠束相中，再次加入2～4倍體積的氯化鈉溶液，再次調節(jié)pH值，再次進行反萃取和離心分離，再次分別收集下層水相和上層反膠束相，如此重復反萃取2～4次，最后，分別合并各次收集的反萃取有GSH的下層水相和反萃取后的上層反膠束相；

(5)制備GSH濃縮液

第(4)步完成后，將第(4)步最后收集的反萃取有GSH的下層水相，置于截留分子量為1000的超濾器中，在壓力為0.1～0.25Mpa下，進行超濾，當超濾截留液體積降低至原體積0.1～0.2時，補充蒸餾水至原體積，再進行超濾，如此重復，直至超濾濾過液中無氨基酸反應為止，再分別收集超濾截留液和超濾濾過液，然后將收集的超濾截留液，置于真空濃縮器中，在溫度為60～70℃、真空度為0.06～0.08Mpa的條件下，進行真空濃縮，對收集的超濾濾過液，通過真空濃縮器，進行真空濃縮為復合氨基酸濃縮液；

(6)制備GSH凍干粉

在第(5)步完成后，將第(5)步制備出的GSH濃縮液，在-20～-15℃溫度下，預凍1～2小時后，再置于冷凍干燥機中，在壓力為30～50Pa、溫度為-60～-50℃條件下，冷凍干燥20～30小時，就制備出白色的GSH凍干粉；

(7)再生萃取劑

在第(6)步完成后，在第(4)步最后收集的反膠束溶液中，加入無水硫酸鈉干燥劑，加入的無水硫酸鈉的質量為收集的反膠束溶液體積的2～5％，混合均勻后，靜置吸水20～30小時，再用離心機以4000～6000r/min的速度，離心分離10～20min，分別收集上層萃取劑清液和下層沉淀，對收集的下層沉淀，在100～110℃下進行烘干。