[發(fā)明專利]一種胸腺五肽的制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810064651.1
• 申請(qǐng)日: 2008-06-03
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101597318A
• 公開(kāi)（公告）日: 2009-12-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 葛存慧;梁勝;任仲輝;王永存;田學(xué)萍;李鄭武;趙華南;李會(huì)成;陳玉軍;冷國(guó)慶
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 哈藥集團(tuán)生物工程有限公司
• 主分類號(hào): C07K1/02
• 分類號(hào): C07K1/02;C07K1/08;C07K1/20
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種合成胸腺五肽Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-OH的方法，其特征在于進(jìn)行如下步驟的反應(yīng)：

(1)酪氨酸芐酯鹽酸鹽為起始原料，以N-甲基嗎啉為催化劑，采用氯甲酸烷基酯為活化劑，活化Fmoc-Val-OH形成高活性的混合酸酐，與Tyr(Bzl)-Obzl·HCl反應(yīng)，得到Fmoc-Val-Tyr(Bzl)-Obzl·HCl二肽；

(2)采用脫保護(hù)試劑將(1)中制得的二肽的氨端脫保護(hù)，得到Val-Tyr(Bzl)-Obzl·HCl二肽；

(3)以N-甲基嗎啉為催化劑，采用氯甲酸烷基酯為活化劑，活化Fmoc-Asp(OBut)-OH形成高活性的混合酸酐，使(2)中制得的產(chǎn)物與Fmoc-Asp(OBut)-OH反應(yīng)得到Fmoc-Asp(OBut)-Val-Tyr(Bzl)-Obzl·HCl三肽；

(4)采用脫保護(hù)試劑將(3)中制得的三肽的氨端脫保護(hù)，得到Asp(OBut)-Val-Tyr(Bzl)-Obzl·HCl三肽；

(5)以N-甲基嗎啉為催化劑，采用氯甲酸烷基酯為活化劑，活化Fmoc-Lys(OBut)-OH形成高活性的混合酸酐，與(4)中制得的產(chǎn)物反應(yīng)，得到Fmoc-Lys(OBut)-Asp(OBut)-Val-Tyr(Bzl)-Obzl·HCl四肽；

(6)采用脫保護(hù)試劑將(5)中制得的四肽的氨端脫保護(hù)，得到Lys(OBut)-Asp(OBut)-Val-Tyr(Bzl)-Obzl·HCl四肽；

(7)以N-甲基嗎啉為催化劑，采用氯甲酸烷基酯為活化劑，活化Boc-Arg-OH·HCl形成高活性的混合酸酐，與(6)中制得的產(chǎn)物反應(yīng)，得到保護(hù)的Boc-Arg-Lys(OBut)-Asp(OBut)-Val-Tyr(Bzl)-Obzl五肽；

(8)將(7)中制得的五肽中加入適量的TFA/H₂O/TIS＝95/2.5/2.5脫保護(hù)，得到Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-OH五肽。

2.權(quán)利要求1的方法，所述方法還包括將(8)中制得的產(chǎn)物經(jīng)C18反相柱純化脫鹽，得到純化產(chǎn)物。

3.權(quán)利要求1的方法縮合步驟采用氯甲酸乙酯或氯甲酸異丁酯為活化劑。

4.權(quán)利要求1的方法所述，其步驟(1)、(3)、(5)和(7)中混合酸酐生成過(guò)程中的反應(yīng)溫度為-20℃～-10℃，各肽生成反應(yīng)溫度為-10℃～0℃，其步驟(2)、(4)、(6)脫保護(hù)反應(yīng)溫度為20℃～30℃，其步驟(8)脫保護(hù)反應(yīng)溫度為10℃～40℃。

5.權(quán)利要求1的方法所述，其步驟(1)、(3)、(5)和(7)中混合酸酐生成過(guò)程中的反應(yīng)時(shí)間為0.5～1小時(shí)，各肽生成反應(yīng)為1～4小時(shí)，其步驟(2)、(4)、(6)脫保護(hù)反應(yīng)時(shí)間為20分鐘～40分鐘。