[發(fā)明專利]麗格海棠組織培養(yǎng)快速繁殖方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200810067879.6 | 申請日: | 2008-06-18 |
| 公開(公告)號: | CN101292630A | 公開(公告)日: | 2008-10-29 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 李曉東;盧愛華;鄧盾 | 申請(專利權(quán))人: | 深圳職業(yè)技術(shù)學(xué)院 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00;C12N5/04 |
| 代理公司: | 深圳市維邦知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)所 | 代理人: | 黃莉 |
| 地址: | 518055*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 海棠 組織培養(yǎng) 快速 繁殖 方法 | ||
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域,涉及植物組織培養(yǎng)技術(shù),具體涉及一種麗 格海棠組織培養(yǎng)快速繁殖方法。
背景技術(shù)
麗格海棠(Rieger?begonias),又稱玫瑰海棠,秋海棠科秋海棠屬的多年生草 本花卉,是球根海棠和野生秋海棠的雜交品系,屬于高檔盆花。一般無法形成 種子,大多都采用扦插繁殖,但麗格海棠對溫度要求比較嚴(yán)格,怕熱怕冷,多 數(shù)品種不宜強光照射,扦插養(yǎng)護(hù)很不容易,而且麗格海棠種質(zhì)資源退化較為嚴(yán) 重,扦插繁殖的質(zhì)量很不理想。組織培養(yǎng)繁殖植物的技術(shù)是一種特殊的營養(yǎng)繁 殖方式,現(xiàn)在一般稱為快速繁殖技術(shù)或微繁殖技術(shù)。它是在無菌條件下,利用植 物體的一部分,包括細(xì)胞、組織和器官,在人工控制的營養(yǎng)和環(huán)境條件下繁殖植 物的方法。該技術(shù)比較成熟,設(shè)備比較簡單,技術(shù)要求不十分高,而經(jīng)濟(jì)效益可觀, 越來越受到人們的重視。因此,采用工廠化生產(chǎn)方式繁育麗格海棠種苗既能防 止品種退化,保證種苗質(zhì)量,又能提供大量優(yōu)質(zhì)廉價的種苗。現(xiàn)有技術(shù)一般取 麗格海棠幼嫩的葉片、莖段或莖尖作外植體,以MS為基本培養(yǎng)基,調(diào)節(jié)細(xì)胞分 裂素和生長素比例,在25至28攝氏度培養(yǎng)室中,14到16小時光照條件下,約 40至60天可誘導(dǎo)分化出小苗。但是現(xiàn)有技術(shù)的出苗誘導(dǎo)率不高;而且誘導(dǎo)時間 也較長,不能適應(yīng)更加快速的市場需求。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種能更快繁殖出麗格海棠幼苗,且誘 導(dǎo)率更高的麗格海棠組織培養(yǎng)快速繁殖方法。
為解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:
麗格海棠組織培養(yǎng)快速繁殖方法,包括如下步驟:
S1)、外植體材料處理:即選用麗格海棠的幼嫩葉片作為外植體材料進(jìn)行處 理,制備出符合要求的外植體,外植體材料處理包括清洗、消毒和裁剪,其中, 所述清洗將用于制作外植體的外植體材料洗凈,所述消毒對洗凈的外植體材料 作消毒處理,所述裁剪將消毒后的外植體材料裁成合適大小的外植體;
S2)、誘導(dǎo):即將步驟S1中所述的外植體接種到培養(yǎng)基上,在誘導(dǎo)條件下 誘導(dǎo)出芽,所述培養(yǎng)基的配方為MS+6-芐氨基喋呤0.4~0.6mg/l+萘乙酸0.1~ 0.3mg/l+蔗糖25~30g+瓊脂6~8g;所述誘導(dǎo)條件包括光照度小于1500lx的弱光 照條件,步驟S2中所述弱光照條件包括兩個階段,第一個階段的光照度為100~ 200lx,第二個階段的光照度為1100~1200lx,所述第一個階段的光照時間為10~ 14天,所述第二個階段的光照時間為18~28天。
所述清洗包括自來水沖洗和含洗潔精的水浸洗。
所述消毒包括酒精消毒和加入吐溫-20的次氯酸鈉溶液浸洗消毒。
所述裁剪為將外植體材料去掉葉緣和葉柄之后切成0.5~1cm×0.5~1cm大小 的葉片塊。
采用本發(fā)明技術(shù)方案的麗格海棠組織培養(yǎng)快速繁殖方法,與現(xiàn)有技術(shù)對比 的有益效果在于:
由于進(jìn)一步優(yōu)化了麗格海棠組織培養(yǎng)快速繁殖過程中的光照條件,使得麗 格海棠的誘導(dǎo)時間更短;而且誘導(dǎo)率更高,誘導(dǎo)率可達(dá)100%。
由于弱光照條件進(jìn)一步優(yōu)化分解為兩個階段,且在兩個階段的光照度控制 更加準(zhǔn)確,能夠達(dá)到更好的誘導(dǎo)效果。
由于將第一個階段的弱光照條件的光照時間確定為10~14天,過程控制更 加精準(zhǔn),效果更好。
由于將第二個階段的弱光照條件的光照時間確定為18~28天,過程控制更 加精準(zhǔn),效果更好。
由于采用MS+6-芐氨基喋呤0.4~0.6mg/l+萘乙酸0.1~0.3mg/l+蔗糖25~30g+ 瓊脂6~8g作為培養(yǎng)基,誘導(dǎo)培養(yǎng)效果較好。
由于外植體材料處理包括清洗、消毒和裁剪,能夠獲得更加優(yōu)質(zhì)的外植體, 為組織培養(yǎng)快速繁殖方法奠定良好的基礎(chǔ)。
由于優(yōu)選麗格海棠的幼嫩葉片作為外植體材料,為組織培養(yǎng)快速繁殖提供 良好的材料保證。
由于清洗包括自來水沖洗和含洗潔精的水浸洗,可以使得清潔更加徹底。
由于消毒包括酒精消毒和加入吐溫-20的次氯酸鈉溶液浸洗消毒,消毒更加 徹底。
由于將外植體材料去掉葉緣和葉柄之后切成0.5~1cm×0.5~1cm大小的葉片 塊作為外植體,誘導(dǎo)培養(yǎng)更加方便,且效果更好。
具體實施方式
下面結(jié)合具體實例對本發(fā)明的實施做進(jìn)一步的說明:
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