[發明專利]一種液體深層發酵生產角蛋白酶的方法

有效

• 申請號: 200810060639.3
• 申請日: 2008-04-15
• 公開（公告）號: CN101260393A
• 公開（公告）日: 2008-09-10
• 發明（設計）人: 李永泉;呂龍賢;管文軍;沈鈱豪
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12N9/50
• 分類號: C12N9/50;C12R1/01
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司
• 代理人: 張法高

1、一種液體深層發酵生產角蛋白酶的方法，其特征在于包括如下步驟：

1)采用涂布或劃線的方法將粘金黃桿菌接種到斜面培養基上，于18～37℃復壯培養18～36小時，得到復壯菌體；

2)將復壯菌體接種到液體種子培養基中，于18～37℃，100～300rpm條件下培養18～36小時，得到發酵種子；

3)將發酵種子按發酵培養基體積的5～15％接入發酵罐中，罐溫18～37℃、罐壓0.2～0.8kg/cm²，攪拌速率100～300rpm，通氣量為1∶0.3～2.0，發酵培養時間18～60小時。

2.根據權利要求1所述的一種液體深層發酵生產角蛋白酶的方法，其特征在于所述的粘金黃桿菌為Chryseobacterium?L99，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC?No.2295。

3.根據權利要求1所述的一種液體深層發酵生產角蛋白酶的方法，其特征在于所述的斜面培養基的成份為：每1000毫升中含NaCl5～15克、酵母粉或酵母膏5～10克、蛋白胨5～15克、瓊脂粉10～20克和水900～1000毫升。

4.根據權利要求1所述的一種液體深層發酵生產角蛋白酶的方法，其特征在于所述的種子培養基的成份為：每1000毫升中含NaCl5～15克、酵母粉或酵母膏5～10克、蛋白胨5～15克和水900～1000毫升。

5.根據權利要求1所述的一種液體深層發酵生產角蛋白酶的方法，其特征在于所述的發酵培養基的成份為：每1000毫升中含可溶性淀粉0.1～100克、蔗糖0.1～100克、葡萄糖0.1～100克、酪蛋白0.1～100克、酵母粉或酵母膏0.1～100克、蛋白胨0.1～100克、角蛋白0.1～200克、K₂PO₄?0.1～10克、NaH₂PO₄·2H₂O0.1～10克、MgCl₂·6H₂O?0.1～5克和水900～1000毫升。