[發明專利]一種中國被毛孢生理小種的發現及工藝優化

無效

• 申請號: 200810061049.2
• 申請日: 2008-05-07
• 公開（公告）號: CN101307352A
• 公開（公告）日: 2008-11-19
• 發明（設計）人: 傅惠英;柯越海;鄭勇軍;柯傳奎
• 申請（專利權）人: 柯傳奎
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04;C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

(一)技術領域

本發明涉及優良中國被毛孢生理小種的篩選及其產業化方法改進。

(二)背景技術

冬蟲夏草與人參、鹿茸同被譽為中國三大寶，有“百藥之王”的美稱，被歷代醫家稱為“理諸虛百損之圣藥”。近年來，由于冬蟲夏草價格持續上漲，而冬蟲夏草產量又在逐漸下降，市場上出現了各種各樣的假冬蟲夏草和假冬蟲夏草制品，真偽難辨。如何鑒別冬蟲夏草？如何使冬蟲夏草真正產業化，來解決市場的供不應求，緩解采挖冬蟲夏草帶來嚴重的環境污染，成為了人們日益關注的問題。

蟲草屬有497種，中藥冬蟲夏草只是其中的一種，拉丁名全稱為Cordycepssinensis(Berk.)Sacc.，是以蟲草蝙蝠蛾幼蟲為宿主并長成蟲型菌核和草型子座的復合體(子座是高等真菌的有性器官)。冬蟲夏草產業化首決條件是確切分離到冬蟲夏草菌。2005年10月29日，中國菌物學會在北京召開了“冬蟲夏草及其無性型研討會”，與會專家就冬蟲夏草菌及其無性型科學名稱的正確使用一致做出了下列結論：

1.冬蟲夏草菌的拉丁學名是Cordyceps?sinensis，其無性型是中國被毛孢，國際承認的無性型拉丁學名為：Hirsrtella?sinensis?Liu，Guo，Yu?etZeng(1989)。冬蟲夏草頭孢(Cephalosporium?dongchongxiacaonia)、蝙蝠蛾被毛孢(Hirsutella?hepiali)、中華束絲孢(Synnema?tium?sinense)為中國被毛孢的同種異名，且系不合格發表名稱，不為國際所承認。

2.中國擬青霉(Paecilomyces?sinensis?Chen，1984)不是冬蟲夏草菌的無性型，而是不同于冬蟲夏草菌的另一種真菌，其有性型名稱尚不明確。

3.蝙蝠蛾擬青霉(Paecilomyces?hepiali?Chen?et?Dai，1989)不是冬蟲夏草菌的無性型，而是不同于冬蟲夏草菌的另一種真菌，其有性型名稱尚不明確。

此外，雖然下列菌種均未被納入上述實驗過程，但是，至靈膠囊生產菌被孢霉屬真菌，在親緣關系上是和子囊菌相距甚遠的結合菌門的成員，因此，與冬蟲夏草菌無關。標明為“人工冬蟲夏草菌絲粉”的心肝寶膠囊的生產菌“粉紅膠霉”則是一種真菌寄生菌；其膠霉屬(Gliocladium?Corda)是肉座菌科(Hypocreaceae)小燦球赤殼菌屬(Sphaerostibella)的無性型，也不是冬蟲夏草菌。根據上述分析，無論是至靈膠囊、寧心寶膠囊或心肝寶膠囊的生產菌均非冬蟲夏草菌的無性型。

以中國被毛孢為菌種發酵生產制品的出現(如百令膠囊)，不但有效緩解了冬蟲夏草市場供需矛盾，延緩草原環境惡化，而且使冬蟲夏草變得有名但不再昂貴，能讓更多的老百姓享用得起。但是也存在許多不足，人們使用人工冬蟲夏草制品后容易上火，少數產生胃腸道不良反應，而天然冬蟲夏草性溫平，幾乎很少發生，所以人工冬蟲夏草制品在療效上與天然冬蟲夏草存在一定的距離；另外，人工冬蟲夏草發酵廢液的排放對環境也造成比較大的污染。解決這些問題，一方面需要從優良菌種的篩選著手，另一方面從發酵工藝上進行改進。

本發明就是發現一種優良中國被毛孢生理小種及其產業化方法的改進。

(三)發明內容

本發明使用細胞學動態信息分析篩選出了一種中國被毛孢生理小種，并通過改進其產業化工藝，所得產物與青藏高原那曲、玉樹產的冬蟲夏草從A549、RBL等細胞捕獲細胞學動態信息的集成數據相同。

為達到發明目的本發明采用的技術方案是：

1.構建天然冬蟲夏草標準化細胞動態信息圖譜

1.1天然冬蟲夏草提取

稱取不同產地冬蟲夏草0.09g，加1mL純凈水，浸泡30分鐘，超聲10分鐘，沸水加熱20分鐘，離心，取上清液備用。

2.2提取液介入細胞培養

取不同產地冬蟲夏草提取液10uL，加入鋪有10³～10⁴個/孔細胞的相對應孔內，使用市售儀器獲取細胞學動態信息，建立冬蟲夏草標準細胞動態信息圖譜。

2.中國被毛孢菌種篩選

2.1中國被毛孢菌絲體提取

稱取中國被毛孢菌絲體0.09g，加1mL純凈水，浸泡30分鐘，超聲10分鐘，沸水加熱20分鐘，離心，取上清液備用。

2.2提取液介入細胞培養